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세포층을 나노 물질에 노출하고 형광염색하는 단계;상기 세포층에 대하여 유세포 분석을 수행하는 단계; 및상기 유세포 분석 결과에 의해 세포사멸 정도를 정량화하는 단계를 포함하는, in vitro 나노물질 위해성 평가방법
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제1항에 있어서, 상기 유세포 분석결과는 산란광 데이터 및 형광신호 데이터인 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 산란광 데이터는 나노 물질을 흡수(uptake)한 세포를 구별하는데 이용되고, 상기 형광신호 데이터는 상기 나노 물질을 흡수한 세포에 대한 세포사멸 정도를 평가하는데 이용되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 세포사멸 정도는 활성산소종 발생 정도(ROS assay)에 의해 정량화되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 나노물질은 금나노, 은나노, SWCNT(single-walled carbon nanotube), MWCNT(multi-walled carbon nanotube),풀러린(fullerene, C60), 철 나노입자, 카본블랙, 이산화티탄, 산화알루미늄, 산화세륨, 산화아연, 이산화규소, 폴리스틸렌, 덴드리머, 나노클레이로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 나노물질인 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 세포층은 미세유체 세포칩, 멀티 웰 또는 슬라이드 글라스에 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 형광염색은 유기형광 염료, 무기나노입자 또는 형광단백질을 이용하여 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 나노 물질에의 노출은 화학물질 노출기구, 또는 정립 및 역립 노출기구를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법
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제8항에 있어서, 정립 및 역립 노출기구를 이용하여 나노 물질에 노출하는 경우, 상기 나노 물질의 응집 또는 침전 정도에 따라 나노물질의 불균일한 농도를 측정하는 것을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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나노 물질을 실험동물에 투여하는 단계;상기 실험 동물로부터 생체시료를 채취하여 형광염색하는 단계;상기 생체시료에 대하여 유세포 분석을 수행하는 단계; 및상기 유세포 분석 결과에 의해 세포사멸 정도를 정량화하는 단계를 포함하는, in vivo 나노물질 위해성 평가방법
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제10항에 있어서, 상기 투여는 구강, 피부, 또는 정맥을 통하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
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제10항에 있어서, 상기 생체시료는 혈액, 타액, 또는 뇨인 것을 특징으로 하는 방법
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제10항에 있어서, 상기 유세포 분석결과는 산란광 데이터 및 형광신호 데이터인 것을 특징으로 하는 방법
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제13항에 있어서, 상기 산란광 데이터는 나노 물질을 흡수(uptake)한 생체시료를 구별하는데 이용되고, 상기 형광신호 데이터는 상기 나노물질을 흡수한 생체시료에 대한 세포사멸 정도를 평가하는데 이용되는 것을 특징으로 하는 방법
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제10항에 있어서, 상기 나노물질은 금나노, 은나노, SWCNT(single-walled carbon nanotube), MWCNT(multi-walled carbon nanotube),풀러린(fullerene, C60), 철 나노입자, 카본블랙, 이산화티탄, 산화알루미늄, 산화세륨, 산화아연, 이산화규소, 폴리스틸렌, 덴드리머, 나노클레이로 구성된 군에서 선택되는 1종 이상의 나노물질인 것을 특징으로 하는 방법
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제10항에 있어서, 상기 형광염색은 유기형광 염료, 무기나노입자 또는 형광단백질을 이용하여 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항 또는 제10항에 있어서, 상기 유세포 분석은광원장치; 산란광 및 형광신호를 검출하는 검출장치;세포 배양 플랫 폼; 및 세포사멸 정도를 정량화하는 데이터 처리장치를 포함하는 유세포 분석기를 이용하여 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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제17항에 있어서, 상기 유세포 분석은 전면 산란광 및 측면 산란광의 강도를 이용하여 나노 물질을 흡수(uptake)한 세포를 구별하는 것을 특징으로 하는 방법
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제18항에 있어서, 상기 구별된 나노 물질을 흡수(uptake)한 세포들에 대하여, 형광 방출 신호를 연계하여 분석하는 것을 특징으로 하는 방법
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