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재조합 대장균 및 상기 대장균을 이용한 폴리하이드록시부티레이트의 대량 생산방법

  • 기술번호 : KST2015147183
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 알칼리게네스 유트로퍼스(Alcaligenes eutrophus) 유래의 phbCAB 유전자를 갖는 형질전환된 재조합 대장균 및 상기 대장균을 이용한 폴리하이드록시알카노에이트(polyhydroxyalkanoate)의 대량 생산방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 알칼리게네스 유트로퍼스 유래의 phbCAB 유전자를 갖는 형질전환된 재조합 대장균 MG1655/pTZ18U-PHB 또는 JIL938/pTZ18U-PHB, 및 알칼리게네스 유트로퍼스 유래의 phbCAB 유전자를 갖는 형질전환된 대장균을 제조하는 단계; 상기 재조합 대장균을 배지에 접종하고, 세포 배양하는 단계(세포 생장기); 상기 재조합 대장균으로부터 폴리하이드록시알카노에이트 생성을 유도하는 단계(세포 정지기 및 산물 생성기); 및 상기 재조합 대장균으로부터 폴리하이드록시알카노에이트의 세포외 분비를 유도하는 단계를 포함하는 폴리하이드록시알카노에이트의 대량 생산방법에 관한 것이다. 본 발명의 생산방법은 간단한 회분배양에 의해서 대량의 폴리하이드록시부티레이트 등 폴리하이도록시알카노에이트의 대량생산을 가능하게 할 뿐만 아니라 발효과정 및 분리 정제 과정을 단순화함으로써 기존의 난분해성 합성플라스틱을 대체할 수 있는 생분해성 폴리하이드록시알카노에이트의 산업적 이용을 용이하게 한다.
Int. CL C12N 1/21 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020040024154 (2004.04.08)
출원인 한국원자력연구원
등록번호/일자 10-0656529-0000 (2006.12.05)
공개번호/일자 10-2005-0099076 (2005.10.13) 문서열기
공고번호/일자 (20061213) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2004.04.08)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국원자력연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김인규 대한민국 대전광역시유성구
2 정일래 대한민국 대전광역시유성구
3 박효국 대한민국 대전광역시동구
4 김국찬 대한민국 대전광역시유성구
5 최병호 대한민국 대전광역시유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국원자력연구소 대한민국 대전 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2004.04.08 수리 (Accepted) 1-1-2004-0144895-09
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2005.09.12 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2005.10.19 수리 (Accepted) 9-1-2005-0066365-03
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2005.12.01 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2005-0616060-77
5 지정기간연장신청서
Request for Extension of Designated Period
2006.02.01 수리 (Accepted) 1-1-2006-0075916-42
6 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2006.02.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2006-0096229-20
7 의견서
Written Opinion
2006.02.09 수리 (Accepted) 1-1-2006-5011720-51
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2006.06.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0359280-32
9 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2006.07.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2006-0494844-14
10 의견서
Written Opinion
2006.07.11 수리 (Accepted) 1-1-2006-0494848-07
11 등록결정서
Decision to grant
2006.12.01 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0716709-57
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2007.05.14 수리 (Accepted) 4-1-2007-5073714-01
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2007.06.01 수리 (Accepted) 4-1-2007-5085193-38
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2007.07.26 수리 (Accepted) 4-1-2007-5117707-02
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2007.07.26 수리 (Accepted) 4-1-2007-5117973-29
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.06.22 수리 (Accepted) 4-1-2012-5134067-95
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.09.16 수리 (Accepted) 4-1-2014-5109542-64
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번호 청구항
1 1
삭제
2 2
ⅰ) 알칼리게네스 유트로퍼스 유래의 phbCAB 유전자를 갖는 형질전환된 재조합 대장균을 제조하는 단계;ⅱ)상기 재조합 대장균을 배지 1㎖당 105개 이하의 저농도의 세포 수로 접종하여, 세포 배양하는 단계(세포 생장기);ⅲ) 상기 재조합 대장균으로부터 폴리하이드록시알카노에이트(polyhydroxyalkanoate, PHA) 생성을 유도하는 단계(세포 정지기 및 산물 생성기); 및ⅳ) 상기 재조합 대장균으로부터 PHA의 세포외 분비를 유도하는 단계(산물 분비 및 정제기)를 포함하는 PHA의 대량 생산방법
3 3
제 2항에 있어서, 상기 phbCAB 유전자 중 phbC 유전자는 서열번호 1로 기재되는 염기서열인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
4 4
제 2항에 있어서, 상기 phbCAB 유전자 중 phbA 유전자는 서열번호 2로 기재되는 염기서열인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
5 5
제 2항에 있어서, 상기 phbCAB 유전자 중 phbB 유전자는 서열번호 3으로 기재되는 염기서열인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
6 6
제 3항 내지 제 5항중 어느 한항에 있어서, 상기 phbCAB 유전자는 서열번호 1, 서열번호 2 및 서열번호 3의 순서로 기재되는 염기서열인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
7 7
제 2항에 있어서, 단계 i)의 재조합 대장균은 상기 phbCAB 유전자를 포함하는 pTZ18U-PHB 플라스미드로 형질전환되어 제조되는 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
8 8
제 2항에 있어서, 상기 재조합 대장균은 MG1655/pTZ18U-PHB인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
9 9
제 2항에 있어서, 상기 재조합 대장균은 ldh 유전자가 돌연변이된 균주인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
10 10
삭제
11 11
제 2항에 있어서, 상기 세포 생장기에 접종하는 세포수는 배지 1 ㎖당 2× 104개 이하인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
12 12
제 2항에 있어서, 단계 ii)의 배지는 박토-트립톤, 박토-효모 추출물 및 NaCl을 포함하는 LB 배지인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
13 13
제 12항에 있어서, 상기 LB 배지는 1 ℓ당, 10 내지 30 g의 박토-트립톤, 5 내지 15 g의 박토-효모 추출물, 10 내지 30 g의 NaCl을 포함하는 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
14 14
제 13항에 있어서, 상기 LB 배지는 1 ℓ당 10 내지 20 g의 박토-트립톤, 5 내지 10 g의 박토-효모 추출물, 10 내지 20 g의 NaCl을 포함하는 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
15 15
제 2항 또는 13항에 있어서, 단계 ii) LB 배지에 포도당이 10% 이하의 농도로 첨가되는 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
16 16
제 15항에 있어서, 포도당이 7% 이하의 농도로 첨가되는 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
17 17
제 12항에 있어서, 단계 iii)의 세포 정지기 및 산물 생성기에 포도당을 추가로 첨가하는 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
18 18
제 2항에 있어서, 상기 PHA는 폴리하이드록시부티레이트(polyhydroxybutyrate, PHB)인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
19 18
제 2항에 있어서, 상기 PHA는 폴리하이드록시부티레이트(polyhydroxybutyrate, PHB)인 것을 특징으로 하는 대량 생산방법
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4 US07771964 US 미국 FAMILY
5 US20050227340 US 미국 FAMILY

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2 JP4384943 JP 일본 DOCDBFAMILY
3 US2005227340 US 미국 DOCDBFAMILY
4 US7771964 US 미국 DOCDBFAMILY
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