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(1) 핵 국재화 신호(nuclear localization signal, nls) 영역; (2) 알파 1,3-갈락토실트랜스퍼라아제(α1,3-galactosyl transferase, α1,3-GT) 핵산 서열에 상동인 4 내지 6 kb 길이의 핵산 서열을 갖는 제1 영역; (3) DAF(decay accelerating factor)를 코딩하는 유전자 영역; (4) 알파 1,2-푸코실트랜스퍼라아제(human α1,2-fucosyltransferase, HT)를 코딩하는 유전자 영역; (5) 양성 선별마커 영역; 및 (6) α1,3-GT 핵산 서열에 상동인 2 내지 4 kb 길이의 핵산 서열을 갖는 제2 영역을 포함하고, 상기 (1) 내지 (6)영역들이 5'말단에서부터 순서대로 구성되는 것인 넉인 벡터
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제1항에 있어서, 상기 α1,3-GT는 돼지 또는 미니어쳐 돼지 유래인 것인 넉인 벡터
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제1항에 있어서, 제1 영역이 돼지 α1,3-GT 엑손 4의 업스트림의 NcoI 제한효소 인식 위치로부터 5
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제1항에 있어서, 제2 영역이 돼지 α1,3-GT 엑손 4의 스타트 위치로부터 다운스트림의 2
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제1항에 있어서, 상기 양성 선별마커가 네오마이신 (Neomycin: Neo), 하이그로마이신 (hygromycin: Hyg), 히스티디놀 디하이드로게나제(histidinol dehydrogenase gene: hisD) 및 구아닌 포스포리보실트랜스퍼라제 (guanine phosphosribosyltransferase: Gpt)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것인 넉인 벡터
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제1항에 있어서, 음성 선별마커를 추가로 포함하는 것인 넉인 벡터
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제6항에 있어서, 상기 음성 선별마커가 디프테리아 톡신 (Diphtheria toxin), 헤르페스 심플렉스 바이러스-싸이미딘 키나제 (Herpes simplex virus-thymidine kinase: HSV-tk), 하이포잔틴 포스포리보실 트랜스퍼라아제 (hypoxanthine phosphoribosyl transferase: Hprt) 및 사이토신 디아미네즈 (cytosine deaminase)로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 넉인 벡터
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제1항에 있어서, 상기 벡터는 폴리 A(poly A) 서열을 추가로 포함하는 것인 넉인 벡터
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제1항의 벡터로 유전자 타겟팅된 세포
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제9항에 있어서, 기탁번호 KCTC12204BP인 세포
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제9항의 세포로 핵이식된 수정란
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제1항의 벡터가 도입되어 알파 1,3-갈락토실트랜스퍼라아제 유전자가 넉 아웃됨과 동시에 DAF 유전자와 HT 유전자가 넉인된, 인간을 제외한 형질전환 동물
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(1) 제1항의 넉인 벡터를 구축하는 단계; (2) 돼지로부터 체세포를 분리 및 배양하는 단계; (3) 상기 구축된 넉인 벡터를 상기 배양한 체세포에 도입하여 상동재조합을 유도하는 단계; 및 (4) 상동재조합에 의해 돼지 알파 1,3-갈락토실트랜스퍼라아제 유전자가 타겟팅된 돼지의 체세포를 선별하는 단계를 포함하는, 알파 1,3-갈락토실트랜스퍼라아제 유전자가 타겟팅된 돼지의 체세포를 제조하는 방법
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(1) 제13항의 방법에 의하여 알파 1,3-갈락토실트랜스퍼라아제 유전자가 타겟팅된 돼지의 체세포를 수득하는 단계; (2) 돼지 난자의 핵을 제거하고 상기 유전자 타겟팅된 세포를 도입하여 체세포 핵이식된 수정란을 제조하는 단계; 및 (3) 상기 수정란을 착상시키는 단계를 포함하는, 알파 1,3-갈락토실트랜스퍼라아제 유전자가 넉 아웃됨과 동시에 DAF 유전자와 HT 유전자가 넉인된 형질전환 돼지를 제조하는 방법
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