1 |
1
1) 삼투압 증진제로 0
|
2 |
2
삭제
|
3 |
3
삭제
|
4 |
4
삭제
|
5 |
5
제 1항에 있어서, 단계 1)의 수크로오스의 농도는 0
|
6 |
6
제 1항에 있어서, 단계 1)의 예비배양기간은 3 ~ 7일인 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
7 |
7
제 1항에 있어서, 단계 1)의 예비배양기간은 4 ~ 6일인 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
8 |
8
제 1항에 있어서, 단계 1)의 예비배양기간은 5일인 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
9 |
9
삭제
|
10 |
10
제 1항에 있어서, 단계 2)의 DMSO, 수크로오스 및 글라이세롤은 각각 0
|
11 |
11
제 1항에 있어서, 단계 2)의 DMSO, 수크로오스 및 글라이세롤은 각각 1 M의 농도로 혼합되는 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
12 |
12
제 1항에 있어서, 단계 2)는 0
|
13 |
13
제 1항에 있어서, 단계 2)는 0
|
14 |
14
제 1항에 있어서, 단계 3)은 냉동고에서 -0
|
15 |
15
제 1항에 있어서, 단계 3)은 냉동고에서 -0
|
16 |
16
제 1항에 있어서, 단계 4)는 액체질소에 동결보존하는 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
17 |
17
제 1항에 있어서, 단계 5)의 동결된 벼세포는 1일 내지 5개월 동안 보존하는 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
18 |
18
제 1항에 있어서, 단계 5)의 동결된 벼세포는 1일 내지 3개월 동안 보존하는 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
19 |
19
제 1항에 있어서, 단계 5)의 동결된 벼세포는 1일 내지 1개월 동안 보존하는 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
20 |
20
삭제
|
21 |
21
삭제
|
22 |
22
제 1항에 있어서, 단계 1)의 벼세포는 hCTLA4Ig(human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immnoglobulin)가 도입되어 형질전환된 것을 특징으로 하는 동결보존 방법
|
23 |
23
제 1항의 방법에 의해 동결보존된 형질전환 벼세포
|
24 |
24
제 23항에 있어서, hCTLA4Ig가 도입되어 형질전환된 것을 특징으로 하는 형질전환 벼세포
|
25 |
25
1) 제 1항의 방법으로 동결보존된 벼세포를 동결 온도 이상의 온도에서 해동시키는 단계;2) 단계 1)의 해동된 벼세포에서 동결보호제를 제거하는 단계;3) 단계 2)의 동결보호제가 제거된 벼세포에서 세포의 생존도를 측정하는 단계;4) 단계 3)의 세포 생존도가 뛰어난 벼세포를 선별하는 단계; 및5) 단계 4)의 선별된 벼세포를 고체배지에서 배양하는 단계를 포함하는 동결보전된 형질전환 벼세포 회수 방법
|
26 |
26
제 25항에 있어서, 단계 1)의 해동 온도는 0 ~ 70℃이며, 해동시간은 1 ~ 10분인 것을 특징으로 하는 회수 방법
|
27 |
27
제 25항에 있어서, 단계 1)의 해동 온도는 43℃이며, 해동시간은 3분인 것을 특징으로 하는 회수 방법
|
28 |
28
제 25항에 있어서, 단계 2)의 동결보호제는 진공조건에서 필터페이퍼를 이용하여 진공압 하에 제거하는 것을 특징으로 하는 회수 방법
|
29 |
29
제 28항에 있어서, 상기 진공압은 100 ~ 300 mmHg인 것을 특징으로 하는 회수 방법
|
30 |
30
제 28항에 있어서, 상기 진공압은 200 mmHg인 것을 특징으로 하는 회수 방법
|
31 |
31
제 25항에 있어서, 단계 3)의 세포 생존도 측정은 TTC(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride) 환원 방법인 것을 특징으로 하는 회수 방법
|
32 |
32
제 25항에 있어서, 단계 4)의 선별은 벼세포의 동결보존 전의 상태와 비교하여 선별하는 것을 특징으로 하는 회수 방법
|
33 |
33
제 25항에 있어서, 단계 5)의 배양기간은 3주인 것을 특징으로 하는 회수 방법
|