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돼지에서 유래되고 사람 에리트로포이에틴을 발현하는 유전자가 도입 및 적중된 체세포의 핵과 돼지에서 유래한 탈핵된 난자가 융합된 핵 이식란
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돼지의 방광에서 사람 에리트로포이에틴을 발현하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지
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제 2 항에 있어서, 상기 복제돼지의 형질이 제 1 항 또는 제 2 항의 중 어느 한 항의 핵 이식란의 형질과 동일한 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지
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(a) 돼지에서 유래한 체세포주에 사람 에리트로포이에틴을 발현하는 유전자를 도입 및 적중시키는 단계를 포함하는 공여핵 세포를 준비하는 단계;(b) 수핵 난자의 난구 세포를 제거하고, 수핵 난자의 제 1 극체를 포함한 세포질을 제거하여 난자를 탈핵하는 과정을 포함하는 돼지 유래의 수핵 난자를 준비하는 단계; 및(c) 상기 단계 (a)에서 준비된 공여핵 세포를 단계 (b)에서 준비한 탈핵된 난자에 이식하고 융합시키는 단계를 포함하는 돼지의 핵 이식란 작제 방법
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제 4 항에 있어서, 상기 체세포주에 사람 에리트로포이에틴을 발현하는 유전자를 도입 및 적중시키는 단계가 사람 에리트로포이에틴을 발현하는 유전자, 발현 프로모터, 마커 유전자를 포함하는 벡터를 작제하여 수행되는 것을 특징으로 하는 돼지의 핵 이식란 작제 방법
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제 5 항에 있어서, 상기 발현 프로모터가 돼지 유로플라킨 프로모터인 것을 특징으로 하는 돼지의 핵 이식란 작제 방법
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제 5 항에 있어서, 상기 마커 유전자가 GFP 발현 유전 및/또는 암피실린 저항성 유전자인 것을 특징으로 하는 돼지의 핵 이식란 작제 방법
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제 5 항에 있어서, 상기 벡터는 생화학적 방법을 사용하여 도입되는 것을 특징으로 하는 돼지의 핵 이식란 작제 방법
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제 8 항에 있어서, 상기 생화학적 방법이 FuGene6을 사용하는 것을 특징으로 하는 돼지의 핵 이식란 작제 방법
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제 4 항에 있어서, 상기 체세포주가 돼지의 태아 섬유아세포로부터 유래된 것을 특징으로 하는 돼지의 핵 이식란 작제 방법
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(a) 돼지에서 유래한 체세포주에 사람 에리트로포이에틴을 발현하는 유전자를 도입 및 적중시키는 단계를 포함하는 공여핵 세포를 준비하는 단계;(b) 수핵 난자의 난구 세포를 제거하고, 수핵 난자의 제 1 극체를 포함한 세포질을 제거하여 난자를 탈핵하는 과정을 포함하는 돼지 유래의 수핵 난자를 준비하는 단계;(c) 상기 단계 (a)에서 준비된 공여핵 세포를 단계 (b)에서 준비한 탈핵된 난자에 이식하고 융합시켜 핵 이식란을 작제하는 단계; 및 (d) 상기 단계 (c)의 핵 이식란을 대리모에 이식하여 산자를 출산하는 단계를 포함하는 돼지의 방광에서 사람 에리트로포이에틴을 생산하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 11 항에 있어서, 상기 단계 (a) 내지 (c)가 제 5 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항의 방법으로 수행되는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 11 항에 있어서, 상기 단계 (a)가 세포주를 계대배양, 혈청기아배양 또는 동결에 의해 보존하는 과정을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 11 항에 있어서, 상기 단계 (b)의 난자를 탈핵하는 과정이 미세작업장치를 이용하여 전처리된 난자의 투명대를 절개하여 절개창을 형성시킨 후, 절개창을 통하여 난자의 제 1 극체를 포함한 세포질을 10 내지 15% 제거하는 것을 포함하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 11 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 수핵 난자의 난구 세포는 수핵 난자를 하이알루로니다제로 처리한 다음, 물리적으로 제거하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 11 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 공여핵 세포를 탈핵 난자에 이식하는 과정이 공여세포를 난자의 투명대에 형성된 절개창으로 주입하는 것임을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 11 항에 있어서, 상기 단계 (c)가 작제된 핵 이식란을 대리모에 이식하기 전에 활성화시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 11 항에 있어서, 상기 핵 이식란의 활성화가 전기 융합을 통해 이루어지는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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제 18 항에 있어서, 상기 전기융합이 직류전압을 0
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제 17 항에 있어서, 상기 단계가 활성화된 핵 이식란을 NCSU-23 배지에 배양하는 체외배양 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제돼지의 생산방법
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돼지의 방광에서 사람 에리트로포이에틴을 발현하는 형질전환 복제돼지의 뇨로부터 사람 에리트로포이에틴을 수득하는 것을 특징으로 하는 사람 에리트로포이에틴을 생산하는 방법
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제 21 항에 있어서, 상기 형질전환 복제돼지는 상기 제 11 항 내지 제 20항 중 어느 한 항의 형질전환 복제돼지의 생산방법으로 생산된 것을 특징으로 하는 사람 에리트로포이에틴을 생산하는 방법
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