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소의 성숙한 개체로부터 유래되고 사람 프로유로키나제를 발현하는 유전자가 도입 및 적중된 체세포의 핵과 소에서 유래한 탈핵된 난자가 융합된 핵 이식란
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제1항에 있어서, 상기 핵 이식란이 SNU-B1(KCTC 10286BP)인 것을 특징으로 하는 핵 이식란
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제1항의 핵이식란을 대리모에 이식하여 생산되고 유선에서 사람 프로유로키나제를 발현하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소
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제4항에 있어서, 상기 복제 소의 형질이 제1항 또는 제3항의 핵 이식란의 형질과 동일한 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소
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(a) 소의 성숙한 개체로부터 유래한 체세포주에 사람 프로유로키나제를 발현하는 유전자를 도입 및 적중시키는 단계를 포함하는 공여핵 세포를 준비하는 단계; (b) 수핵 난자의 난구 세포를 제거하고, 수핵 난자의 제1극체를 포함한 세포질을 제거하여 난자를 탈핵하는 과정을 포함하는 소 유래의 수핵 난자를 준비하는 단계; 및 (c) 상기 (a)단계에서 준비된 공여핵 세포를 탈핵된 난자에 이식하고 융합시키는 단계를 포함하는 소의 핵 이식란 작제 방법
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제6항에 있어서, 상기 체세포주에 사람 프로유로기키나제를 발현하는 유전자를 도입 및 적중시키는 단계가 사람 프로유로키나제를 발현하는 유전자, 발현 프로모터, 마커 유전자를 포함하는 벡터를 작제하여 수행되는 것을 특징으로 하는 소의 핵 이식란 작제 방법
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제8항에 있어서, 상기 발현 프로모터가 β-카세인 프로모터인 것을 특징으로 하는 소의 핵 이식란 작제 방법
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제8항에 있어서, 상기 마커 유전자가 GFP 발현 유전자 또는 암피실린 저항 유전자인 것을 특징으로 하는 소의 핵이식란 작제 방법
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제8항에 있어서, 상기 벡터는 생화학적 방법을 사용하여 도입되는 것을 특징으로 하는 소의 핵이식란 작제 방법
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제11항에 있어서, 상기 생화학적 방법이 FuGene6를 사용하는 것을 특징으로 하는 소의 핵 이식란 작제 방법
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제6항에 있어서, 상기 체세포주가 소의 자궁관류액, 자궁내막, 난관, 귀 또는 근육으로부터 분리된 세포 또는 난구 세포로부터 유래된 것을 특징으로 하는 소의 핵 이식란 작제 방법
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제6항에 있어서, 상기 핵 이식란이 SNU-B1(KCTC 10286BP)인 것을 특징으로 하는 소의 핵 이식란 작제 방법
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(a) 소의 성숙한 개체로부터 유래한 체세포주에 사람 프로유로키나제를 발현하는 유전자를 도입 및 적중시키는 단계를 포함하는 공여핵 세포를 준비하는 단계; (b) 수핵 난자의 난구 세포를 제거하고, 수핵 난자의 제1극체를 포함한 세포질을 제거하여 난자를 탈핵하는 과정을 포함하는 소 유래의 수핵 난자를 준비하는 단계; (c) 상기 단계에서 준비된 공여핵 세포를 탈핵된 난자에 이식하고 융합시켜 핵 이식란을 작제하는 단계; 및 (d)상기 핵 이식란을 대리모에 이식하여 산자를 출산하는 단계를 포함하는 소의 유선에서 사람 프로유로키나제를 생산하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제15항에 있어서, 상기 (a) 내지 (c) 단계가 제8항 내지 제13항 중 어느 한 항의 방법으로 수행되는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제15항에 있어서, 상기 핵 이식란이 SNU-B1(KCTC 10286BP)인 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제15항에 있어서, 상기 (a) 단계가 체세포주를 계대배양, 혈청기아배양 또는 동결에 의해 보존하는 과정을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제15항에 있어서, 상기 (b)단계의 난자를 탈핵하는 과정은 미세작업장치를 이용하여 전처리된 난자의 투명대를 절개하여 절개창을 형성시킨 후, 절개창을 통하여 난자의 제 1극체를 포함한 세포질을 10 내지 15% 제거하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제15항에 있어서, 상기 (b) 단계의 수핵 난자의 난구 세포는 수핵 난자를 하이알루로니다제로 처리한 다음, 물리적으로 제거되는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제15항에 있어서, 상기 (c)단계의 공여핵 세포를 탈핵 난자에 이식하는 과정이 공여세포를 난자의 투명대에 형성된 절개창으로 주입하는 것임을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제15항에 있어서, 상기 (c) 단계에 작제된 핵 이식란을 대리모에 이식하기 전에 활성화시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제22항에 있어서, 상기 핵 이식란의 활성화가 전기 융합을 통해 이루지는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제23항에 있어서, 상기 전기융합이 직류전압을 0
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제22항에 있어서, 상기 활성화 단계에 사이클로헥시미드 용액 또는 디엠에이피(DMAP) 용액에 핵이식란을 침지하고 배양하는 후 활성화 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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제25항에 있어서, 상기 후 활성화 단계에 활성화된 핵이식란을 mSOF 배지에 배양하는 체외배양 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 형질전환 복제 소의 생산방법
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소의 유선에서 사람 프로유로키나제를 발현하는 형질전환 복제 소의 우유로부터 사람 프로유로키나제를 수득하는 것을 특징으로 하는 사람 프로유로키나제를 생산하는 방법
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제27항에 있어서, 상기 형질전환 복제 소는 상기 제15항의 형질전환 복제 소의 생산방법으로 생산된 것을 특징으로 하는 사람 프로유로키나제를 생산하는 방법
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제27항에 있어서, 상기 형질전환 복제 소가 소의 핵이식란 SNU-B1(KCTC 10286BP)로부터 생산된 것을 특징으로 하는 사람 프로유로키나제를 생산하는 방법
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제27항에 있어서, 상기 형질전환 복제 소가 소의 핵이식란 SNU-B1(KCTC 10286BP)로부터 생산된 것을 특징으로 하는 사람 프로유로키나제를 생산하는 방법
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