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인간 탯줄 유래 혈관내피 줄기/전구세포 및 이의 확립방법

  • 기술번호 : KST2015159504
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인간 탯줄로부터 유래한 혈관내피줄기세포 및 이의 확립방법에 관한 것이다. 더 구체적으로, 본 발명은 인간 탯줄로부터 고순도로 혈관내피 줄기/전구세포를 분리하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 분리된 혈관내피 줄기/전구세포를 배양하는 방법 및 혈관내피 줄기/전구세포의 동결 및 해동방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 인간 탯줄로부터 분리된 혈관내피 줄기/전구세포의 배양을 위한 배양 배지에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기의 방법으로 분리, 배양, 동결 및/또는 해동된 혈관내피 줄기/전구세포에 관한 것이다. 본 발명의 혈관내피줄기/전구세포의 분리 방법은 간편한 방법으로 고순도로 분리/정제할 수 있으며, 더 나아가 본 발명의 혈관내피줄기/전구세포는 고도의 LDL 흡수능력으로 대표되는 고 기능을 가지는 것을 특징으로 한다.탯줄, 혈관내피세포, 혈관내피전구세포, 혈관내피줄기세포, CD31, vWF
Int. CL C12N 5/0789 (2010.01) C12N 5/02 (2010.01)
CPC C12N 5/0692(2013.01) C12N 5/0692(2013.01) C12N 5/0692(2013.01) C12N 5/0692(2013.01) C12N 5/0692(2013.01)
출원번호/일자 1020060112609 (2006.11.15)
출원인 재단법인서울대학교산학협력재단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2008-0043936 (2008.05.20) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항 심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2006.11.15)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 재단법인서울대학교산학협력재단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 조재진 대한민국 서울 영등포구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김순웅 대한민국 서울시 구로구 디지털로**길 **, ***호 (구로동,에이스테크노타워*차)(정진국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2006.11.15 수리 (Accepted) 1-1-2006-0834431-58
2 서지사항보정서
Amendment to Bibliographic items		 2006.12.04 수리 (Accepted) 1-1-2006-0896500-42
3 보정요구서
Request for Amendment		 2006.12.04 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2006-0149451-75
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2007.06.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2007.07.12 수리 (Accepted) 9-1-2007-0040934-43
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2007.08.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0478560-69
7 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2007.10.29 수리 (Accepted) 1-1-2007-0774253-76
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2007.11.29 수리 (Accepted) 1-1-2007-0859859-49
9 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2007.12.31 수리 (Accepted) 1-1-2007-0949995-84
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2008.01.29 수리 (Accepted) 4-1-2008-5015497-73
11 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2008.01.31 수리 (Accepted) 1-1-2008-0080845-96
12 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2008.02.28 수리 (Accepted) 1-1-2008-0146361-25
13 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2008.02.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2008-0146376-10
14 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2008.06.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0344616-19
15 명세서 등 보정서(심사전치)
Amendment to Description, etc(Reexamination)		 2008.07.28 보정각하 (Rejection of amendment) 7-1-2008-0033240-88
16 명세서 등 보정서(심사전치)
Amendment to Description, etc(Reexamination)		 2008.08.27 보정각하 (Rejection of amendment) 7-1-2008-0038046-98
17 보정각하결정서
Decision of Rejection for Amendment		 2008.10.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0513321-65
18 보정각하결정서
Decision of Rejection for Amendment		 2008.10.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0513671-29
19 심사전치출원의 심사결과통지서
Notice of Result of Reexamination		 2008.10.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0513672-75
20 심사관의견요청서
Request for Opinion of Examiner		 2008.11.11 수리 (Accepted) 7-8-2008-0037890-35
21 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.08.22 수리 (Accepted) 4-1-2014-5100909-62
22 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.03.20 수리 (Accepted) 4-1-2015-5036045-28
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 탯줄의 혈관을 절개하여 혈관내피를 드러나도록 하는 단계; (b) 상기 혈관내피를 콜라게나제와 일정시간 배양한 후 스크레이퍼로 긁어내는 단계; 및(c) 상기 (b)단계에서 긁혀 나온 세포덩어리로부터 혈관내피 줄기/전구세포를 분리 및 정제하는 단계를 포함하는 인간 탯줄로부터 유래한 혈관내피 줄기/전구세포를 얻는 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 혈관내피와 콜라게나제의 배양은 35 내지 38℃ 범위에서 15 내지 25분 동안 배양기에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 혈관내피와 콜라게나제의 배양은 37℃에서 약 20분 동안 배양기에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 (c) 단계가 상기 긁혀 나온 세포덩어리를 물 중탕으로 일정시간 배양하고 원심분리한 후 배양배지에 현탁화하여 디쉬에 파종하는 것을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제4항에 있어서, 상기 물 중탕 배양의 온도가 35 내지 38℃ 범위에서 약 20 내지 40분간 진동을 가하면서 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제4항에 있어서, 상기 물 중탕 배양의 온도가 37℃에서 약 30분간 진동을 가하면서 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 (c) 단계가 상기 긁혀 나온 세포덩어리의 물 중탕 후 0
8 8
제1항에 있어서, 상기 (c) 단계가 상기 긁혀 나온 세포덩어리의 물 중탕 후 0
9 9
제4항에 있어서, 상기 물 중탕 배양 후 4 내지 6분 간격으로 inverting 하는 것을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따라 수득한 혈관내피 줄기/전구세포를 계대 배양함으로써 혈관내피 줄기/전구세포를 확립하는 방법
11 11
제10항에 있어서, 상기 계대 배양을 60 내지 80% 컨플루언시에 하는 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제10항에 있어서, 상기 계대 배양은 (a) 배지를 제거한 후에 RPMI 1640으로 세척하여 남아있는 FBS를 완전히 제거하는 단계; (b) 35 내지 38℃ 물 중탕에서 5 내지 15분 가량 데운 0
13 13
제12항에 있어서, 상기 (d)단계의 원심분리는 3 내지 5℃의 온도범위에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제12항에 있어서, 상기 (d)단계는 원심분리한 후 상층액을 제거한 세포 덩어리를 염색하여 세포 수 또는 세포 생존력을 모니터링하는 방법을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따라 얻어진 인간 혈관내피 줄기/전구 세포
16 16
제10항에 따라 얻어진 인간 혈관내피 줄기/전구세포주
17 17
제11항 내지 제14항에 중 어느 한 항에 따라 얻어진 인간 혈관내피 줄기/전구세포주
18 18
제15항에 있어서, 상기 세포가 CD31 및 vWF의 발현이 두드러진 것을 특징으로 하는 인간 혈관내피 줄기/전구세포
19 19
제16항에 있어서, 상기 세포주가 CD31 및 vWF의 발현이 두드러진 것을 특징으로 하는 인간 혈관내피 줄기/전구세포주
20 20
제17항에 있어서, 상기 세포주가 CD31 및 vWF의 발현이 두드러진 것을 특징으로 하는 인간 혈관내피 줄기/전구세포주
21 21
제15항에 있어서, 상기 세포가 LDL 흡수능력을 가지는 것을 특징으로 하는 인간 혈관내피 줄기/전구세포
22 22
제16항에 있어서, 상기 세포주가 LDL 흡수능력을 가지는 것을 특징으로 하는 인간 혈관내피 줄기/전구세포주
23 23
제17항에 있어서, 상기 세포주가 LDL 흡수능력을 가지는 것을 특징으로 하는 인간 혈관내피 줄기/전구세포주
24 24
(a) 1 내지 2 x 106 세포를 준비하고 동결 배지 현탁한 후에 동결 바이알 에 넣어서 상온에서 보관 중인 냉동 박스에 넣은 단계; 및 (b) 상기 냉동 박스에 넣은 후 -75 내지 -85℃에 20 내지 30 시간 동안 보관한후 액화질소 (LN2)탱크로 옮겨서 보관하는 단계; 를 포함하는, 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따라 수득한 혈관내피 줄기/전구세포를 동결함으로써 보존하는 방법
25 25
제24항에 있어서, 상기 동결 배지가 DMSO, FBS 및 RPMI1640을 5:10:35의 비율로 포함된 것을 특징으로 하는 방법
26 26
(a) 1 내지 2 x 106 세포를 준비하고 동결 배지 현탁한 후에 동결 바이알에 넣어서 상온에서 보관 중인 냉동 박스에 넣은 단계; 및 (b) 상기 냉동 박스에 넣은 후 -75 내지 -85℃에 20 내지 30 시간 동안 보관한 후 액화질소 (LN2)탱크로 옮겨서 보관하는 단계;를 포함하는, 제11항 내지 제14항에 중 어느 한 항에 따라 얻어진 인간 혈관내피 줄기/전구세포를 동결함으로써 보존하는 방법
27 27
제26항에 있어서, 상기 동결 배지가 DMSO, FBS 및 RPMI1640을 5:10:35의 비율로 포함된 것을 특징으로 하는 방법
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1 US2009124007 US 미국 DOCDBFAMILY
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