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표적 생체분자의 비형광 검출방법에 있어서,(a) 상기 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 포획분자를 포함하는 제1금속-나노패턴된 기판을 포함하는 나노 바이오칩을 분석시료와 반응시키는 단계;(b) 상기 (a) 단계에서 준비한 나노 바이오칩을, 광학적 간섭을 제거하기 위하여 제1금속-나노패턴의 흡수스펙트럼과 중첩되지 않는 흡수 스펙트럼을 갖는 제2금속을 포함하는 비형광 나노입자로 표지되고 상기 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 검출분자와 반응시키는 단계; 및(c) 상기 (b) 단계에 따른 나노 바이오칩으로부터 상기 제2금속을 포함하는 나노입자의 미분간섭대비(differential interference contrast; DIC) 신호를 선택적 대역통과필터(bandpass filter)를 통해 검출하는 단계를 포함하는 것인 검출방법
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표적 생체분자의 비형광 검출방법에 있어서,(a) 광학적 간섭을 제거하기 위하여 제1금속-나노패턴의 흡수스펙트럼과 중첩되지 않는 흡수 스펙트럼을 갖는 제2금속을 포함하는 비형광 나노입자로 표지되고 상기 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 검출분자와 분석시료를 반응시키는 단계;(b) 상기 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 포획분자를 포함하는 제1금속-나노패턴된 기판을 포함하는 나노 바이오칩을 상기 (a) 단계에서 준비한 분석시료와 반응시키는 단계; 및(c) 상기 (b) 단계에 따른 나노 바이오칩으로부터 상기 제2금속을 포함하는 나노입자의 미분간섭대비 신호를 선택적 대역통과필터를 통해 검출하는 단계를 포함하는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 미분간섭대비 신호의 검출은 파장-의존적 신호검출에 의해 수행되는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 표적 생체분자는 DNA, RNA, 항원, 항체, 리간드, 킬레이트, 수용체, 폴리머, 유기화합물, 금속이온 및 폴리펩티드로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 포획분자는 항원, 항체, 리간드, 수용체, 킬레이트, 앱타머, DNA 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 검출분자는 항원, 항체, 리간드, 수용체, 킬레이트, 앱타머, DNA 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 기판은 유리(glass), 용융 실리카(fused silica), 석영(quartz), 폴리디메틸실록산(polydimethylsiloxane; PDMS), 폴리메틸메타크릴레이트(poly(methyl methacrylate); PMMA)로 구성된 군으로부터 선택되는 투명한 고체인 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 기판은 10 nm 내지 1 mm의 두께를 갖는 빛의 투과가 가능한 유리 또는 고분자 재질인 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 나노패턴은 잉크젯 나노프린팅, 전자빔 식각(e-beam lithography) 및 원자힘현미경-디펜나노식각(atomic force microscope-dip pen nanolithography, AFM-DPN)을 포함하는 나노식각(nanolithography) 기술 중 어느 하나에 의해 제조되는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 나노패턴은 1 내지 500nm 범위의 직경을 갖고, 상기 나노패턴의 간격(pitch)은 10 nm 내지 10 μm의 범위를 갖는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 제1금속 또는 제2금속은 금(Au), 은(Ag), 백금(Pt) 및 팔라듐(Pd)으로 이루어진 군에서 선택된 것인 검출방법
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제12항에 있어서,상기 제1금속은 금이고, 제2금속은 은인 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,상기 나노입자는 10 nm 이상 100 nm 이하의 평균 직경을 갖는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 있어서,표적 생체분자의 정량분석을 위하여,기지 농도로 표준 생체분자를 포함하는 일련의 표준시료에 대해 DIC 신호를 검출하여 농도에 따른 DIC 신호의 검정곡선을 작성하는 단계; 및미지의 시료에 대해 측정된 DIC 신호를 상기 표준시료로부터 작성한 검정곡선에 대입하여 농도를 유추하는 단계를 추가로 포함하는 검출방법
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제15항에 있어서,상기 일련의 표준시료 및 미지시료의 DIC 측정에 사용되는 나노 바이오칩은 동일한 크기의 금속-나노패턴된 바이오칩을 사용하는 것이 특징인 검출방법
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제15항에 있어서,나노입자의 플라즈몬 공명산란 신호를 검출하는 단계를 추가로 포함하는 것인 검출방법
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제1항 또는 제2항에 따른 나노 바이오칩을 이용한 표적 생체분자 검출을 위한 미분간섭대비 신호 검출용 시스템으로서,수직으로 일정 간격 이격되어 차례로 배열된,광원; 편광기; 제1 울러스턴 프리즘(Wollaston prism); 집광기(condenser); 금속 패턴 상에 고정된, 표적 생체분자에 특이적으로 결합하는 포획분자를 포함하는 제1금속-나노패턴된 기판을 포함하는 나노 바이오칩; 대물렌즈; 제2 울러스턴 프리즘(Wollaston prism); 선택적 대역통과필터; 및 검출부를 포함하는, 시스템
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제18항에 있어서,상기 검출부는 광다이오드 배열(photodiode arrays, PDA), 전하주입장치 (charge-injection device, CID), 전하결합장치(charge-couple device, CCD) 및 디지털 단렌즈 반사식 사진기 (digital single lens reflex)로 구성된 군으로부터 선택되는 검출기를 포함하는 것인 시스템
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