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서열번호 2의 염기서열로 구성된 폴리뉴클레오타이드
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서열번호 2의 염기서열로 구성된 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 포유류 세포 발현 벡터
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서열번호 2의 염기서열로 구성된 폴리뉴클레오타이드가 형질도입된 형질전환체
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제3항에 있어서,
상기 형질전환체는 상기 폴리뉴클레오타이드가 BHK (Baby Hamster Kidney) 세포, CHO (Chinese Hamster Ovary) 세포, 마우스 배아 섬유아세포 (Mouse embryonic fibroblast cell line), 인간 배아 신장 세포 (Human Embryonic Kidney), 및 마우스 골수종 세포 (Myeloma Cell)로 이루어진 군에서 선택된 포유류 세포에 형질도입된 것인 형질전환체
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제4항에 있어서,
상기 포유류 세포는 디하이드로폴레이트 리덕테이즈(dehydrofolate reductase, DHFR)가 결핍된 것인 형질전환체
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제3항에 있어서,
기탁번호 KCLRF-BP-00188인 형질전환체
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1) 서열번호 2의 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 발현벡터를 제작하는 단계; 및
2) 상기 제작된 발현벡터를 포유류 세포에 형질도입시키는 단계
를 포함하고,
상기 포유류 세포는 BHK (Baby Hamster Kidney) 세포, CHO (Chinese Hamster Ovary) 세포, 마우스 배아 섬유아세포 (Mouse embryonic fibroblast cell line), 인간 배아 신장 (Human Embryonic Kidney) 세포, 및 마우스 골수종 세포 (Myeloma Cell)로 이루어진 군에서 선택된 것으로, 디하이드로폴레이트 리덕테이즈(DHFR)가 결핍된 것인,
형질전환체의 제조 방법
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제7항에 있어서,
상기 서열번호 2의 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 발현벡터는 dhfr 유전자를 포함하는 발현벡터와 100:0
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9
a) 서열번호 2의 폴리뉴클레오타이드가 형질도입된 형질전환체를 준비하는 단계;
b) 상기 형질전환체에 도파민 D1 수용체에 특이적인 리간드를 처리하고, 후보물질과 접촉시키는 단계; 및
c) 상기 후보물질과 접촉된 형질전환체에서의 도파민 D1 수용체의 활성을 측정하고, 후보물질을 처리하지 않은 형질전환체에서의 도파민 D1 수용체의 활성을 측정하여, 후보 물질과 접촉된 형질전환체에서의 도파민 D1 수용체의 활성과 후보 물질을 처리하지 않은 형질전환체에서의 도파민 D1 수용체의 활성과 비교하는 단계
를 포함하는 도파민 D1 수용체 작용 조절제의 스크리닝 방법
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제9항에 있어서,
상기 도파민 D2 수용체의 활성은 도파민 D2 수용체와 리간드와의 결합 정도, 생성되는 cAMP의 농도, 또는 도파민 D2 수용체를 통한 신호전달에서 생성되는 산물의 농도에 의하여 측정하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제10항에 있어서,
후보물질과 접촉된 형질전환체에서의 도파민 D2 수용체와 리간드와의 결합 정도가 후보물질을 처리하지 않은 형질전환체보다 증가하거나, 생성되는 cAMP의 농도가 후보물질을 처리하지 않은 형질전환체보다 감소하는 경우, 상기 후보물질을 도파민 D2 수용체의 작용 증진제로 판단하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제10항에 있어서,
후보물질과 접촉된 형질전환체에서의 도파민 D1 수용체와 리간드와의 결합 정도 또는 생성되는 cAMP의 농도가 후보물질을 처리하지 않은 형질전환체보다 감소된 경우 상기 후보물질을 도파민 D1 수용체의 작용 억제제로 판단하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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