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시료로부터 분리된 게놈 DNA를 주형 DNA로 하는 다중 PCR을 수행하여 목적 유전자를 증폭시키는 제 1 단계; 및상기 증폭된 목적 유전자에 대하여 단일 가닥 구조 다형성을 수행하여, 시료 내에 포함된 미생물의 종류 및 양을 분석하는 제 2 단계를 포함하는 미생물 검출 방법
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제 1 항에 있어서,다중 PCR은(1) 시료를 93 내지 97℃의 온도에서 3 내지 7분 동안 처리하여 주형 DNA를 단일 가닥 DNA로 변성시키는 단계;(2) 단일 가닥 DNA를 50 내지 56℃의 온도에서 0
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제 2 항에 있어서,(1) 내지 (3) 단계를 30 내지 40회 반복하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서,게놈 DNA로 비브리오 콜레라, 황색 포도상구균, 살모넬라 엔테라이티디스, 리스테리아 모노사이토제네스, 예르시니아 엔테로콜리티카, 대장균 O157:H7, 클로스트리디움 페르프링겐스, 트리코모나스 원충, 네이스세리아 고노리아, 헤모필루스 두크레이, 마이코플라스마 제니탈리움, 나이세리아 메닌기티디스, 보렐리아 버그도페리, 클렙시엘라 뉴모니아, 레지오넬라 뉴모필라, 칸디다 알비칸스, 탄저균, 스트렙토코쿠스 미티스, 슈도모나스 애루기노사, 엔테로코커스 패칼리스, 칸디다 트로피칼리스, 살로넬라 티피뮤리움, 스트렙토코커스 피오게네스, 스트렙토코커스 뉴모니아, 해모필러스 인플루엔자, 모락셀라 카타르할리스, 브란하멜라 카타르할리스, 프로테우스 미라빌리스, 리켓치아 쯔쯔가무시, 렙토스피라 인테로간스 및 콕시엘라 브루네티로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 미생물로부터 유래된 것을 사용하여 다중 PCR을 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 2 항에 있어서,시료 내에 포함되는 주형 DNA의 양이 1 pg 내지 10 ng이며,프라이머의 양이 10 내지 20 pmole인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서,목적 유전자가 16S rRNA, EF-2, IF-3 및 IF-2로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법
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제 6 항에 있어서,목적 유전자가 16S rRNA인 것을 특징으로 하는 방법
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제 2 항에 있어서,프라이머의 길이가 18 내지 28 bp이고, 프라이머의 염기 서열에 포함된 G 및 C의 함량이 45 내지 60%이며, 프라이머의 Tm이 57 내지 60℃인 것을 특징으로 하는 방법
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제 4 항에 있어서,다중 PCR은 서열 번호 1 내지 18 중 어느 하나의 염기서열로 표시되는 프라이머 중 하나 이상을 포워드 프라이머로 사용하고,서열 번호 19 내지 30 중 어느 하나의 염기서열로 표시되는 프라이머 중 하나 이상을 리버스 프라이머로 사용하여 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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제 9 항에 있어서,프라이머가 형광 물질 및 방사성 동위 원소로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상으로 표지되어 있는 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서,단일 가닥 구조 다형성이 모세관 전기 영동인 것을 특징으로 하는 방법
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시료로부터 분리된 게놈 DNA를 주형으로 하는 다중 PCR을 수행하여 목적 유전자를 증폭시키는 제 1 키트; 및상기 증폭된 목적 유전자에 대하여 단일 가닥 구조 다형성 전기영동을 수행하여, 시료 내에 포함된 미생물의 종류 및 양을 분석하는 제 2 키트를 포함하는 미생물 검출 장치
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