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pH에 따라 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되도록 공여형광단백질-수용형광단백질이 연결된 융합단백질이 발현된 숙주세포를 항균물질로 처리하는 단계;세포외 pH를 조절하는 단계; 및 세포내·외 융합단백질의 형광도 차를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
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제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 pH의 변화에 따라 수용형광단백질의 형광성이 저하되어 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
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제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 공여형광단백질이 증강된 시안형광성단백질(ECFP)인 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
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제3항에 있어서, 상기 증강된 시안형광성단백질(ECFP)는 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
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제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 수용형광단백질이 증강된 황색형광성단백질(EYFP)인 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
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6
제5항에 있어서, 상기 증강된 황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
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제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 숙주세포는 pH에 따라 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되는 융합단백질을 코딩하는 핵산을 제조하는 단계, (ii) 상기 핵산을 포함하는 재조합 발현벡터를 제조하는 단계 및 (iii) 상기 재조합 발현벡터로 숙주세포를 형질전환 또는 형질감염시키는 단계로 이루어진 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
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제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항생물질은 항생펩타이드인 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
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제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 세포외 pH가 세포내 pH보다 낮게 유지되는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
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10
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포외 pH가 6으로 유지되는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
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제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 세포외 pH가 조절된 후 10분 이내에 세포내·외 형광도차이를 측정하는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
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제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 항균물질로 처리 후 마이크로 플래이트에서 pH를 조절하는 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
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pH에 따라 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되는 증강된시안형광성단백질(ECFP)-황색형광성단백질(EYFP) 융합단백질에서 상기 증강된시안형광성단백질(ECFP)은 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열이며, 상기 증강된황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열인 융합단백질
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서열번호 4에 기재된 증강된 시안형광성단백질(ECFP) 아미노산 서열과 서열번호 8에 기재된 증강된 황색형광성단백질(EYFP) 아미노산 서열이 연결된 융합단백질을 코딩하는 핵산 서열
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제 16항에 있어서, 증강된시안형광성단백질(ECFP)는 서열번호 3에 기재된 염기서열로 구성된 것을 특징으로 하는 핵산 서열
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제 16항에 있어서, 증강된황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 7에 기재된 염기서열로 구성된 것을 특징으로 하는 핵산 서열
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제16항에 있어서, 상기 핵산서열은 서열번호 9에 기재된 DNA 서열인 것을 특징으로 하는 핵산 서열
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제 17항 내지 제 19중 어느 한 항에 따른 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현 벡터
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제 20항에 따른 재조합 발현벡터로 형질전환 또는 형질감염된 것을 특징으로 하는 숙주세포
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제 21항에 있어서, 기탁번호가 KCTC 10879BP인 것을 특징으로 하는 숙주세포
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공여형광단백질과 수용형광단백질이 연결된 융합단백질의 형광공명에너지전달(FRET) 효율을 pH를 조절하여 조절하는 방법
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제23항에 있어서, 상기 융합단백질은 증강된시안형광성단백질(ECFP)-증강된황색형광성단백질(EYFP) 융합단백질인 것을 특징으로 하는 방법
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제24항에 있어서, 상기 증강된시안형광성단백질(ECFP)는 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 방법
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제24항에 있어서, 상기 증강된황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 방법
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