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피에이치에 의한 에프알이티 효율조절을 통한항생펩타이드의 활성도 측정방법

  • 기술번호 : KST2015170007
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 항생펩타이드의 활성도 측정을 위한 새로운 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 pH에 따라 단백질들의 안정도가 차이가 있다는 점에 의거하여, pH에 따라 형광공명에너지전달(FRET:Fluoresence Resonance Energy Transfer) 효율이 변화하는 융합단백질을 발현된 세포를 항생펩타이드로 처리하고, 항생펩타이드의 항균성을 세포 내외의 pH 차에 의한 세포 내외의 융합단백질의 형광도 차이를 이용하여 측정하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 있어서, 세포 내·외의 pH 차는 살아 있는 세포의 경우 항상 pH 7정도의 일정한 pH를 유지하므로 외부의 pH를 조절함으로서 구분될 수 있게 된다. 본 발명에 있어서, 상기 pH에 따라 FRET 효율이 변화하는 융합단백질은 증강된시안형광성단백질(ECFP)와 낮은 pH에 대해서 현저하게 낮은 안정성을 가지고 있는 증강된황색형광성단백질(EYFP)가 결합된 ECFP-EYFP의 융합단백질이 이용되었으며, 상기 융합단백질은 대장균에서 발현되었다. 또한 본 발명에서는 분석에 microplate 형광측정 시스템을 사용하여 다량의 항생펩타이드의 초고속 분석이 가능하며, 이 방법은 pH에 따른 FRET 효율조절 방법은 세포내 활동을 측정할 수 있는 새로운 조절방식의 지표로도 널리 이용 될 수 있다.항생펩타이드, FRET (Fluoresence Resonance Energy Transfer), pH 안정성, 대장균
Int. CL G01N 33/84 (2006.01.01) G01N 21/64 (2006.01.01) G01N 33/68 (2006.01.01)
CPC G01N 33/84(2013.01) G01N 33/84(2013.01) G01N 33/84(2013.01) G01N 33/84(2013.01)
출원번호/일자 1020060023205 (2006.03.13)
출원인 학교법인 포항공과대학교, 포항공과대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-0742217-0000 (2007.07.18)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20070724) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2006.03.13)
심사청구항수 24

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 학교법인 포항공과대학교 대한민국 경상북도 포항시 남구
2 포항공과대학교 산학협력단 대한민국 경상북도 포항시 남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 차형준 대한민국 경북 포항시 남구
2 김영수 대한민국 서울 서대문구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 박상훈 대한민국 서울특별시 영등포구 선유로 *길 **, **층 ****호 (문래동*가, 문래 sk v*센터)(새생명특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 포항공과대학교 산학협력단 경상북도 포항시 남구
2 학교법인 포항공과대학교 경북 포항시 남구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2006.03.13 수리 (Accepted) 1-1-2006-0175793-35
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2006.12.27 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2007.01.15 수리 (Accepted) 9-1-2007-0005796-73
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2007.02.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0109862-98
5 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2007.04.26 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2007-0315182-34
6 의견서
Written Opinion
2007.04.26 수리 (Accepted) 1-1-2007-0315107-20
7 등록결정서
Decision to grant
2007.05.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0294901-75
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2007.12.28 수리 (Accepted) 4-1-2007-5195152-79
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.06.13 수리 (Accepted) 4-1-2013-0025573-58
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.02.25 수리 (Accepted) 4-1-2014-5024386-11
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.07.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5149263-30
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5243581-27
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245997-53
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5247115-68
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
pH에 따라 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되도록 공여형광단백질-수용형광단백질이 연결된 융합단백질이 발현된 숙주세포를 항균물질로 처리하는 단계;세포외 pH를 조절하는 단계; 및 세포내·외 융합단백질의 형광도 차를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 pH의 변화에 따라 수용형광단백질의 형광성이 저하되어 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 공여형광단백질이 증강된 시안형광성단백질(ECFP)인 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 증강된 시안형광성단백질(ECFP)는 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 융합단백질은 수용형광단백질이 증강된 황색형광성단백질(EYFP)인 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 증강된 황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
7 7
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 숙주세포는 pH에 따라 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되는 융합단백질을 코딩하는 핵산을 제조하는 단계, (ii) 상기 핵산을 포함하는 재조합 발현벡터를 제조하는 단계 및 (iii) 상기 재조합 발현벡터로 숙주세포를 형질전환 또는 형질감염시키는 단계로 이루어진 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
8 8
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항생물질은 항생펩타이드인 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
9 9
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 세포외 pH가 세포내 pH보다 낮게 유지되는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
10 10
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포외 pH가 6으로 유지되는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
11 11
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 세포외 pH가 조절된 후 10분 이내에 세포내·외 형광도차이를 측정하는 것을 특징으로 하는 항균성 측정방법
12 12
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 항균물질로 처리 후 마이크로 플래이트에서 pH를 조절하는 것을 특징으로 하는 항균성 측정 방법
13 13
pH에 따라 형광공명에너지전달(FRET) 효율이 조절되는 증강된시안형광성단백질(ECFP)-황색형광성단백질(EYFP) 융합단백질에서 상기 증강된시안형광성단백질(ECFP)은 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열이며, 상기 증강된황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열인 융합단백질
14 14
삭제
15 15
삭제
16 16
서열번호 4에 기재된 증강된 시안형광성단백질(ECFP) 아미노산 서열과 서열번호 8에 기재된 증강된 황색형광성단백질(EYFP) 아미노산 서열이 연결된 융합단백질을 코딩하는 핵산 서열
17 17
제 16항에 있어서, 증강된시안형광성단백질(ECFP)는 서열번호 3에 기재된 염기서열로 구성된 것을 특징으로 하는 핵산 서열
18 18
제 16항에 있어서, 증강된황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 7에 기재된 염기서열로 구성된 것을 특징으로 하는 핵산 서열
19 19
제16항에 있어서, 상기 핵산서열은 서열번호 9에 기재된 DNA 서열인 것을 특징으로 하는 핵산 서열
20 20
제 17항 내지 제 19중 어느 한 항에 따른 핵산 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 발현 벡터
21 21
제 20항에 따른 재조합 발현벡터로 형질전환 또는 형질감염된 것을 특징으로 하는 숙주세포
22 22
제 21항에 있어서, 기탁번호가 KCTC 10879BP인 것을 특징으로 하는 숙주세포
23 23
공여형광단백질과 수용형광단백질이 연결된 융합단백질의 형광공명에너지전달(FRET) 효율을 pH를 조절하여 조절하는 방법
24 24
제23항에 있어서, 상기 융합단백질은 증강된시안형광성단백질(ECFP)-증강된황색형광성단백질(EYFP) 융합단백질인 것을 특징으로 하는 방법
25 25
제24항에 있어서, 상기 증강된시안형광성단백질(ECFP)는 서열번호 4에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 방법
26 26
제24항에 있어서, 상기 증강된황색형광성단백질(EYFP)는 서열번호 8에 기재된 아미노산 서열인 것을 특징으로 하는 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.