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융합파트너를 이용한 재조합 단백질의 제조방법

  • 기술번호 : KST2015170333
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 자가결합성이 강한 펩타이드를 융합파트너로 포함하는 XG-L-Y형의 융합단백질을 이용하여 재조합 단백질 또는 펩타이드를 효과적으로 제조하는 방법에 관한 것이다.XG : 융합파트너 (사람 글루카곤 단백질 또는 그 유사체의 전체 또는 부분의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드)L : 링커 (코돈을 맞추기 위한 배열 또는 펩타이드 절단효소의 인식 배열)Y : 재조합 단백질 또는 펩타이드보다 상세하게는, 사람 글루카곤 단백질 또는 그 유사체의 전체 또는 부분의 아미노산 서열을 포함하는 폴리펩타이드를 융합파트너로 하는 융합단백질을 코딩하는 유전자, 유전자를 포함하는 벡터, 그 벡터로 형질전환된 미생물, 그리고 융합단백질의 제조방법에 관한 것으로서, 본 발명에 의하면 재조합 단백질의 세포내 생산수율과 응집체내의 순도를 극대화할 수 있을 뿐 아니라 분리된 응집체가 변성제 및 환원제 등을 사용하지 않고도 쉽게 수용성화될 수 있다.
Int. CL C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/57 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1019990007641 (1999.03.09)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-0368073-0000 (2003.01.02)
공개번호/일자 10-2000-0059787 (2000.10.05) 문서열기
공고번호/일자 (20030124) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (1999.03.09)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박영훈 대한민국 대전광역시유성구
2 이지원 대한민국 대전광역시유성구
3 김대영 대한민국 대전광역시유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 출원서
Patent Application		 1999.03.09 수리 (Accepted) 1-1-1999-0019081-76
2 전자문서첨부서류제출서
Submission of Attachment to Electronic Document		 1999.03.11 수리 (Accepted) 1-1-1999-5108508-74
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 1999.05.26 수리 (Accepted) 4-1-1999-0075472-64
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2000.02.03 수리 (Accepted) 4-1-2000-0014117-45
5 출원인명의변경신고서
Applicant change Notification		 2000.03.07 수리 (Accepted) 1-1-2000-5067626-95
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2001.01.17 수리 (Accepted) 4-1-2001-0006012-52
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2001.01.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2001-0015753-75
8 지정기간연장신청서
Request for Extension of Designated Period		 2001.03.21 수리 (Accepted) 1-1-2001-5082080-08
9 명세서 등 보정서
Amendment to Description, etc.		 2001.04.11 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2001-0081004-31
10 의견서
Written Opinion		 2001.04.11 수리 (Accepted) 1-1-2001-5102292-39
11 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2002.04.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2002-0121687-03
12 명세서 등 보정서
Amendment to Description, etc.		 2002.06.03 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2002-0174578-19
13 의견서
Written Opinion		 2002.06.03 수리 (Accepted) 1-1-2002-0174579-54
14 등록결정서
Decision to grant		 2002.12.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2002-0455239-51
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2005.05.09 수리 (Accepted) 4-1-2005-0016474-59
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2008.04.10 수리 (Accepted) 4-1-2008-5054980-73
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
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번호 청구항
1 1

형질전환 미생물을 배양하여 폴리펩타이드를 제조함에 있어서, 자가 결합성이 강한 펩타이드를 융합파트너로 포함하는 XG-L-Y 형의 융합단백질을 이용한 재조합 단백질 또는 펩타이드의 제조방법

2 2

삭제
3 3

제 1항에 있어서, 사람글루카곤 유사체 6Phe→6Lys, 10Tyr→10Lys, 13Tyr→13Lys으로 변형된 것을 특징으로 하는 재조합 단백질 또는 펩타이드의 제조방법

4 4

제 1항에 있어서, 사람 종양괴사인자 또는 그 뮤테인의 아미노산 서열이 융합파트너에 더 포함되는 것을 특징으로 하는, 재조합 단백질 또는 펩타이드의 제조방법

5 5

제 1항에 있어서, 링커는 엔테로키나제가 인식할 수 있는 Asp Asp Asp Asp Lys (DDDDK, D4K) 아미노산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는, 재조합 단백질 또는 펩타이드의 제조방법

6 6

제 1항에 있어서, 폴리히스티딘 서열이 융합파트너에 포함되는 것을 특징으로 하는, 재조합 단백질 또는 펩타이드의 제조방법

7 7

제 1항에 있어서, 재조합 단백질이 인터루킨-2 또는 그의 유사체인 것을 특징으로하는 재조합 단백질 또는 펩타이드의 제조방법

8 8

제 7항에 있어서, 융합파트너와 결합한 사람 인터루킨-2 또는 그 유사체를 생산하는 대장균 형질전환체를 배양하여 세포를 파쇄하고 단백질 침전체를 얻어 알칼리 용액으로 용해한 다음 pH를 다시 중성조건으로 복원함으로써 재조합 단백질을 재활성화하여 정제하는 것을 특징으로 하는 재조합 단백질 또는 펩타이드의 제조방법

9 9

제 8항에 있어서, 정제과정 중 분리된 융합단백질을 엔테로키나제로 절단하여 사람 인터루킨-2 또는 그 유사체를 정제하는 제조방법

10 10

제 1항이 융합파트너, 링커, 재조합 단백질 또는 펩타이드의 유전자를 pT7-7 벡터에 삽입하여 제조되는 것을 특징으로 하는 발현 벡터

11 11

제 10항에 있어서, 재조합 단백질은 인터루킨-2 또는 그 유사체인 것을 특징으로 하는 발현벡터

12 12

융합파트너가 사람 종양괴사인자의 아미노산 서열중 N-말단의 1번째에서 57번째의 아미노산으로 구성된 펩타이드 (T1 펩타이드)-[G-펩타이드]-[폴리히스티딘 서열(His6)]의 순으로 구성된 폴리펩타이드인 T1G이고 재조합 단백질이 IL-2인 발현벡터 pT1GIL-2 (미생물 수탁번호 KCTC 0555BP

13 13

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