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재조합 인슐린 유사성장인자-1의 대량 생산방법

  • 기술번호 : KST2015170375
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 재조합 인슐린 유사성장인자-1(rIGF-1)의 대량 생산방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 대장균으로부터 락토스(lactose)를 발현 유도물질(inducer)로 이용하여 IGF-1 융합단백질을 효과적으로 발현시킴으로써 생산비용을 절감하며, 또한 이를 히드록실아민(hydroxylamine)으로 절단하여 IGF-1만을 분리한 후 대량 재접힘 방법으로 제조단계를 최소화하여 활성화된 형태로 재접힘(refolding)하고 이를 고압 액체 크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 활성화된(native) IGF-1을 대량으로 순수 정제하는 방법에 관한 것이다.재조합 인슐린 유사성장인자-1(rIGF-1)
Int. CL C12P 21/02 (2006.01)
CPC C07K 14/65(2013.01) C07K 14/65(2013.01) C07K 14/65(2013.01) C07K 14/65(2013.01)
출원번호/일자 1020010014709 (2001.03.21)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2002-0074749 (2002.10.04) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2001.03.21)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이영익 대한민국 대전광역시서구
2 한유정 대한민국 대전광역시유성구
3 신영철 대한민국 서울특별시서초구
4 최선욱 대한민국 서울특별시서초구
5 최은주 대한민국 대전광역시유성구
6 신현수 대한민국 서울특별시서초구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 허상훈 대한민국 서울특별시 강남구 강남대로 ***, 우리종합금융빌딩 **층 한라국제특허법률사무소 (역삼동)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2001.03.21 수리 (Accepted) 1-1-2001-0063426-73
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2003.02.17 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2003.03.18 수리 (Accepted) 9-1-2003-0008397-35
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2003.06.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2003-0247567-88
5 지정기간연장신청서
Request for Extension of Designated Period
2003.08.29 수리 (Accepted) 1-1-2003-0323265-19
6 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2003.11.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2003-0464975-82
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2005.05.09 수리 (Accepted) 4-1-2005-0016474-59
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2008.04.10 수리 (Accepted) 4-1-2008-5054980-73
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
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번호 청구항
1 1

가) 대장균을 대량으로 배양하여 베타-갈락토시다아제(β-galactosidase)와 인슐린 유사성장인자-1(IGF-1)의 융합단백질을 대량 생산하는 단계;

나) 융합단백질에 히드록실아민(hydroxylamine)으로 처리하여 IGF-1을 분리하는 단계;

다) 비활성화된 형태의 IGF-1을 대량으로 재접힘하여 활성화된 형태로 전환하는 단계;

라) 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 통하여 활성화된 순수한 IGF-1을 정제하여 생산하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 재조합 IGF-1의 대량 생산방법

2 2

제 1 항에 있어서, 상기 가)단계에서 대장균으로부터 융합단백질을 유도하기 위하여 락토스(lactose)를 발현 유도물질로 사용하는 것을 특징으로 하는 재조합 IGF-1의 대량 생산방법

3 3

제 2 항에 있어서, 배지 내의 글루코스(glucose)양이 완전히 소모되는 순간 일시적으로 10 ∼ 30 g/L의 락토스를 첨가하는 특징으로 하는 재조합 IGF-1의 대량 생산방법

4 4

제 1 항에 있어서, 융합단백질을 히드록시아민으로 처리하는 반응 후에 10% 아세트산으로 반응을 중지시킨 다음, 이에 4배의 물을 첨가하는 단순 희석방법을 통하여 대량으로 재접힘하는 것을 특징으로 하는 재조합 IGF-1의 대량 생산방법

5 5

제 4 항에 있어서, 상기 재접힘 시 10 ∼ 40%의 에탄올을 사용하는 것을 특징으로 하는 재조합 IGF-1의 대량 생산방법

6 6

제 4 항에 있어서, 반응온도가 20 ∼ 40 ℃ 이고 반응액 중 환원형 IGF-1의 농도가 0

7 7

제 4 항에 있어서, 반응 pH를 6

8 8

제 1 항에 있어서, 상기 재접힘한 IGF-1을 원심 분리한 후 바로 C8 역상 크로마토그라피 칼럼을 이용하여 HPLC에서 0

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