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텔로미어 전사 비활성화에 관여하는 화합물의 동정을 위한균주의 제조

  • 기술번호 : KST2015170656
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주 및 상기 균주의 제조방법, 상기 균주를 시험 화합물이 함유된 배지에서 배양하여 마커 유전자의 발현을 탐색함으로써 유기화합물군(chemical library) 중 텔로미어 전사 비활성화에 관여하는 화합물을 스크리닝하는 방법 및 상기 균주를 함유하는 용기를 포함하는 텔로미어 전사 비활성화 관여 화합물을 스크리닝하기 위한 키트를 제공한다. 또한, 본 발명은 텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주의 염색체에 추가로 텔로미어 전사 비활성화의 교란을 통해 마커 유전자를 발현시키는 돌연변이 유전자가 도입된 효모 균주 및 상기 균주의 제조방법, 상기 균주를 시험 화합물이 함유된 배지에서 배양하여 마커 유전자의 발현을 탐색함으로써 유기화합물군 중 텔로미어 전사 비활성화에 관여하는 화합물을 스크리닝하는 방법 및 상기 균주를 함유하는 용기를 포함하는 텔로미어 전사 비활성화 관여 화합물을 스크리닝하기 위한 키트를 제공한다. 본 발명에 따른 형질전환 효모균주 및 이를 이용한 스크리닝 방법은 전사 비활성화에 관여하는 물질, 특히 노화와 암 관련 물질을 발굴할 수 있는 쉽고 빠르며 효율적인 HTS 시스템(High Throughput Screening system)을 제공한다.
Int. CL C12N 1/19 (2006.01)
CPC C12N 15/815(2013.01) C12N 15/815(2013.01) C12N 15/815(2013.01) C12N 15/815(2013.01) C12N 15/815(2013.01)
출원번호/일자 1020060075024 (2006.08.09)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-0783287-0000 (2007.11.30)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20071206) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2006.08.09)
심사청구항수 39

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 원미선 대한민국 대전 서구
2 정경숙 대한민국 대전 유성구
3 안지원 대한민국 충남 논산시
4 최신정 대한민국 대전 유성구
5 이현지 대한민국 대전 중구
6 유향숙 대한민국 대전 서구
7 홍영수 대한민국 대전 유성구
8 송경빈 대한민국 대전 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 안소영 대한민국 서울특별시 강남구 논현로 ***, *층 (역삼동, 운기빌딩)(안소영국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2006.08.09 수리 (Accepted) 1-1-2006-0568650-22
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2007.04.09 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2007.05.11 수리 (Accepted) 9-1-2007-0029838-54
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2007.05.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0299542-48
5 서지사항보정서
Amendment to Bibliographic items		 2007.06.07 수리 (Accepted) 1-1-2007-0413716-92
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2007.07.18 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2007-0518012-42
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2007.07.18 수리 (Accepted) 1-1-2007-0518013-98
8 등록결정서
Decision to grant		 2007.11.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0645419-13
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2008.04.10 수리 (Accepted) 4-1-2008-5054980-73
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주로서, 상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 균주
2 2
삭제
3 3
삭제
4 4
제1항에 있어서, 상기 영양요구 마커 유전자가 Ura4 유전자인 균주
5 5
삭제
6 6
삭제
7 7
삭제
8 8
제1항에 있어서, 상기 영양요구 마커 유전자가 서열번호 13의 염기서열을 갖는 Ura4 유전자인 균주
9 9
제8항에 있어서, 마커 유전자가 도입되는 텔로미어 부위가 서열번호 11의 염기서열을 갖는 텔로미어의 비-코딩 영역인 균주
10 10
제8항에 있어서, 마커 유전자가 도입되는 텔로미어 부위가 서열번호 12의 염기서열을 갖는 텔로미어의 비-코딩 영역인 균주
11 11
제10항에 있어서, 상기 균주는 KSTU202(h-/tel2B::Ura4)인 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(수탁번호; KCTC10971BP)인 균주
12 12
1) 마커 유전자가 도입되는 텔로미어 부위의 양쪽 염색체 부분에 해당하는 N 말단 절편과 C 말단 절편을 증폭시키고, 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하기 위한 마커 유전자를 증폭시키는 단계;2) 단계 1에서 증폭시킨 N 말단 절편, 마커 유전자 및 C 말단 절편이 순서대로 연결된 DNA 절편을 제조하는 단계;3) 단계 2에서 제조한 DNA 절편을 효모 균주에 형질도입하는 단계; 및4) 단계 3을 통해 형질전환된 효모균주를 선별하는 단계를 포함하는 텔로미어 형질전환 효모 균주를 제조하는 방법으로서,상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 방법
13 13
텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주를 제공하고,상기 균주를 시험 화합물이 함유된 완전 배지(complete medium) 및 선발 배지(selection medium)에서 배양하고, 선발 배지에서 배양된 균주의 마커 유전자의 발현 여부를 탐색하여 완전 배지에서 배양된 균주와 비교하는 것을 포함하는 유기화합물군(chemical library) 중 텔로미어 전사 비활성화에 관여하는 화합물을 스크리닝하는 방법으로서, 상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 방법
14 14
제13항에 있어서, 상기 텔로미어 전사 비활성화에 관여하는 화합물이 마커 유전자의 전사 비활성화를 교란시키는 발암 물질 또는 노화 촉진 물질인 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제13항 또는 제14항에 있어서, 마커 유전자는 Ura4 유전자이고, 선발 배지는 C-Ura 배지인 것을 특징으로 하는 방법
16 16
제15항에 있어서, 선발 배지로서 C+FOA 배지를 추가로 사용하는 것을 특징으로 하는 방법
17 17
제16항에 있어서, 형질전환 효모균주가 C-Ura 배지에서 생존하고 C+FOA 배지에서 사멸하는 경우 시험화합물을 발암 물질 또는 노화 촉진 물질로 판단하는 것을 특징으로 하는 방법
18 18
텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주, 완전 배지 및 선발 배지를 함유하는 용기 및 텔로미어 전사 비활성화 관여 화합물 스크리닝 방법에 대한 설명서를 포함하는 키트로서,상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 키트
19 19
제18항에 있어서, 상기 용기가 멀티-웰 플레이트(multi-well plate)인 키트
20 20
제19항에 있어서, 상기 멀티-웰 플레이트가 둥근 바닥 멀티-웰 플레이트(round-bottom multi-well plate)인 키트
21 21
제18항에 있어서, 상기 용기가 마이크로타이터 플레이트(microtitre plate)인 키트
22 22
제18항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 마커 유전자는 Ura4 유전자이고, 선발 배지는 C-Ura 배지인 것을 특징으로 하는 키트
23 23
제22항에 있어서, 선발 배지로서 C+FOA 배지를 추가로 포함하는 키트
24 24
제23항에 있어서, 형질전환 효모균주로서 KSTU202(h-/tel2B::Ura4)인 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베 균주(수탁번호; KCTC10971BP)를 포함하는 키트
25 25
텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주의 염색체에 추가로 텔로미어 전사 비활성화의 교란을 통해 마커 유전자를 발현시키는 돌연변이 유전자가 도입된 효모 균주로서,상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 돌연변이 유전자는 clr4 유전자이며, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 균주
26 26
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28 28
제25항에 있어서, 상기 영양요구 마커 유전자가 Ura4 유전자인 균주
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30 30
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31 31
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32 32
제25항에 있어서, 상기 영양요구 마커 유전자가 서열번호 13의 염기서열을 갖는 Ura4 유전자인 균주
33 33
제32항에 있어서, 마커 유전자가 도입되는 텔로미어 부위가 서열번호 11의 염기서열을 갖는 텔로미어의 비-코딩 영역인 균주
34 34
제32항에 있어서, 마커 유전자가 도입되는 텔로미어 부위가 서열번호 12의 염기서열을 갖는 텔로미어의 비-코딩 영역인 균주
35 35
삭제
36 36
제32항에 있어서, 상기 돌연변이 clr4 유전자가 서열번호 14의 서열을 갖는 것인 균주
37 37
제36항에 있어서, 상기 균주는 KSTU204(h-/tel2B::Ura4, clr4-W38G)인 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(수탁번호: KCTC10972BP)인 균주
38 38
1) 마커 유전자가 도입되는 텔로미어 부위의 양쪽 염색체 부분에 해당하는 N 말단 절편과 C 말단 절편을 증폭시키고, 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하기 위한 마커 유전자를 증폭시키는 단계;2) 단계 1에서 증폭시킨 N 말단 절편, 마커 유전자 및 C 말단 절편이 순서대로 연결된 DNA 절편을 제조하는 단계;3) 단계 2에서 제조한 DNA 절편을 효모 균주에 형질도입하는 단계; 4) 단계 3을 통해 형질전환된 효모균주를 선별하는 단계;5) 단계 4에서 제조된 형질전환 균주에 텔로미어 전사 비활성화의 교란을 통해 텔로미어 중에 도입된 마커 유전자를 발현시키는 돌연변이 유전자를 도입하는 단계; 및6) 단계 5)를 통해 돌연변이 유전자가 도입된 형질전환 균주를 선별하는 단계를 포함하는 텔로미어 형질전환 효모 균주를 제조하는 방법으로서,상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 돌연변이 유전자는 clr4 유전자이며, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 방법
39 39
텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화(transcriptional silencing)를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주의 염색체에 추가로 텔로미어 전사 비활성화의 교란을 통해 마커 유전자를 발현시키는 돌연변이 유전자가 도입된 효모 균주를 제공하고,상기 균주를 시험 화합물이 함유된 완전 배지(complete medium) 및 선발 배지(selection medium)에서 배양하고, 선발 배지에서 배양된 균주의 마커 유전자의 발현 여부를 탐색하여 완전 배지에서 배양된 균주와 비교하는 것을 포함하는 유기화합물군(chemical library) 중 텔로미어 전사 비활성화에 관여하는 화합물을 스크리닝하는 방법으로서,상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 돌연변이 유전자는 clr4 유전자이며, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 방법
40 40
제39항에 있어서, 상기 텔로미어 전사 비활성화에 관여하는 화합물이 마커 유전자의 전사 비활성화 교란을 정상화시키는 항암제 또는 항노화제인 것을 특징으로 하는 방법
41 41
제39항 또는 제40항에 있어서, 마커 유전자는 Ura4 유전자이고, 선발 배지는 C-Ura 배지인 것을 특징으로 하는 방법
42 42
제41항에 있어서, 선발 배지로서 C+FOA 배지를 추가로 사용하는 것을 특징으로 하는 방법
43 43
제42항에 있어서, 형질전환 효모균주가 C-Ura 배지에서 사멸하고 C+FOA 배지에서 생존하는 경우 시험화합물을 항암제 또는 항노화제로 판단하는 것을 특징으로 하는 방법
44 44
텔로미어 부위에 텔로미어 전사 비활성화를 표지하는 마커 유전자가 도입된 텔로미어 형질전환 효모 균주의 염색체에 추가로 텔로미어 전사 비활성화의 교란을 통해 마커 유전자를 발현시키는 돌연변이 유전자가 도입된 효모 균주, 완전 배지 및 선발 배지를 함유하는 용기 및 텔로미어 전사 비활성화 관여 화합물의 스크리닝 방법에 대한 설명서를 포함하는 키트로서,상기 마커 유전자는 Ura4, Leu2, His3 및 Trp1 유전자로 구성되는 군으로부터 선택되는 영양요구 마커(auxotrophic marker) 또는 NAT(Nourseothricin acethy transferase), 제네티신(Geneticin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로부터 선택되는 항생제에 저항성을 나타내는 항생 마커(dominant drug resistance marker) 유전자이고, 상기 돌연변이 유전자는 clr4 유전자이며, 상기 텔로미어 형질전환 효모 균주는 텔로미어 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 키트
45 45
제44항에 있어서, 상기 용기가 멀티-웰 플레이트(multi-well plate)인 키트
46 46
제45항에 있어서, 상기 멀티-웰 플레이트가 둥근 바닥 멀티-웰 플레이트(round-bottom multi-well plate)인 키트
47 47
제44항에 있어서, 상기 용기가 마이크로타이터 플레이트(microtitre plate)인 키트
48 48
제44항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 마커 유전자는 Ura4 유전자이고, 선발 배지는 C-Ura 배지인 것을 특징으로 하는 키트
49 49
제48항에 있어서, 선발 배지로서 C+FOA 배지를 추가로 포함하는 키트
50 50
제49항에 있어서, 형질전환 효모균주로서 KSTU204(h-/tel2B::Ura4, clr4-W38G)인 형질전환 스키조사카로마이세스 폼베 균주(수탁번호: KCTC10972BP)를 포함하는 키트
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.