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교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 프로모터, 마커 유전자 및 교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 터미네이터를 포함하는 DNA 절편이 염색체 상에 삽입된 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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제1항에 있어서, 상기 효모 균주가 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe), 사카로마이세스 세레비시에(Saccharomyces cerevisiae) 및 캔디다 알비칸(Candida Albicans)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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제2항에 있어서, 상기 효모 균주가 스키조사카로마이세스 폼베(Schizosaccharomyces pombe)인 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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제3항에 있어서, 서열번호 19의 염기서열을 갖는 mfm1 유전자 또는 서열번호 20의 염기서열을 갖는 map2 유전자를 교배형 특이적으로 발현되는 유전자로 갖는 것을 특징으로 하는 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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제3항에 있어서, 서열번호 22로 기재되는 mfm1 프로모터 또는 서열번호 23으로 기재되는 map2 프로모터를 교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 프로모터로 갖는 것을 특징으로 하는 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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제3항에 있어서, 서열번호 24로 기재되는 mfm1 터미네이터 또는 서열번호 25로 기재되는 map2 터미네이터를 교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 터미네이터로 갖는 것을 특징으로 하는 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 노르세오트리신(Nourseothricin), 제네티신(Geneticin 또는 G418), 지오신(Zoecin) 및 하이그로마이신 B(Hygromycin B)로 구성된 군으로부터 선택되는 항생제에 대한 내성물질을 코딩하는 항생제 내성 유전자를 마커 유전자로 갖는 것을 특징으로 하는 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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제7항에 있어서, 항생제 내성 유전자는 서열번호 21의 염기서열을 갖는 NAT(Nourseothricin acetyl transferase) 유전자인 것을 특징으로 하는 반수체 제조용 형질전환 효모 균주
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서열번호 22의 염기서열을 갖는 mfm1 유전자의 프로모터, 서열번호 21의 염기서열을 갖는 NAT(Nourseothricin acetyl transferase) 유전자 및 서열번호 24로 기재되는 mfm1 유전자의 터미네이터를 포함하는 DNA 절편이 염색체에 삽입된 형질전환 분열 효모 h- 교배형 mfm1-NAT+(수탁번호: KCTC 10603BP)
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서열번호 23의 염기서열을 갖는 map2 유전자의 프로모터, 서열번호 21의 염기서열을 갖는 NAT(Nourseothricin acetyl transferase) 유전자 및 서열번호 25의 염기서열을 갖는 map2 유전자의 터미네이터를 포함하는 DNA 절편이 염색체에 삽입된 형질전환 분열효모 h+교배형 map2-NAT+(수탁번호: KCTC 10604BP)
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1) 교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 프로모터, 제1마커 유전자 및 교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 터미네이터를 클로닝하는 단계;2) 단계 1에서 클로닝한 프로모터, 제1마커 유전자 및 터미네이터가 순서대로 연결된 DNA 절편을 제조하는 단계;3) 단계 2에서 제조한 DNA 절편을 효모 균주에 형질도입하는 단계; 및4) 단계 3을 거친 효모 균주를 제1마커 유전자에 대한 선발 배지에서 배양하여 형질전환된 효모 균주를 선별하는 단계를 포함하는 반수체 제조용 형질전환 효모 균주의 제조방법
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교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 프로모터, 제1마커 유전자 및 교배형 특이적으로 발현되는 유전자의 터미네이터를 포함하는 DNA 절편이 염색체 상에 삽입된 반수체 제조용 형질전환 효모 균주를 그와 대립되는 교배형을 가지며, 제2마커 유전자를 갖는 반수체 또는 이배체 효모 균주와 교배시키고;교배를 통해 생성된 균주를 사멸세포 염색제를 포함하고 제1마커 유전자 및 제2마커 유전자의 발현 여부를 확인할 수 있는 선발 배지에서 배양하고;배양에 의해 형성된 콜로니 중 특정 교배형의 반수체 효모 균주를 선별하는 것을 포함하는 반수체 형질전환 효모 균주의 제조방법
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