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하기 식으로 표현되는 시스테인(cystein) 변성된 단백질 G 변형체에서 시스테인 변성 Fc 결합도메인은 21Val, 29Ala, 47Asp으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 아미노산을 시스테인으로 치환한 것인 단백질 G 변형체
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하기 식으로 표현되는 시스테인(cystein) 변성된 단백질 G 변형체에 있어서, 티올(thiol)기에 선택적으로 반응하는 UV 크로스 링커 복합체를 추가적으로 결합시킨 단백질 G 변형체
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제3항에 있어서, UV 크로스 링커 복합체는 UV 크로스 링커, 사이드 링커 및 반응기로 구성된 것을 특징으로 하는 단백질 G 변형체
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제4항에 있어서, UV 크로스 링커는 벤조페논(benzophenone), 아릴 아자이드(aryl azide) 또는 그들의 변성체(derivatives)인 단백질 G 변형체
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제4항 또는 5항에 있어서, 반응기는 말레이미드 또는 할로아세틸(haloacetyl)인 단백질 G 변형체
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제4항 또는 제5항에 있어서, 상기 반응기와 UV 크로스 링커를 연결하는 사이드 링커는 카본 체인(carbon chain) 또는 에틸렌 글라이콜(ethylene glycol)인 단백질 G 변형체
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하기 식으로 표현되는 시스테인(cystein) 변성된 단백질 G 변형체의 시스테인 티올기중 어느 하나 이상의 티올기가 UV 크로스 링커 복합체에 의해 변성된 단백질 G 변형체
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제1항 또는 제3항에 있어서, T 태그는 바이오틴, 헥사 히스티딘(hexa histidine) 펩타이드, 헤마글루티닌(HA), Flag, 금 결합 펩타이드(gold binding peptide), GFP(Green Fluorescent Protein) EGFP(enhanced GFP), BFP(Blue Fluorescent Protein) EBFP(Enhanced BFP), EBFP2, BFP 유도체, Azurite, mKalama1, ECFP(Enhanced Cyanide Fluorescent Protein), Cerulean, CyPet, YFP(Yellow Fluorescent Protein), Citrine, Venus, YPet, 알칼라인 포스파테이즈(Alkaline phosphatase) 및 페록시데이즈(peroxidase)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 태그를 갖는 단백질 G 변형체
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제1항 또는 제3항에 있어서, Q 태그는 바이오틴, 헥사 히스티딘(hexa histidine) 펩타이드, 헤마글루티닌(HA), Flag, 금 결합 펩타이드(gold binding peptide), GFP(Green Fluorescent Protein) EGFP(enhanced GFP), BFP(Blue Fluorescent Protein) EBFP(Enhanced BFP), EBFP2, BFP 유도체, Azurite, mKalama1, ECFP(Enhanced Cyanide Fluorescent Protein), Cerulean, CyPet, YFP(Yellow Fluorescent Protein), Citrine, Venus, YPet, 알칼라인 포스파테이즈(Alkaline phosphatase) 및 페록시데이즈(peroxidase)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 태그를 갖는 단백질 G 변형체
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21Val, 29Ala, 47Asp으로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 아미노산이 시스테인으로 치환된 시스테인 변성 Fc 결합도메인을 제작하는 단계를 포함하는 제1항의 시스테인 변성된 단백질 G 변형체를 제조하는 방법
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a) 하기 식으로 표현되는 시스테인 변성된 단백질 G 변형체를 제작하는 단계;
Tx - Ly - (시스테인이 도입된 단백질 G-Fc 결합도메인)n - Qz
(T 및 Q는 펩타이드 태그 단백질, L은 링커이고, x, y 또는 z는 각각 0 또는 1이며, n은 1 내지 3이다)
b) 상기 G 변형체의 티올기에 선택적으로 반응하는 UV 크로스 링커 복합체를 제작하는 단계; 및
c) 상기 G 변형체의 티올기에 UV 크로스 링커 복합체를 반응시켜 제3항의 단백질 G 변형체를 제작하는 단계;
d) 상기 단백질 G 변형체의 UV 크로스 링커 복합체에 항체를 처리하는 단계; 및
e) UV를 조사하여 UV 크로스 링커 복합체와 항체를 결합시키는 단계를 포함하는, 제3항의 단백질 G 변형체와 항체를 UV 크로스 링킹 하는 방법
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제13항의 방법에 의해 제조된, 단백질 G 변형체와 항체의 결합물
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제14항의 단백질 G 변형체와 항체의 결합물에 항원을 처리하는 단계; 및 상기 항체에 특이적으로 결합하는 항원을 검출하는 단계를 포함하는, 항원을 스크리닝 또는 분석하는 방법
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제1항 또는 제3항의 단백질 G 변형체를 고체지지물질의 표면에 결합시킴으로써 제조된 바이오칩 또는 바이오센서
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제16항에 있어서, 상기 고체지지물질은 세라믹, 유리, 고분자, 실리콘 및 금속으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 고체지지물질로 이루어진 바이오칩 또는 바이오센서
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제16항에 있어서, 상기 바이오칩 또는 바이오센서는 금 박막 또는 금 나노입자인 바이오칩 또는 바이오센서
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제16항에 있어서, 고체지지물질의 표면에 결합된 단백질 G 변형체에 항체가 추가적으로 결합된 바이오칩 또는 바이오센서
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a) 하기 식으로 표현되는 시스테인 변성된 단백질 G 변형체를 제작하는 단계;
Tx - Ly - (시스테인이 도입된 단백질 G-Fc 결합도메인)n - Qz
(T 및 Q는 펩타이드 태그 단백질, L은 링커이고, x, y 또는 z는 각각 0 또는 1이며, n은 1 내지 3이다)
b) 상기 G 변형체의 티올기에 선택적으로 반응하는 UV 크로스 링커 복합체를 제작하는 단계; 및
c) 상기 G 변형체의 티올기에 UV 크로스 링커 복합체를 반응시키는 단계를 포함하는, 제3항의 시스테인 변성된 단백질 G 변형체를 제작하는 방법
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제11항 또는 제20항의 방법으로 단백질 G 변형체를 제작하는 단계; 및 상기 단백질 G 변형체를 고체지지물질의 표면에 결합시키는 단계를 포함하는 바이오칩 또는 바이오센서의 제조방법
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제19항의 바이오칩 또는 바이오센서에 항원을 포함하는 시료를 접촉시키는 단계; 상기 바이오칩 또는 바이오센서의 항체에 항원이 특이적으로 결합하는 단계; 및 상기 항체-항원의 특이적 결합을 검출하는 단계를 포함하는, 제19항의 바이오칩 또는 바이오센서를 이용하여 항원을 분석하는 방법
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