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1
1) 3-(Triethoxysilyl)propyl isocyanate를 처리하여 슬라이드 글라스 위에 이소시아네이트 표면을 형성하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 슬라이드 글라스에 2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스(에틸아민)을 처리하여 N-Boc-2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스에틸아민 표면을 형성하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 슬라이드 글라스에 삼불화초산(trifluoroacetic acid)과 메틸렌클로라이드(methylene chloride) 혼합액(1:1)을 처리하여 보호기(Boc)을 제거하여 아민이 노출되게 하는 단계;
4) 상기 단계 3)의 슬라이드 글라스에 숙신산 무수물(succinic anhydride)을 처리하는 단계; 및
5) 상기 단계 4)의 슬라이드 글라스에 EDC(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride)/NHS(N-hydroxysuccinimide)를 처리하여 하이드라진(hydrazine)을 처리하는 단계
를 포함하는 고효율 당쇄 고정용 칩의 제조방법
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2
1) 3-(Triethoxysilyl)propyl isocyanate를 처리하여 슬라이드 글라스 위에 이소시아네이트 표면을 형성하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 슬라이드 글라스에 2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스(에틸아민)을 처리하여 N-Boc-2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스에틸아민 표면을 형성하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 슬라이드 글라스에 삼불화초산(trifluoroacetic acid)과 메틸렌클로라이드(methylene chloride) 혼합액(1:1)을 처리하여 보호기(Boc)을 제거하여 아민이 노출되게 하는 단계;
4) 상기 단계 3)의 슬라이드 글라스 위에 DSC(disuccinimidyl carbonate)를처리하여 NHS(N-hydroxysuccinimide)가 노출되게 하는 단계;
5) 상기 단계 4)의 슬라이드 글라스 위에 N-Boc-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스에틸아민을 처리하는 단계;
6) 상기 단계 5)의 슬라이드 글라스 위에 삼불화초산(trifluoroacetic acid)과 메틸렌클로라이드(methylene chloride) 혼합액(1:1)을 처리하여 보호기(Boc)을 제거하여 아민이 노출되게 하는 단계;
7) 상기 단계 6)의 슬라이드 글라스에 숙신산 무수물(succinic anhydride)을 처리하는 단계; 및
8) 상기 단계 7)의 슬라이드 글라스에 EDC(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride)/NHS(N-hydroxysuccinimide)를 처리하여 하이드라진(hydrazine)을 처리하는 단계
를 포함하는 고효율 당쇄 고정용 칩의 제조방법
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3
1) 3-(Triethoxysilyl)propyl isocyanate를 처리하여 슬라이드 글라스 위에 이소시아네이트 표면을 형성하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 슬라이드 글라스에 2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스(에틸아민)을 처리하여 N-Boc-2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스에틸아민 표면을 형성하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 슬라이드 글라스에 삼불화초산(trifluoroacetic acid)과 메틸렌클로라이드(methylene chloride) 혼합액(1:1)을 처리하여 보호기(Boc)을 제거하여 아민이 노출되게 하는 단계;
4) 상기 단계 3)의 슬라이드 글라스에 숙신산 무수물(succinic anhydride)을 처리하는 단계; 및
5) 상기 단계 4)의 슬라이드 글라스에 EDC(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride)/NHS(N-hydroxysuccinimide)를 처리하여 하이드라진(hydrazine)을 처리하는 단계; 및
6) 상기 단계 5)의 슬라이드 글라스 위에 탄수화물을 집적하는 단계
를 포함하는 고효율로 당쇄가 고정된 칩의 제조방법
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| 4 |
4
1) 3-(Triethoxysilyl)propyl isocyanate를 처리하여 슬라이드 글라스 위에 이소시아네이트 표면을 형성하는 단계;
2) 상기 단계 1)의 슬라이드 글라스에 2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스(에틸아민)을 처리하여 N-Boc-2,2'-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스에틸아민 표면을 형성하는 단계;
3) 상기 단계 2)의 슬라이드 글라스에 삼불화초산(trifluoroacetic acid)과 메틸렌클로라이드(methylene chloride) 혼합액(1:1)을 처리하여 보호기(Boc)을 제거하여 아민이 노출되게 하는 단계;
4) 상기 단계 3)의 슬라이드 글라스 위에 DSC(disuccinimidyl carbonate)를처리하여 N-hydroxysuccinimide(NHS)가 노출되게 하는 단계;
5) 상기 단계 4)의 슬라이드 글라스 위에 N-Boc-(에틸렌-1,2-다이옥시)비스에틸아민을 처리하는 단계;
6) 상기 단계 5)의 슬라이드 글라스 위에 삼불화초산(trifluoroacetic acid)과 메틸렌클로라이드(methylene chloride) 혼합액(1:1)을 처리하여 보호기(Boc)을 제거하여 아민이 노출되게 하는 단계;
7) 상기 단계 6)의 슬라이드 글라스에 무수물(succinic anhydride)을 처리하는 단계;
8) 상기 단계 7)의 슬라이드 글라스에 EDC(1-ethyl-3-[3-dimethylaminopropyl]carbodiimide hydrochloride)/NHS(N-hydroxysuccinimide)를 처리하여 하이드라진(hydrazine)을 처리하는 단계; 및
9) 상기 단계 8)의 슬라이드 글라스 위에 탄수화물을 집적하는 단계
를 포함하는 고효율로 당쇄가 고정된 칩의 제조방법
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5
제 3항 또는 제 4항에 있어서, 슬라이드 글라스 위에 집적되는 탄수화물은 렉틴, 콘카나발린 A(Concanavalin A), 밀배아 응집소(Wheat Germ Agglutinin), 락토-N-푸코펜토오즈-I(Lacto-N-fucopentaose I), 락토-N-푸코펜토오즈-II(Lacto-N-fucopentaose II), 3-Sulfated Lewis X, Lewis A, 3-Sialyl Lewis A, 혈액군 A 삼당류(Blood group A trisaccharide), 3-Sialyl Lewis X, NA2- Glycan, 혈액군 H 삼당류, 혈액군 B 삼당류로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 제조 방법
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6
제 3항 또는 제 4항에 있어서, 슬라이드 글라스 위에 집적되는 탄수화물의 농도는 375 μM 내지 6 mM인 것을 특징으로 하는 고효율 당쇄가 고정된 칩의 제조방법
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7
제 3항의 제조방법에 의해 제조된 고효율 당쇄가 고정된 칩
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8
제 4항의 제조방법에 의해 제조된 고효율 당쇄가 고정된 칩
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1) 제 7항 또는 제 8항의 고효율 당쇄가 고정된 칩을 시료와 반응시키는 단계; 및
2) 상기 단계 1)의 고효율 당쇄가 고정된 칩을 분석하는 단계
를 포함하는 렉틴 검출 및 정량 분석 방법
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