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인간 인터루킨-6;
말토오스 결합 단백질, 디설파이드 결합 A 단백질 및 디설파이드 결합 C 단백질로 이루어진 융합파트너; 및
펩타이드 링커를 포함하는 인간 인터루킨-6 융합단백질
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제1항에 있어서,
융합파트너 및 펩타이드 링커는 인간 인터루킨-6의 N-말단에 연결되는 것을 특징으로 하는 인간 인터루킨-6 융합단백질
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제1항에 있어서, 펩타이드 링커는
DDDDK(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys), IEGR(Ile-Glu-Gly-Arg) 및 LVPRG(S)(Leu-Val-Pro-Arg-Gly-Ser)으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 프로테아제 인식 서열; 및
상기 인식 서열의 N-말단에 연결되는, 리신, 히스티딘, 아르기닌, 아스파르트산 및 글루탐산으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 이온성 아미노산의 6 내지 30 개의 반복 서열로 이루어진 펩타이드, 또는 펩타이드 Lac21을 포함하는 것을 특징으로 하는 인간 인터루킨-6 융합단백질
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인간 인터루킨-6의 코딩 서열; 및
이의 N-말단에 연결되는, 말토오스 결합 단백질, 디설파이드 결합 A 단백질 및 디설파이드 결합 C 단백질의 코딩 서열로 이루어진 융합파트너; 및 펩타이드 링커의 코딩 서열을 포함하는 재조합 벡터를 제작하는 단계;
상기 재조합 벡터를 대장균에서 도입하여 인간 인터루킨-6 융합단백질을 발현시키는 단계;
상기 융합단백질을 분리하고, 프로테아제를 이용하여 융합파트너를 제거하는 단계; 및
역상 크로마토그래피법을 통해 활성형 인간 인터루킨-6 재조합 단백질을 정제하는 단계를 포함하는,
대장균에서 활성형 인간 인터루킨-6의 생산방법
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