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인공 서열 링커를 포함하는 유전자 합성법을 이용한 결손 카세트의 제조방법

  • 기술번호 : KST2015170847
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인공서열 링커를 포함하는 유전자합성법을 이용한 결손 카세트의 제조방법에 관한 것으로서 유전자 적중 모델 제조 시 필요한 방법이다. 보다 상세하게는 (a) 결손 카세트를 제조하기 위하여 인공 서열 링커를 양 말단에 포함하는 유전자 단편의 올리고머를 설계하는 단계; (b) 상기 올리고머를 인산화 한 후, LCR(ligase chain reaction)을 이용하여 단편을 접합하는 단계; (c) 상기 접합된 LCR 산물을 주형으로 인공 서열 링커(artificial sequence linker)에 존재하는 프라이머쌍을 이용하여 증폭 PCR을 수행하는 단계; 및 (d) 상기 PCR 증폭된 결손 카세트 양 말단에 존재하는 인공 서열 링커를 제거하는 단계를 포함하는 결손 카세트(deletion cassette)의 제조 방법 및 상기 방법으로 제조된 결손 카세트에 관한 것이다. 상기 방법을 이용하면 체계적인 유전자합성이 가능하므로, 유전자합성 제조 효율을 획기적으로 증대시킬 수 있다. 인공 서열 링커, 유전자합성법, 유전자 적중, 결손 카세트
Int. CL C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01)
CPC C12N 15/1031(2013.01) C12N 15/1031(2013.01) C12N 15/1031(2013.01) C12N 15/1031(2013.01)
출원번호/일자 1020080099873 (2008.10.10)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1067899-0000 (2011.09.20)
공개번호/일자 10-2010-0040634 (2010.04.20) 문서열기
공고번호/일자 (20110927) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.10.10)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 허광래 대한민국 대전광역시 유성구
2 김동욱 대한민국 대전광역시 유성구
3 김동섭 대한민국 대전광역시 유성구
4 박한오 대한민국 대전광역시 유성구
5 남미영 대한민국 대전광역시 중구
6 한상조 대한민국 대전광역시 유성구
7 이혜미 대한민국 대전광역시 유성구
8 이민호 대한민국 대전광역시 유성구
9 노은주 대한민국 대전광역시 서구
10 이아름 대한민국 충청남도 천안시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2008.10.10 수리 (Accepted) 1-1-2008-0709197-38
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2010.12.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0569843-80
3 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2011.02.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0100740-53
4 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2011.02.11 수리 (Accepted) 1-1-2011-0100739-17
5 등록결정서
Decision to grant		 2011.06.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0339949-72
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 결손 카세트를 제조하기 위하여 인공 서열 링커를 양 말단에 포함하는 유전자 단편의 올리고머를 설계하는 단계; (b) 상기 올리고머를 인산화 한 후, LCR(ligase chain reaction)을 이용하여 단편을 접합하는 단계; (c) 상기 접합된 LCR 산물을 주형으로 인공 서열 링커(artificial sequence linker)에 존재하는 프라이머쌍을 이용하여 증폭 PCR을 수행하는 단계; 및 (d) 상기 PCR 증폭된 결손 카세트 양 말단에 존재하는 인공 서열 링커를 제거하는 단계를 포함하는 결손 카세트(deletion cassette)의 제조 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 (c) 단계는 96웰(well), 384웰 및 1536웰로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 웰 시스템에 의해 PCR을 수행하는 단계인 결손 카세트의 제조방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 (d) 단계의 인공서열 링커를 제거하는 단계는 제한효소 처리 또는 네스티드 PCR(nested PCR)을 수행함으로써 제거하는 결손 카세트의 제조방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 인공 서열 링커는 PCR 프라이머(primer) 결합 부위 및 제한 효소 절단 부위를 포함하는 것을 특징으로 하는 결손 카세트의 제조방법
5 5
제4항에 있어서, 상기 프라이머 결합 부위는 결합 부위의 Tm 값이 균일한 것을 특징으로하는 결손 카세트의 제조방법
6 6
제4항에 있어서, 각 프라이머 결합 부위의 염기서열은 17 내지 25 mer임을 특징으로 하는 결손 카세트의 제조방법
7 7
제4항에 있어서, 상기 제한 효소 절단 부위는 타입 Ⅱ 제한 효소에 의해 절단되는 서열을 포함하는 결손 카세트의 제조방법
8 8
제4항에 있어서, 제한 효소 절단 부위는 제한 효소 BsaⅠ에 의해 절단 되는 것을 특징으로 하는 결손 카세트의 제조방법
9 9
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