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혼합기질겔을 이용한 2 이상의 서로 다른 기질분해효소의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2015170868
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 기질분해효소의 스크리닝 및 활성검출방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 효소를 포함하는 시료를 겔 전기영동한 다음, 혼합기질겔로 전기이동시켜 혼합기질겔을 분석함으로써 서로 다른 2종 이상의 기질분해효소를 동시에 스크리닝하고 활성을 검출해내는 것을 특징으로 하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 기질분해효소의 스크리닝 및 효소활성 검출방법은 기존의 방법과 달리 하나의 겔에 시료를 로딩함으로써 동시에 리파아제, 아밀라아제, 셀룰라아제 및 프로테아제 등과 같은 서로 다른 2 종 이상의 기질분해효소의 스크리닝이 가능하게 하는 장점이 있다. 또한, 미생물이나 환경 소스로부터 미지의 효소를 직접 스크리닝하는 것을 가속화시키는 장점이 있으므로 유용하다. 자이모그래피(zymography), 전기이동(electro-transfer), 기질분해효소, 단백질분해효소, 혼합기질
Int. CL G01N 33/559 (2006.01) G01N 33/573 (2006.01)
CPC G01N 33/573(2013.01) G01N 33/573(2013.01) G01N 33/573(2013.01) G01N 33/573(2013.01)
출원번호/일자 1020090018007 (2009.03.03)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2010-0099484 (2010.09.13) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.03.03)
심사청구항수 12

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 송재준 대한민국 대전광역시 서구
2 최종현 대한민국 대전시 유성구
3 최낙식 대한민국 대전광역시 서구
4 한윤전 대한민국 전라북도 정읍시
5 이혜원 대한민국 경기도 성남시 수정구
6 이승구 대한민국 대전광역시 유성구
7 김중수 대한민국 대전광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.03.03 수리 (Accepted) 1-1-2009-0130466-36
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2010.05.06 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2010.06.14 수리 (Accepted) 9-1-2010-0034917-74
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2011.03.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0176518-84
5 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2011.06.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0362817-94
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
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번호 청구항
1 1
다음 단계를 포함하는, 혼합기질 겔(mixed-substrate gel)을 이용한 기질분해효소의 스크리닝 방법: (a) 겔에 시료를 주입한 다음, 겔 전기영동을 수행하는 단계; (b) 상기 전기영동을 수행한 겔을 2개의 서로 다른 기질을 포함하는 혼합기질 겔에 적층한 다음, 전압을 가하여 상기 전기영동을 수행한 겔로부터 혼합기질 겔로 시료를 이동시키는 단계; 및 (c) 상기 혼합기질 겔을 분석하여 기질분해효소를 스크리닝하는 단계
2 2
제1항에 있어서, 상기 (a) 단계의 겔은 변성 겔 (denaturing gel) 또는 비변성 겔 (nondenaturing gel)임을 특징으로 하는 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 혼합기질은 프로티아제, 아밀라제 또는 셀룰라아제 중 어느 하나에 의해 분해될 수 있는 기질과 리파아제에 의해 분해될 수 있는 기질인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 혼합기질은 피브린(Fibrin), 스타치(starch) 또는 Azo-CMC (Azo-carboxymethyl Cellulose) 중 어느 하나와 글리세롤 트리부티레이트(glycerol tributyrate)인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 (c)단계는 (ⅰ)상기 혼합기질 겔을 인큐베이션하여 밴드의 생성여부를 분석하는 단계; 및 (ⅱ) 상기 인큐베이션을 수행한 혼합기질 겔을 염색하여 밴드의 생성여부를 분석하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제1항에 있어서, 상기 (c) 단계에서 스크리닝되는 가수분해효소는 리파아제, 아밀라아제, 셀룰라아제 및 프로티아제 중 어느 하나이상임을 특징으로 하는 방법
7 7
다음 단계를 포함하는, 혼합기질 겔 (mixed-substrate gel)을 이용한 기질분해효소의 활성 검출(detection) 방법: (a) 겔에 시료를 주입한 다음, 겔 전기영동을 수행하는 단계; (b) 상기 전기영동을 수행한 겔을 2개의 서로 다른 기질을 포함하는 혼합기질 겔에 적층한 다음, 전압을 가하여 상기 전기영동을 수행한 겔로부터 혼합기질 겔로 시료를 이동시키는 단계; 및 (c) 상기 혼합기질 겔을 분석하여 기질분해효소의 활성을 검출하는 단계
8 8
제7항에 있어서, 상기 (a) 단계의 겔은 변성 겔 또는 비변성 겔임을 특징으로 하는 방법
9 9
제7항에 있어서, 상기 (b) 단계의 혼합기질은 프로티아제, 아밀라아제 또는 셀룰라아제 중 어느 하나에 의해 분해될 수 있는 기질과 리파아제에 의해 분해될 수 있는 기질인 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제9항에 있어서, 상기 혼합기질은 피브린(fibrin), 스타치(starch) 또는 Azo-CMC (Azo-carboxymethyl Cellulose) 중 어느 하나와 글리세롤 트리부티레이트 (Glycerol tributyrate)인 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제7항에 있어서, 상기 (c)단계는 (ⅰ)상기 혼합기질 겔을 인큐베이션하여 밴드의 생성여부를 분석하는 단계; 및 (ⅱ) 상기 인큐베이션을 수행한 혼합기질 겔을 염색하여 밴드의 생성여부를 분석하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제7항에 있어서, 상기 (c) 단계에서 검출되는 가수분해효소는 프로티아제, 아밀라아제, 셀룰라아제 및 리파아제 중 어느 하나이상임을 특징으로 하는 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.