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다층기질겔을 이용한 기질분해효소의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2015170873
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 2 이상의 서로 다른 기질분해효소의 스크리닝 및 활성검출방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 효소를 포함하는 시료를 겔 전기영동을 수행한 다음, 서로 다른 기질을 가지는 다층기질겔로 전기이동시켜 다층기질겔을 분석함으로써 2 이상의 기질분해효소를 동시에 스크리닝하고 활성을 검출해내는 것을 특징으로 하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 기질분해효소의 스크리닝 및 효소활성 검출방법은 기존의 방법과 달리 하나의 겔에 시료를 로딩함으로써 동시에 2 이상의 기질분해효소의 스크리닝이 가능하게 하는 장점이 있다. 또한, 미생물이나 환경 소스로부터 미지의 효소를 직접 스크리닝하는 것을 가속화시키는 장점이 있으므로 유용하다. 자이모그래피(zymography), 전기이동(electro-transfer), 기질분해효소, 셀룰라아제, 프로티아제, 리파아제
Int. CL G01N 33/561 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020090000919 (2009.01.06)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1062828-0000 (2011.08.31)
공개번호/일자 10-2010-0081615 (2010.07.15) 문서열기
공고번호/일자 (20110907) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.01.06)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 송재준 대한민국 대전광역시 서구
2 최종현 대한민국 대전시 유성구
3 김보혜 대한민국 부산광역시 연제구
4 최낙식 대한민국 대전광역시 서구
5 한윤전 대한민국 전라북도 정읍시
6 이혜원 대한민국 경기도 성남시 수정구
7 이승구 대한민국 대전광역시 유성구
8 김중수 대한민국 대전광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국(산업통상자원부장관) 세종특별자치시 한누리대
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.01.06 수리 (Accepted) 1-1-2009-0006531-86
2 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2009.01.07 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2009-0008642-92
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2010.04.09 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2010.05.19 수리 (Accepted) 9-1-2010-0031420-70
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2010.12.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0569619-69
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2011.02.10 수리 (Accepted) 1-1-2011-0095981-20
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2011.03.10 수리 (Accepted) 1-1-2011-0175695-21
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2011.03.10 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0175696-77
9 등록결정서
Decision to grant
2011.08.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0484735-76
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음 단계를 포함하는, 다층 기질겔(Multiple-layer substrate gel)을 이용한 기질분해효소의 스크리닝 방법: (a) 겔에 시료를 주입하여 겔 전기영동을 수행하는 단계; (b) 상기 전기영동이 수행된 겔로부터, 각각 서로 다른 기질을 포함하는 겔이 2 이상의 층으로 구성되는 다층 기질겔로 시료가 이동하도록 전압을 가하는 단계; 및 (c) 상기 다층 기질겔을 분석하여 기질분해효소를 스크리닝하는 단계, 이때, 상기 다층 기질겔 중 밴드가 나타난 겔에 포함된 기질을 분해할 수 있는 기질분해효소가 스크리닝되는 것임을 특징으로 함
2 2
제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 기질은 스크리닝하고자 하는 기질분해효소에 의하여 분해될 수 있는 기질인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제2항에 있어서, 상기 기질은 글리세롤 트리부티레이트 (Glycerol tributyrate), Azo-CMC (Azo-carboxymethyl Cellulose) 및 피브린(Fibrin) 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 (b) 단계의 다층 기질겔은 기질겔 사이에 기질 미포함 겔을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
삭제
6 6
제1항에 있어서, 상기 (c) 단계에서 스크리닝되는 가수분해효소는 리파아제, 셀룰라아제 및 프로티아제 중 어느 하나임을 특징으로 하는 방법
7 7
다음 단계를 포함하는, 다층 기질겔(Multiple-layer substrate gel)을 이용한 기질분해효소의 활성 검출(detection) 방법: (a) 겔에 시료를 주입하여 겔 전기영동을 수행하는 단계; (b) 상기 전기영동이 수행된 겔로부터, 각각 서로 다른 기질을 포함하는 겔이 2 이상의 층으로 구성되는 다층 기질겔로 시료가 이동하도록 전압을 가하는 단계; 및 (c) 상기 다층 기질겔을 분석하여 기질분해효소의 활성을 검출하는 단계, 이때, 상기 다층 기질겔 중 밴드가 나타난 겔에 포함된 기질을 분해할 수 있는 기질분해효소가 활성 효소임을 특징으로 함
8 8
제7항에 있어서, 상기 (b) 단계의 기질은 검출하고자 하는 기질분해효소에 의하여 분해될 수 있는 기질인 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제8항에 있어서, 상기 기질은 글리세롤 트리부티레이트 (Glycerol tributyrate), Azo-CMC (Azo-carboxymethyl Cellulose) 및 피브린(Fibrin) 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제7항에 있어서, 상기 (b) 단계의 다층 기질겔은 기질겔 사이에 기질 미포함 겔을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
11 11
삭제
12 12
제7항에 있어서, 상기 (c) 단계에서 검출되는 가수분해효소는 리파아제, 셀룰라아제 및 프로티아제 중 어느 하나임을 특징으로 하는 방법
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1 WO2010079919 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
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