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기지의 서열에 인접한 미지의 DNA 서열을 클로닝하는 방법

  • 기술번호 : KST2015170906
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 염기서열을 알고 있는 부위로부터 게놈(genome) 상의 인접한 미지의 영역을 PCR 방법으로 클로닝하는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 1) 기지(旣知, known)의 뉴클레오티드 서열 및 이에 인접한 미지의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 게놈 DNA 를 제한효소로 절단하는 단계; 2) 상기 절단된 DNA의 3''-OH 말단을 뉴클레오티드 유사체로 수식하는 단계; 3) 상기 절단된 DNA 단편의 말단 서열에 그 말단 서열과 상보적인 말단을 가지는 링커(linker), 아답타(adapter) 또는 카세트(cassette)를 연결하는 단계; 및 4) 기지의 뉴클레오티드 서열에 특이적인 프라이머 및 카세트 서열에 특이적인 프라이머를 처리하여 미지의 뉴클레오티드 서열을 증폭하는 단계를 포함하는, 기지의 뉴클레오티드 서열에 인접한 미지의 뉴클레오티드 서열을 클로닝하는 방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 미지의 뉴클레오티드 서열을 클로닝하는 방법을 위한 유전자 증폭용 조성물, 및 상기 조성물을 포함하는 유전자 증폭용 키트에 관한 것이다.유전자 클로닝, 게놈 워킹, 뉴클레오티드 유사체
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12Q 1/6855(2013.01) C12Q 1/6855(2013.01) C12Q 1/6855(2013.01) C12Q 1/6855(2013.01) C12Q 1/6855(2013.01)
출원번호/일자 1020090061895 (2009.07.07)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1190726-0000 (2012.10.08)
공개번호/일자 10-2011-0004209 (2011.01.13) 문서열기
공고번호/일자 (20121012) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.07.07)
심사청구항수 5

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 손정훈 대한민국 충청북도 청원군
2 배정훈 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.07.07 수리 (Accepted) 1-1-2009-0414487-78
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2011.01.25 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.02.18 수리 (Accepted) 9-1-2011-0011248-99
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2011.06.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0316702-29
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2011.08.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0614887-11
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2011.08.09 수리 (Accepted) 1-1-2011-0614886-76
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2012.01.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0057602-43
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2012.03.29 수리 (Accepted) 1-1-2012-0254321-93
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2012.03.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2012-0254322-38
10 등록결정서
Decision to grant
2012.09.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0571385-42
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
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번호 청구항
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1) 하나의 염색체 위에 놓인 기지(旣知, known)의 뉴클레오티드 서열 및 이로부터 PCR로 증폭 가능한 거리인 40 kb 거리 내에 있는 미지의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 게놈 DNA에서 기지 서열부터 미지 서열까지는 유지되고 그 보다 바깥 부분을 제한효소로 절단하는 단계; 2) 상기 절단된 DNA의 3''-OH 말단과 뉴클레오티드 유사체인 ddNTP를 연결하는 단계; 3) 상기 절단된 DNA 단편에 ddNTP가 연결된 후의 말단 서열에 그 말단 서열과 상보적인 말단이 부가된 링커(linker), 아답타(adapter) 또는 DNA 단편의 말단 서열에 상보적인 서열을 포함하는, 5'' 말단에 인산기가 없어서 이중가닥 중 단일가닥만 DNA 단편의 말단에 연결되는 이중가닥의 올리고뉴클레오티드로 구성된 카세트(cassette)를 연결하는 단계; 및 4) 기지의 뉴클레오티드 서열에 특이적인 프라이머 및 카세트 서열에 특이적인 프라이머를 처리하여 미지의 뉴클레오티드 서열을 증폭하는 단계를 포함하는, 기지의 뉴클레오티드 서열로부터 PCR로 증폭 가능한 거리인 40 kb 거리 내에 있는 미지의 뉴클레오티드 서열을 클로닝하는 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 ddNTP는 ddATP, ddTTP, ddGTP, ddCTP, ddUTP 및 ddITP 로 이루어진 군에서 선택되는 ddNTP 인 방법
3 3
1) 하나의 염색체 위에 놓인 기지(旣知, known)의 뉴클레오티드 서열 및 이로부터 PCR로 증폭 가능한 거리인 40 kb 거리 내에 있는 미지의 뉴클레오티드 서열을 포함하며 3''-OH 말단이 뉴클레오티드 유사체인 ddNTP와 연결된 DNA 단편, 및 상기 연결된 DNA 단편의 말단 서열과 상보적인 말단이 부가된 링커(linker), 아답타(adpter) 또는 DNA 단편의 말단 서열에 상보적인 서열을 포함하는, 5'' 말단에 인산기가 없어서 이중가닥 중 단일가닥만 DNA 단편의 말단에 연결되는 이중가닥의 올리고뉴클레오티드로 구성된 카세트(cassette)를 포함하는 DNA 구조체, 2) 기지의 뉴클레오티드 서열에 특이적인 프라이머, 및 3) 상기 카세트 서열에 특이적인 프라이머를 포함하는, 유전자 증폭용 조성물
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제3항에 있어서, 상기 ddNTP는 ddATP, ddTTP, ddGTP, ddCTP, ddUTP 및 ddITP 로 이루어진 군에서 선택되는 ddNTP 인 조성물
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제3항의 조성물을 포함하는 유전자 증폭용 키트
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US09260749 US 미국 FAMILY
2 US20120171727 US 미국 FAMILY
3 WO2011004994 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
4 WO2011004994 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US2012171727 US 미국 DOCDBFAMILY
2 US9260749 US 미국 DOCDBFAMILY
3 WO2011004994 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
4 WO2011004994 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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