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다음의 단계를 포함하는 목적단백질의 비-융합 포자 표면 전시 방법의 전시 효율을 증가시키는 방법:
(a) (i) 표면 전시하고자 하는 목적단백질을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열 및 (ii) 상기 코딩 뉴클레오타이드 서열에 작동적(operatively)으로 결합된 프로모터를 포함하는 벡터를 구축(construction)하는 단계로서, 상기 프로모터는 전시 효율을 증가시키기 위하여 강 프로모터(strong promoter)이고;
(b) 상기 벡터로 포자-형성 미생물을 형질전환시키는 단계;
(c) 상기 형질전환된 포자-형성 미생물을 배양하여 상기 목적단백질을 발현시키고 목적단백질을 상기 미생물의 세포 내에서 포자 표면에 전시하는 단계로서, 상기 목적단백질은 포자표면 전시 모체와 융합되어 있지 않으며 상기 목적단백질과 포자 표면 사이의 비공유 상호작용에 의해 상기 목적단백질이 포자 표면에 전시되며; 및
(d) 상기 포자-형성 미생물로부터 상기 목적단백질이 표면 전시된 포자를 수득하는 단계
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제 1 항에 있어서, 상기 포자-형성 미생물은 포자형성 그람음성 박테리아, 포자형성 그람양성 박테리아, 포자형성 방선균, 포자형성 효모 또는 포자형성 곰팡이인 것을 특징으로 하는 방법
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제 2 항에 있어서, 상기 포자-형성 미생물은 바실러스 속 박테리아인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 목적 단백질은 효소, 효소저해제, 호르몬, 호르몬 유사체, 호르몬 수용체, 신호전달 단백질, 항체, 단일클론 항체, 항원, 부착 단백질, 구조 단백질, 조절 단백질, 독소 단백질, 사이토카인, 전사조절 인자, 혈액 응고 인자, 식물 생체방어 유도 단백질 및 그의 일부분으로 구성된 그룹으로 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 강 프로모터는 살충 크리스탈 단백질(insecticidal crystal protein)의 프로모터, lac 프로모터, ara 프로모터, tet 프로모터, trp 프로모터, λPL 프로모터, λPR 프로모터, T7 프로모터, tac 프로모터, PT5 프로모터, trc 프로모터, lacUV5 프로모터, lpp 프로모터, rac5 프로모터, amp 프로모터, recA 프로모터, SP6 프로모터 또는 바실러스 포자형성 프로모터인 것을 특징으로 하는 방법
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제 5 항에 있어서, 상기 살충 크리스탈 단백질의 프로모터는 cry1 그룹부터 cry59 그룹까지를 포함하는 cry 유전자 그룹과 cyt1Aa 그룹부터 cyt2Ca 그룹까지를 포함하는 cyt 유전자 그룹의 프로모터로 구성된 군으로부터 선택되는 살충 크리스탈 단백질의 프로모터인 것을 특징으로 하는 방법
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제 6 항에 있어서, 상기 살충 크리스탈 단백질의 프로모터는 cry3Aa, cry3Ba, cry3Bb 또는 cry3Ca의 프로모터인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (c)의 배양은 포자형성 후기(late sporulation stage)까지 배양하는 것을 특징으로 하는 방법
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