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Sox3 프로모터 및 Nestin 프로모터 활성을 측정하는 제제를 포함하는, 배아줄기세포로부터 신경계 세포로의 분화 여부를 탐지하기 위한 프로모터 활성 검출용 조성물
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제1항에 있어서, 상기 배아줄기세포는 인간 유래인 조성물
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제1항에 있어서, 상기 프로모터 활성을 측정하는 제제는 Sox3 프로모터 및 상기 Sox3 프로모터와 작동 가능하게 연결된 리포터 유전자, 및 Nestin 프로모터 및 상기 Nestin 프로모터와 작동 가능하게 연결된 리포터 유전자를 포함하는 벡터인 조성물
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제3항에 있어서, 상기 Sox3 프로모터 및 상기 Sox3 프로모터와 작동 가능하게 연결된 리포터 유전자는 도 2a의 개열지도로 표시되는 pLenti6-Sox3-DsRed이고, 상기 Nestin 프로모터 및 상기 Nestin 프로모터와 작동 가능하게 연결된 리포터 유전자는 도 2a의 개열지도로 표시되는 pLenti6-Nestin-EGFP인 조성물
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제3항에 있어서, 상기 리포터 유전자는 녹색 형광 단백질(GFP), 변형된 녹색 형광 단백질(modified green fluorescent protein), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein; EGFP), 적색 형광 단백질(RFP), 증강된 적색 형광 단백질(ERFP), 청색 형광 단백질(BFP), 증강된 청색 형광 단백질(EBFP), 황색 형광 단백질(YFP), 증강된 황색 형광 단백질(EYFP), 남색 형광 단백질(CFP), 증강된 남색 형광 단백질(ECFP), DsRed 및 레닐라 루시퍼라제(Renila luciferase)로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 조성물
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제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 포함하는 배아줄기세포
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Sox3 프로모터 및 Nestin 프로모터의 활성 수준을 확인하여 배아줄기세포로부터 신경계 세포로의 분화 여부를 탐지하는 방법
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제7항에 있어서,
(a) 분화유도물질을 이용하여 배아줄기세포로부터 신경계 세포로 분화를 유도하는 단계;
(b) 배아줄기세포 및 분화가 유도되었다고 예상되는 줄기세포의 핵산 시료 또는 단백질 시료를 얻는 단계;
(c) 상기 핵산 시료 또는 단백질 시료 중, Sox3 프로모터 및 Nestin 프로모터 다운스트림 유전자의 mRNA 전사량 또는 상기 유전자에 의해 코딩된 단백질 발현량을 측정하는 단계; 및
(d) 상기 단계 (c)의 유전자의 전사량 또는 상기 단백질의 발현량이 증가되었을 때, 배아줄기세포가 신경계세포로 분화된 것으로 판정하는 단계를 포함하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 단계 (c)에서 유전자의 발현량은 역전사 중합효소연쇄반응(RT-PCR) 또는 실시간 중합효소연쇄반응(Real time PCR)으로 확인하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 다운스트림 유전자는 녹색 형광 단백질(GFP), 변형된 녹색 형광 단백질(modified green fluorescent protein), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluore질(ERFP), 청색 형광 단백질(BFP), 증강된 청색 형광 단백질(EBFP), 황색 형광 단백질(YFP), 증강된 황색 형광 단백질(EYFP), 남색 형광 단백질(CFP), 증강된 남색 형광 단백질(ECFP), DsRed 및 레닐라 루시퍼라제(Renila luciferase)로 구성된 군으로부터 선택되는 것인 방법
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제7항에 있어서, 상기 단계 (c)에서 단백질의 발현량을 측정하는 단계는 Sox3 프로모터 및 Nestin 프로모터에 의해 발현되는 다운스트림 유전자의 발색 수준을 배아줄기세포의 단백질 시료에서의 발색 수준과 비교하는 단계를 포함하는 것인 방법
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Sox3 프로모터 및 Nestin 프로모터 활성을 증가 또는 감소시킴으로써 배아줄기세포로부터 신경계 세포로의 분화를 조절하는 방법
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배아줄기세포에 신경계 세포로의 분화를 조절할 것으로 예상되는 후보 물질을 처리하는 단계; 및 배아줄기세포 및 분화가 유도되었다고 예상되는 줄기세포에서 Sox3 프로모터 및 Nestin 프로모터 다운스트림 유전자의 전사 활성 또는 상기 유전자에 의해 코딩되는 단백질의 발현 정도를 측정하는 단계를 포함하는, 배아줄기세포로부터 신경계 세포로의 분화 조절 물질을 스크리닝하는 방법
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