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분열효모용 발현벡터, 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 및 그 제조방법

  • 기술번호 : KST2015170972
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 마커유전자인 노르세오트리신 저항 유전자 및 표지단백질 유전자를 포함하는 분열효모용 발현벡터; 마커유전자인 노르세오트리신 저항 유전자 및 게이트웨이발현벡터 제조용 카세트를 포함하는 분열효모용 게이트웨이 발현벡터를 제공하며, 분열효모용 발현벡터 및 분열효모용 게이트웨이 발현벡터의 제조방법을 제공한다. 본 발명의 분열효모용 발현벡터는 최소배지에서도 분열효모의 선별이 가능하도록 하며, 발현된 목적유전자의 분석이 용이하도록 하는 작용효과를 갖고, 본 발명의 분열효모용 게이트웨이 발현벡터는 최소배지에서도 분열효모의 선별이 가능하며, 단시간에 대량의 유전자를 벡터내로 클로닝이 가능하도록 하는 분열효모용 발현벡터를 용이하게 다량으로 제조할 수 있다. 또한, 본 발명의 제조방법에 의해 최소배지에서도 분열효모의 선별이 가능한 분열효모용 발현벡터 및 분열효모용 게이트웨이 발현벡터를 용이하게 제조할 수 있다. 분열효모용 발현벡터, 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
Int. CL C12N 15/09 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12N 15/04 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01)
CPC C12N 15/81(2013.01) C12N 15/81(2013.01) C12N 15/81(2013.01)
출원번호/일자 1020080124502 (2008.12.09)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1067328-0000 (2011.09.19)
공개번호/일자 10-2010-0065909 (2010.06.17) 문서열기
공고번호/일자 (20110923) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 발송
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.12.09)
심사청구항수 39

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 정경숙 대한민국 대전광역시 유성구
2 원미선 대한민국 대전광역시 서구
3 안지원 대한민국 충청남도 논산시
4 최정해 대한민국 부산광역시 사하구
5 염영일 대한민국 대전광역시 동구
6 이희구 대한민국 대전광역시 동구
7 송은영 대한민국 서울특별시 영등포구
8 송경빈 대한민국 대전광역시 서구
9 강창모 대한민국 서울특별시 노원구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 안소영 대한민국 서울특별시 강남구 논현로 ***, *층 (역삼동, 운기빌딩)(안소영국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 대한민국(산업통상자원부장관) 세종특별자치시 한누리대
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2008.12.09 수리 (Accepted) 1-1-2008-0846336-13
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2009.09.14 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2009.10.12 수리 (Accepted) 9-1-2009-0055475-18
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2011.01.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0018239-89
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2011.03.07 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0162014-66
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2011.03.07 수리 (Accepted) 1-1-2011-0162015-12
7 등록결정서
Decision to grant		 2011.09.05 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0504809-15
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
마커유전자인 노르세오트리신 저항 유전자 및 표지단백질 유전자를 포함하며, 상기 노르세오트리신 저항 유전자의 염기서열은 서열번호 10이고, 상기 표지단백질 유전자는 녹색형광단백질 유전자, 적색형광단백질 유전자, 및 헤마글루티닌 에피토프 유전자 중에서 선택된 하나 이상인 분열효모용 발현벡터
2 2
삭제
3 3
삭제
4 4
제1항에 있어서, 상기 표지단백질 유전자는 녹색형광단백질 유전자 또는 적색형광단백질 유전자인 분열효모용 발현벡터
5 5
제1항에 있어서, 상기 녹색형광단백질 유전자의 염기서열은 서열번호 3인 분열효모용 발현벡터
6 6
제1항에 있어서, 상기 적색형광단백질 유전자의 염기서열은 서열번호 6인 분열효모용 발현벡터
7 7
제1항에 있어서, 상기 헤마글루티닌 에피토프 유전자의 염기서열은 서열번호 7인 분열효모용 발현벡터
8 8
제1항에 있어서, 상기 발현벡터의 개열지도는 도 2의 (3), 도 3의 (6), 또는 도 4의 (4)에 도시된 것인 분열효모용 발현벡터
9 9
제1항, 제4항 내지 제8항 중 어느 한항의 분열효모용 발현벡터에 의해 형질전환된 균주
10 10
제9항에 있어서, 상기 균주는 박테리아 또는 분열효모인 균주
11 11
마커유전자인 노르세오트리신 저항 유전자 및 게이트웨이발현벡터 제조용 카세트를 포함하는 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
12 12
제11항에 있어서, 상기 노르세오트리신 저항 유전자의 염기서열은 서열번호 10인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
13 13
제11항에 있어서, 상기 게이트웨이발현벡터 제조용 카세트의 염기서열은 서열번호 11 내지 서열번호 13중에서 선택된 하나 이상인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
14 14
제11항에 있어서, 상기 분열효모용 게이트웨이 발현벡터는 표지단백질 유전자를 추가로 포함하는 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
15 15
제14항에 있어서, 상기 표지단백질 유전자는 녹색형광단백질 유전자, 적색형광단백질 유전자, 및 헤마글루티닌 에피토프 유전자 중에서 선택된 하나 이상인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
16 16
제15항에 있어서, 상기 표지단백질 유전자는 녹색형광단백질 유전자 또는 적색형광단백질 유전자인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
17 17
제15항에 있어서, 상기 녹색형광단백질 유전자의 염기서열은 서열번호 3인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
18 18
제15항에 있어서, 상기 적색형광단백질 유전자의 염기서열은 서열번호 6인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
19 19
제15항에 있어서, 상기 헤마글루티닌 에피토프 유전자의 염기서열은 서열번호 7 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
20 20
제11항에 있어서, 상기 벡터의 개열지도는 도 6의 (2)에 도시된 것인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
21 21
제11항에 있어서, 상기 벡터의 개열지도는 도 9의 (2)에 도시된 것인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
22 22
제14항에 있어서, 상기 벡터의 개열지도는 도 7의 (1), 도 7의 (2), 또는 도 7의 (3)에 도시된 것인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터
23 23
제11항 내지 제22항 중 어느 한 항의 분열효모용 게이트웨이 발현벡터에 엔트리벡터 중 목적 유전자가 재조합효소작용에 의해 도입된 분열효모용 발현벡터
24 24
제23항의 분열효모용 발현벡터에 의해 형질전환된 균주
25 25
제24항에 있어서, 상기 균주는 박테리아 또는 분열효모인 균주
26 26
(a1) 분열효모발현용 프로모터와 노르세오트리신 저항 유전자를 포함하며, 상기 프로모터 3'말단에 상기 노르세오트리신 저항 유전자가 위치하고, 상기 프로모터의 5'말단과 상기 노르세오트리신 저항 유전자의 3'말단에 동일한 제한효소절단부위를 갖는 벡터를 준비하는 단계; (b1) 분열효모발현용 프로모터, 영양마커 유전자, 및 표지단백질유전자를 포함하며, 상기 프로모터 3'말단에 상기 영양마커 유전자가 위치하고, 상기 프로모터의 5'말단과 상기 영양마커 유전자의 3'말단에 상기 (a)단계와 동일한 제한효소절단부위를 갖는 벡터를 준비하는 단계; 및 (c1) 상기 (a1)단계와 상기 (b1)단계의 벡터를 상기 동일한 제한효소절단부위를 절단하는 제한효소로 절단하고, 각각의 절단물을 융합하는 단계를 포함하는 분열효모용 발현벡터 제조방법
27 27
제26항에 있어서, 상기 (a1)단계의 벡터는 도 2의 (1)에 도시된 개열지도를 갖는 것인 분열효모용 발현벡터 제조방법
28 28
제26항에 있어서, 상기 (b1)단계의 벡터는 도 2의 (2)에 도시된 개열지도를 갖는 것인 분열효모용 발현벡터 제조방법
29 29
제26항에 있어서, 상기 (a1)단계의 벡터는 양말단에 동일한 제한효소절단부위를 갖는 노르세오트리신 저항 유전자를 포함하는 벡터로부터 노르세오트리신 저항 유전자를 제한효소로 절단하고, 상기 제한효소절단부위와 동일한 부위를 3'말단에 갖는 분열효모발현용 프로모터를 포함하는 벡터에 상기 절단된 노르세오트리신 저항 유전자를 삽입하여 제조된 것인 분열효모용 발현벡터 제조방법
30 30
제29항에 있어서, 상기 노르세오트리신 저항 유전자를 포함하는 벡터는 도 1의 (1)에 도시된 개열지도를 갖는 것인 분열효모용 발현벡터 제조방법
31 31
제29항에 있어서, 상기 분열효모발현용 프로모터를 포함하는 벡터는 도 1의 (4)에 도시된 개열지도를 갖는 것인 분열효모용 발현벡터 제조방법
32 32
제26항에 있어서, 상기 (c1)단계의 결과물에 포함된 표지단백질유전자를 제거하는 단계를 추가로 포함하는 분열효모용 발현벡터 제조방법
33 33
제32항에 있어서, 상기 (c1)단계의 결과물은 도 5의 (1)에 도시된 개열지도를 갖는 것인 분열효모용 발현벡터 제조방법
34 34
제32항에 있어서, 상기 표지단백질 유전자는 헤마글루티닌 에피토프 유전자이며, 상기 (c1)단계 이후에 상기 헤마글루티닌 에피토프 유전자를 절단하여 제거하고, 헤마글루티닌 에피토프 유전자가 제거된 벡터에 형광단백질 유전자 절편을 삽입시키는 단계를 추가로 포함하는 분열효모용 발현벡터 제조방법
35 35
제26항 내지 제34항 중에서 선택된 어느 한 항의 방법으로 제조된 분열효모용 발현벡터에 게이트웨이 발현벡터 제조용 카세트를 삽입하는 단계를 포함하는 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 제조방법
36 36
제35항에 있어서, 표지단백질유전자 및 게이트웨이 발현벡터 제조용 카세트를 포함하는 벡터에서 표지단백질유전자를 제거하는 단계를 추가로 포함하는 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 제조방법
37 37
제35항에 있어서, 상기 게이트웨이 발현벡터 제조용 카세트의 염기서열은 서열번호 11 내지 서열번호 13중에서 선택된 하나 이상인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 제조방법
38 38
(a2) 노르세오트리신 저항 유전자는 포함하지 않고, 영양마커유전자와 표지단백질유전자를 포함하며, 상기 표지단백질유전자 3'말단부에 게이트웨이 발현벡터 제조용 카세트 삽입용 제한효소절단부위를 갖는 분열효모용 발현벡터를 준비하는 단계; (b2) 상기 (a2)단계의 카세트 삽입용 제한효소절단부위를 제한효소로 절단하고 게이트웨이 발현벡터 제조용 카세트를 삽입하는 단계; 및 (c2) 상기 (b2)단계의 카세트가 삽입된 분열효모용 발현벡터에서 영양마커유전자를 노르세오트리신 저항 유전자로 교환하는 단계를 포함하는 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 제조방법
39 39
제38항에 있어서, 상기 (c2)단계의 결과물에서 표지단백질유전자를 제거하는 단계를 추가로 포함하는 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 제조방법
40 40
제38항에 있어서, 상기 (a2)단계의 발현벡터는 도 8의 (1)에 도시된 개열지도를 갖는 것인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 제조방법
41 41
제38항에 있어서, 상기 (b2)단계의 게이트웨이 발현벡터 제조용 카세트의 염기서열은 서열번호 11 내지 서열번호 13중에서 선택된 하나 이상인 분열효모용 게이트웨이 발현벡터 제조방법
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