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재조합 섬유소 당화효소 칵테일 및 재조합 효모 복합 균주 및 이의 용도

  • 기술번호 : KST2015171174
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 단백질 융합인자(Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 TrXynII, TrBxl, TrEGL2, PaCEL1, PaCel2, TeCBH1, NfCBH1, HgCBH1, CtCBH1, ClCBH2, CfCex1으로 이루어진 군으로부터 선택된 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 효모에서 야생형에 비해 단백질의 분비능이 증가된 발현카세트, 이를 포함하는 발현벡터, 상기 발현벡터가 숙주세포에 도입된 형질전환체 및 상기 형질전환체를 2 이상 포함하는 복합 균주에 관한 것이다. 또한, 상기 형질전환체를 배양하는 단계를 포함하는, 헤미셀룰라제, 엔도글루카나제, 또는 엑소글루카나제 생산방법 및 바이오 에탄올의 생산방법에 관한 것이다. 아울러, 베타글루코시다제와 상기 방법에 의해서 생산된 엔도글루카나제, 엑소글루카나제를 포함하는, 셀룰라제 칵테일, 및 상기 칵테일을 이용하여 바이오매스를 당화하는 방법에 관한 것이다. 또한 상기 셀룰라제를 생산하는 균주를 단일 사용 또는 2개 이상을 복합적으로 사용하여 섬유소 바이오매스로부터 바이오에너지 또는 유용 바이오케미컬 생산에 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에서 제공하는 셀룰라제 발현벡터를 이용하면 효모 사카로마이세스 세레비지아에서 셀룰라제의 대량생산이 가능하며 상기균주는 기존 당화와 발효 2단계에 의해 수행되는 공정을 동시당화 또는 생물통합공정에 적용하여 효소비용을 80% 이상 절감할 수 있는 단일단계로 수행이 가능하기 때문에 목질계 바이오매스로부터 바이오에탄올 및 바이오케미컬 제조 등의 다양한 산업공정에 널리 활용될 수 있다.
Int. CL C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12P 7/06 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020140082753 (2014.07.02)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2015-0004297 (2015.01.12) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020130077440   |   2013.07.02
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020150172355;1020150172369;
심사청구여부/일자 Y (2014.07.28)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 손정훈 대한민국 대전광역시 유성구
2 성봉현 대한민국 대전광역시 유성구
3 배정훈 대한민국 대전광역시 유성구
4 이초룡 대한민국 대전광역시 유성구
5 김미진 대한민국 대전광역시 유성구
6 김현진 대한민국 대전광역시 유성구
7 용환웅 대한민국 대전광역시 유성구
8 임광묵 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2014.07.02 수리 (Accepted) 1-1-2014-0626372-50
2 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2014.07.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0711717-81
3 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2014.07.28 수리 (Accepted) 1-1-2014-0711718-26
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.01.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
6 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.03.13 수리 (Accepted) 9-1-2015-0019188-72
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2015.09.04 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0608570-53
8 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2015.11.03 수리 (Accepted) 1-1-2015-1069850-76
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2015.12.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-1189579-88
10 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2015.12.04 수리 (Accepted) 1-1-2015-1189507-12
11 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application
2015.12.04 수리 (Accepted) 1-1-2015-1189435-12
12 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2015.12.04 수리 (Accepted) 1-1-2015-1189530-52
13 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.04.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0266695-63
14 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2016.06.10 수리 (Accepted) 1-1-2016-0561197-88
15 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.07.08 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0664570-43
16 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.07.08 수리 (Accepted) 1-1-2016-0664568-51
17 협의요구서
Request for Consultation
2016.11.24 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0848354-05
18 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.01.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0024606-46
19 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.03.10 수리 (Accepted) 1-1-2017-0242429-72
20 등록결정서
Decision to grant
2017.05.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0375215-30
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(i) 서열번호 53의 아미노산 서열로 이루어진 TFP5 (Translational fusion parter 5), 서열번호 57의 아미노산 서열로 이루어진 TFP9 (Translational fusion parter 9), 서열번호 61의 아미노산 서열로 이루어진 TFP13 (Translational fusion parter 13) 또는 서열번호 67의 아미노산 서열로 이루어진 TFP19 (Translational fusion parter 19)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드와 TrXynII (Trichoderma reesei xylanase II) 헤미셀룰라제 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드, 또는 (ii) 서열번호 52의 아미노산 서열로 이루어진 TFP4 (Translational fusion parter 4)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드와 TrBxl (Trichoderma reesei beta-xylosidase) 헤미셀룰라제 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 효모에서 야생형 단백질에 비해 분비능이 증가된 단백질 발현용 발현카세트
2 2
제1항에 있어서,ⅰ) 상기 TrXynII는 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 단백질이거나;ⅱ) 상기 TrBxl는 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 단백질인, 발현카세트
3 3
삭제
4 4
제1항 또는 제2항의 발현카세트를 포함하는 발현벡터
5 5
제4항의 발현벡터가 숙주세포에 도입된 형질전환체
6 6
제5항에 있어서,상기 숙주세포는 에탄올 발효능을 가지는 세포인, 형질전환체
7 7
삭제
8 8
제5항의 형질전환체를 배양하는 단계를 포함하는, 헤미셀룰라제 생산방법
9 9
(i) 제5항의 형질전환체를 배양하는 단계; 및(ii) 상기 (i) 단계에서 수득한 배양물 또는 배양상등액으로부터 바이오에탄올을 회수하는 단계를 포함하는, 바이오 에탄올의 생산방법
10 10
제9항에 있어서,상기 형질전환체는 에탄올 발효능을 가지는 숙주세포로부터 만들어진 것인, 바이오 에탄올의 생산방법
11 11
(a) 제5항의 형질전환체; 및(b) 단백질 융합인자(Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 TrEGL2 (Trichoderma reesei endo-glucanase 2), PaCEL1 (Polyporus acularius Cel1), PaCel2 (Polyporus acularius Cel2), TeCBH1 (Talaromyces emersonii Cellobiohydrolase 1), NfCBH1 (Neosartorya fischeri Cellobiohydrolase 1), HgCBH1 (Humicola grisea Cellobiohydrolase 1), CtCBH1 (Chaetomium thermophilum Cellobiohydrolase 1), ClCBH2 (Chrysosporium lucknowense Cellobiohydrolase 2) 및 CfCex1 (Cellulomonas fimi Cex1)으로 이루어진 군으로부터 선택된 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 효모에서 야생형 단백질에 비해 분비능이 증가된 단백질 발현용 발현카세트가 도입된, 형질전환체 중에서 선택되는 하나 이상의 형질전환체;를 포함하는, 복합 균주
12 12
(i) 제11항의 복합 균주를 배양하는 단계; 및 (ii) 상기 (i) 단계에서 수득한 배양물 또는 배양상등액으로부터 바이오에탄올을 회수하는 단계를 포함하는, 바이오 에탄올의 생산방법
13 13
제11항에 있어서, 상기 복합 균주는 자일란 분해능을 갖는 것인, 복합 균주
14 14
(a) 제8항에 의하여 생산된 헤미셀룰라제;(b) 베타글루코시다제; 및(c) 단백질 융합인자(Translational fusion partner, TFP)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 TrEGL2 (Trichoderma reesei endo-glucanase 2), PaCEL1 (Polyporus acularius Cel1), PaCel2 (Polyporus acularius Cel2), TeCBH1 (Talaromyces emersonii Cellobiohydrolase 1), NfCBH1 (Neosartorya fischeri Cellobiohydrolase 1), HgCBH1 (Humicola grisea Cellobiohydrolase 1), CtCBH1 (Chaetomium thermophilum Cellobiohydrolase 1), ClCBH2 (Chrysosporium lucknowense Cellobiohydrolase 2) 및 CfCex1 (Cellulomonas fimi Cex1)으로 이루어진 군으로부터 선택된 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 효모에서 야생형 단백질에 비해 분비능이 증가된 단백질 발현용 발현카세트가 도입된, 형질전환체에 의하여 생산된 단백질 중에서 선택된 하나 이상의 단백질;을 포함하는, 셀룰라제 칵테일
15 15
제14항에 있어서, 상기 베타글루코시다제는 서열번호 74의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 셀룰라제 칵테일
16 16
삭제
17 17
삭제
18 18
삭제
19 19
제14항에 있어서,상기 셀룰라제 칵테일은 엔도자일라나제와 베타자일로시다제를 포함하는 것인, 셀룰라제 칵테일
20 20
제19항에 있어서,상기 엔도자일라나제는 TrXynII (Trichoderma reesei xylanase II) 단백질이고, 상기 베타자일로시다제는 TrBxl (Trichoderma reesei beta-xylosidase)인 것인, 셀룰라제 칵테일
21 21
제14항의 셀룰라제 칵테일을 이용하여 바이오매스를 당화하는 방법
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1 CN105492612 CN 중국 FAMILY
2 KR101744670 KR 대한민국 FAMILY
3 KR101745479 KR 대한민국 FAMILY
4 WO2015002471 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 CN105492612 CN 중국 DOCDBFAMILY
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3 KR101745479 KR 대한민국 DOCDBFAMILY
4 KR20150141180 KR 대한민국 DOCDBFAMILY
5 KR20150142666 KR 대한민국 DOCDBFAMILY
6 WO2015002471 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농림수산식품부(농림부) 한국생명공학연구원 농림기술개발사업 바이오매스 당화효소 저가생산기술 개발
2 농림수산식품부(농림부) 한국생명공학연구원 농림기술개발사업 비목재자원을 활용한 바이오신소재 개발: 고온성 효모(KM) 세포공장 플랫폼 구축 및 그린바이오 신소재 생산기술 개발
3 지식경제부 한국생명공학연구원 에너지기술개발사업 고지방산 저급 팜 슬러지오일(PSO) 기반 바이오디젤 생산용 다기능성 촉매 개발
4 교육과학기술부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업 차세대 바이오매스 기반 바이오에너지 생산 효모 균주 및 공정개발
5 교육과학기술부 한국생명공학연구원 주요사업(연구개발과제) 바이오화학 플랫폼케미컬 생산 스마트 세포공장 기술개발
6 교육과학기술부 한국생명공학연구원 주요사업(연구개발과제) 바이오매스/에너지 세포공장 개발