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다능성 줄기세포의 제작, 유지, 증식을 증진하는 신규 저분자 화합물 및 이를 포함하는 조성물과 배양방법

  • 기술번호 : KST2015171255
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명에 의하면, 인간 분화세포에서 다능성 줄기세포를 제작하기 위한 역분화 유도 배양과정에 신규한 저분자 화합물 RSC-133을 첨가하면, 역분화 유도 효율을 증진시킬 수 있을 뿐만 아니라 역분화 유도에 소요되는 시간을 획기적으로 줄일 수 있다. 특히, 역분화 유도인자이자 암유발 위험인자인 c-Myc을 대체할 수 있는 것으로 확인되었으며, 정상산소 배양 조건 및 저산소 배양조건에서도 역분화 유도 효율을 모두 효과적으로 증진시킬 수 있음을 확인하였다. 또한, RSC-133은 역분화 유도 과정 중에서 발생하는 노화 유도를 억제하고 세포 증식 둔화를 증진시키는 효과를 나타내며, 후성 유전학적 활성화를 유도함으로써 역분화 유도 배양조건을 개선하고 있음을 검증하였다. 본 발명은 다양한 소스에서 확보된 적은 양의 환자-특이적 체세포로부터 유도 만능 줄기세포를 제작과정을 최적화하는데 기여함으로써 임상적용 가능한 개인 맞춤형 줄기세포 세포 치료제 개발 및 신약개발과정을 획기적으로 개선하고, 실용화시기를 앞당기는데 기여할 것이다. 또 다른 양태로써, 본 발명에 의하면, 신규한 저분자 화합물 RSC-133이 대표적인 다능성 줄기세포인 인간 배아줄기세포의 미분화 상태 유지에 효과적인 배양 배지 조성물이 될 수 있음을 확인하였다. RSC-133이 첨가된 배지 조성물은 인간 배아줄기세포의 미분화 증식을 효과적으로 유도할 수 있으며, 배아줄기세포의 대량 배양 시스템을 개발하는데 유용하게 사용될 수 있을 것으로 기대한다.
Int. CL C07D 209/20 (2006.01) C12N 5/02 (2006.01) A61K 31/404 (2006.01) C12N 5/0735 (2010.01)
CPC
출원번호/일자 1020120126352 (2012.11.08)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1586037-0000 (2016.01.11)
공개번호/일자 10-2013-0133638 (2013.12.09) 문서열기
공고번호/일자 (20160119) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020120056881   |   2012.05.29
대한민국  |   1020120057803   |   2012.05.30
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2013.11.21)
심사청구항수 34

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 조이숙 대한민국 대전광역시 유성구
2 이경 대한민국 서울특별시 중구
3 이정운 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.11.08 수리 (Accepted) 1-1-2012-0920125-39
2 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)		 2013.11.21 수리 (Accepted) 1-1-2013-1062060-36
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2015.03.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0193172-72
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2015.05.26 수리 (Accepted) 1-1-2015-0502108-84
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2015.06.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-0605522-11
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.06.23 수리 (Accepted) 1-1-2015-0605521-65
8 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2015.10.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0752299-73
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.12.02 수리 (Accepted) 1-1-2015-1178608-67
10 [명세서등 보정]보정서(재심사)
Amendment to Description, etc(Reexamination)		 2015.12.02 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2015-1178617-78
11 등록결정서
Decision to Grant Registration		 2016.01.06 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0013325-29
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기 화학식 1의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:[화학식 1]상기 화학식에서, R1은 아미노기(NH2), 메틸아미노기(NHCH3), 디메틸아미노기(N(CH3)2), O-이소프로필기(O-isopropyl), 또는 프로필아미노기(NHCH(CH3)2)이고; R2는 히드록시기(OH) 또는 수소(H)이며;---로 표현된 부분은 단일 결합 또는 이중 결합임,단, 상기 화학식 1에 있어서, R1이 아미노기(NH2)이고, R2가 수소(H)인 경우는 제외한다
2 2
삭제
3 3
제1항에 있어서, R1은 O-이소프로필기(O-isopropyl)이고; R2는 히드록시기(OH)이며; --- 부분은 이중 결합인 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염
4 4
제1항에 있어서, R1은 아미노기(NH2)이고;R2는 히드록시기(OH)이며; --- 부분은 이중 결합인 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염
5 5
제1항에 있어서, R1은 메틸아미노기(NHCH3)이고;R2는 히드록시기(OH)이며; --- 부분은 이중 결합인 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염
6 6
제1항에 있어서, R1은 프로필아미노기(NHCH(CH3)2)이고; R2는 히드록시기(OH)이며; --- 부분은 이중 결합인 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염
7 7
제1항에 있어서,R1은 디메틸아미노기(NH(CH3)2)이고; R2는 히드록시기(OH)이며; --- 부분은 이중 결합인 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염
8 8
제1항에 있어서, 상기 화학식 1의 화합물은1) 이소프로필 3-[3-(1H-인돌-3-일)-아크릴아미도]-4-히드록시 벤조에이트;2) 3-[3-(1H-인돌-3-일)-아크릴아미도]-4-히드록시 벤즈아마이드;3) 3-[3-(1H-인돌-3-일)-아크릴아미도]-4-히드록시-N-메틸벤즈아마이드;4) 3-[3-(1H-인돌-3-일)-아크릴아미도]-4-히드록시-N-이소프로필벤즈아마이드; 및5) 3-[3-(1H-인돌-3-일)-아크릴아미도]-4-히드록시-N,N- 디메틸벤즈아마이드로 구성되는 군에서 선택되는 것인 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염
9 9
하기 화학식 1의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 배지 조성물:[화학식 1]상기 화학식에서, R1은 아미노기(NH2), 메틸아미노기(NHCH3), 디메틸아미노기(N(CH3)2), O-이소프로필기(O-isopropyl), 또는 프로필아미노기(NHCH(CH3)2)이고; R2는 히드록시기(OH) 또는 수소(H)이며;---로 표현된 부분은 단일 결합 또는 이중 결합이다
10 10
하기 화학식 1의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 분화된 세포에서 다능성 줄기세포로의 역분화 촉진용 조성물:[화학식 1]상기 화학식에서, R1은 아미노기(NH2), 메틸아미노기(NHCH3), 디메틸아미노기(N(CH3)2), O-이소프로필기(O-isopropyl), 또는 프로필아미노기(NHCH(CH3)2)이고; R2는 히드록시기(OH) 또는 수소(H)이며;---로 표현된 부분은 단일 결합 또는 이중 결합이다
11 11
제10항에 있어서, 상기 분화된 세포는 체세포 또는 전구세포인 조성물
12 12
제10항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 유도 만능 줄기세포 또는 배아줄기세포인 조성물
13 13
제12항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 인간 유래인 것인 조성물
14 14
제10항에 있어서, 상기 화학식 1의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 농도는 0
15 15
제10항에 있어서, 상기 조성물은 역분화 유도인자를 추가로 포함하는 것인 조성물
16 16
제15항에 있어서, 상기 역분화 유도인자는 Oct4, Sox2, KlF4, c-Myc, Nanog 및 Lin-28로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 단백질 또는 이들 단백질을 코딩하는 하나 이상의 핵산분자인 것인 조성물
17 17
분화된 세포; 제10항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 조성물; 및 역분화 유도인자를 포함하며, 상기 분화된 세포는 다능성 줄기세포로 역분화되는 시험관 내 세포 배양물
18 18
제17항에 있어서, 상기 분화된 세포는 체세포 또는 전구세포인 것을 특징으로 하는 세포 배양물
19 19
제17항에 있어서, 상기 분화된 세포는 인간 유래인 것을 특징으로 하는 세포 배양물
20 20
제17항에 있어서, 상기 역분화는 제10항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 처리하지 않은 대조군에 비하여 p53, p21, 또는 p16 레벨이 억제되는 것인 세포 배양물
21 21
제17항에 있어서, 상기 분화된 세포에서 다능성 줄기세포로의 역분화는 제10항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 처리하지 않은 대조군에 비하여 HDAC1의 기능이 억제되고 H3K9ace 레벨이 증가되는 것인 세포 배양물
22 22
(a) 분화된 세포에 역분화 유도인자를 전달하는 단계; 및(b) 분화된 세포를 제10항에 따른 조성물을 함유하는 배지에서 배양하는 단계를 포함하는, 분화된 세포에서 역분화된 다능성 줄기세포를 제조하는 방법
23 23
제22항에 있어서, 단계 (b)로부터 얻어진 배양물로부터 배아줄기세포-유사 콜로니(embryonic stem cell-like colonies)를 분리하는 단계를 추가로 포함하는 방법
24 24
제22항에 있어서, 상기 역분화 유도인자는 Oct4, Sox2, KlF4, c-Myc, Nanog 및 Lin-28로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질 또는 이들 단백질을 코딩하는 어느 하나 이상의 핵산분자인 방법
25 25
제22항에 있어서, 상기 (a) 단계와 (b) 단계는 동시, 순차적 또는 역순으로 수행되는 것인 방법
26 26
하기 화학식 1의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 미분화 상태의 다능성 줄기세포 유지 및 배양용 배지 조성물:[화학식 1]상기 화학식에서, R1은 아미노기(NH2), 메틸아미노기(NHCH3), 디메틸아미노기(N(CH3)2), O-이소프로필기(O-isopropyl), 또는 프로필아미노기(NHCH(CH3)2)이고; R2는 히드록시기(OH) 또는 수소(H)이며;---로 표현된 부분은 단일 결합 또는 이중 결합이다
27 27
제26항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 배아줄기세포 또는 유도 만능 줄기세포인 것을 특징으로 하는 배지 조성물
28 28
제26항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 인간 유래인 것을 특징으로 하는 배지 조성물
29 29
제26항에 있어서, 상기 화학식 1의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 농도는 0
30 30
제26항 내지 제29항 중 어느 한 항에 따른 배지 조성물 상에서 다능성 줄기세포를 배양하는 단계를 포함하는 미분화 상태로 다능성 줄기세포를 배양하는 방법
31 31
제30항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 배아줄기세포 또는 유도만능줄기세포인 것을 특징으로 하는 방법
32 32
제30항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 인간 유래인 것을 특징으로 하는 방법
33 33
다능성 줄기세포; 및 상기 다능성 줄기세포가 다수의 연속 계대 배양을 통해서 미분화 상태로 유지되도록 제26항 내지 제29항 중 어느 한 항에 따른 배지 조성물을 포함하는 시험관 내 세포 배양물
34 34
제33항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 배아줄기세포 또는 유도 만능 줄기세포인 것을 특징으로 하는 시험관 내 세포 배양물
35 35
제33항에 있어서, 상기 다능성 줄기세포는 인간 유래인 것을 특징으로 하는 시험관 내 세포 배양물
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2 EP02774918 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 US09587225 US 미국 FAMILY
4 US10301598 US 미국 FAMILY
5 US20150159142 US 미국 FAMILY
6 US20170159023 US 미국 FAMILY
7 WO2013180350 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP2774918 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
2 EP2774918 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
3 EP2774918 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
4 US10301598 US 미국 DOCDBFAMILY
5 US2015159142 US 미국 DOCDBFAMILY
6 US2017159023 US 미국 DOCDBFAMILY
7 US9587225 US 미국 DOCDBFAMILY
8 WO2013180350 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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1 교육과학기술부 한국생명공학연구원 주요사업(연구개발과제) 줄기세포 전분화능 제어 신기술 개발
2 교육과학기술부 한국생명공학연구원 원천기술개발사업(바이오의료기술) 줄기세포연구사업
3 교육과학기술부 한국생명공학연구원 정책연구사업(이사회) 전분화능 제어 분자 표적 발굴 및 이용 기술 개발