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효모 이중 혼성 분석을 이용하여 세포성장 조절인자 간의상호작용을 측정함으로써 세포성장 조절물질을스크리닝하는 방법

  • 기술번호 : KST2015171268
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 세포성장관련 인자를 이용한 세포성장 조절제의 스크리닝 방법에 관한 것으로서, 구체적으로는 세포주기조절인자 Psp1이 Spufd2와 상호작용하여 세포의 성장 및 생존에 영향을 미치므로 상기 성질을 이용한 세포성장 조절제 스크리닝 방법에 관한 것이다. 본 발명의 스크리닝 방법은 세포주기조절인자의 상호작용을 분석할 수 있는 효모이중혼성방법을 이용하여 상호작용을 측정함으로써 세포성장조절인자를 스크리닝하며, Psp1과 Spufd2의 경우 Psp1의 인산화는 Spufd2와의 상호작용에 주요한 역할을 하므로 Psp1과 spufd2의 스크리닝 방법을 이용하면 인산화 저해제 또는 항암제를 신속하게 대량으로 스크리닝할 수 있다.
Int. CL C12N 15/81 (2006.01)
CPC C12Q 1/025(2013.01) C12Q 1/025(2013.01) C12Q 1/025(2013.01) C12Q 1/025(2013.01)
출원번호/일자 1020010038076 (2001.06.29)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-0426336-0000 (2004.03.26)
공개번호/일자 10-2003-0002460 (2003.01.09) 문서열기
공고번호/일자 (20040408) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2001.06.29)
심사청구항수 18

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 유향숙 대한민국 대전광역시동구
2 원미선 대한민국 대전광역시서구
3 장영주 대한민국 대전광역시유성구
4 정경숙 대한민국 대전광역시유성구
5 김동욱 대한민국 대전광역시유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2001.06.29 수리 (Accepted) 1-1-2001-0159453-79
2 전자문서첨부서류제출서
Submission of Attachment to Electronic Document		 2001.07.02 수리 (Accepted) 1-1-2001-5187361-17
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2003.02.17 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2003.03.18 수리 (Accepted) 9-1-2003-0009362-16
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2003.11.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2003-0478785-86
6 의견서
Written Opinion		 2003.12.29 수리 (Accepted) 1-1-2003-0505082-85
7 명세서 등 보정서
Amendment to Description, etc.		 2003.12.29 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2003-0505081-39
8 등록결정서
Decision to grant		 2004.03.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2004-0110606-37
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2005.05.09 수리 (Accepted) 4-1-2005-0016474-59
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2008.04.10 수리 (Accepted) 4-1-2008-5054980-73
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1

1) 세포성장 관련 조절인자를 발현하는 유전자와 리포터 유전자의 프로모터에 결합하는 DNA 결합 도메인(DNA-binding domain; DNA-BD)을 융합시킨 이중혼성 벡터를 제조하는 단계;

2) 세포성장 관련 조절인자를 발현하는 유전자와 리포터 유전자의 전사를 돕는 전사활성 도메인(transcription activation domain; DNA-AD)을 융합시킨 이중혼성 벡터를 제조하는 단계;

3) 단계 1과 단계 2)에서 제조된 이중혼성 벡터를 동시에 숙주세포에 도입하여 형질전환시키는 단계;

4) 단계 3)의 형질전환세포를 배양하는 단계;

5) 검사하고자 하는 약물을 형질전환체 세포에 처리하는 단계; 및

6) 기질을 사용하여 전사리포터의 활성분석을 하는 단계로 구성되는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

2 2

삭제
3 3

제 1항에 있어서, 세포성장 조절 관련 유전자는 단백질의 인산화에 의해 상호작용이 조절되는 단백질의 유전자를 이용하는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

4 4

제 1항에 있어서, 세포성장 조절 관련 유전자 Psp1과 Spufd2, Byr2-Ste, RAd24-cdc25의 상호작용을 이용하는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

5 5

제 1항에 있어서, 이중혼성 벡터는 리포터 유전자의 전사를 위한 DNA 결합부위 유전자, 전사활성부위 유전자, 전사리포터와 선별마커 유전자를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

6 6

제 4항에 있어서, 리포터유전자의 전사를 위한 DNA 결합 유전자는 GAL4 및 LexA로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

7 7

제 4항에 있어서, 리포터유전자의 전사를 위한 전사활성부위 유전자는 GAL4AD 및 B42AD로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

8 8

제 4항에 있어서, 전사리포터는 베타갈락토시다제(β-galactosidase), 루시퍼라제(luciferase), GFP(green fluorescent protein), CAT(thioredoxin-chloramphenicol acethyl transferase), Leu2+, Trp1+, Ura+, Ade+, His+ 및 Lys+로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

9 9

제 4항에 있어서, 선별 마커 유전자는 Leu2+, Trp1+, Ura+, His+, Ade+ 및 Lys+ 등과 같은 아미노산 요구 마커와 chloramphenicol, kanamycin, zeocin, G418(geneticin) 및 neomycin 등의 항생물질의 저항성으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

10 10

제 4항에 있어서, 전사리포터의 프로모터는 GAL4 또는 LexA가 결합 가능한 부위를 포함하는 프로모터를 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

11 11

제 1항에 있어서, 단계 3의 형질전환 숙주세포는 효모, 대장균 및 동물세포로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

12 12

제 11항에 있어서, 효모는 SFY526, HF7C, AH109, CG-1945, Y187, Y190, L40, EGY48, EGY48(pSH18-34) 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

13 13

제 1항에 있어서, 단계 1의 이중혼성 벡터는 pGBT9-Psp1 벡터인 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

14 14

제 1항에 있어서, 단계 2의 이중혼성 벡터는 pGAD424-Spufd2 벡터인 것을 특징으로 하는 세포성장 조절제의 스크리닝 방법

15 15

Psp1을 함유하는 플라스미드로 형질전환시킨 대장균 형질전환체(수탁번호; KCTC 0245BP)

16 16

분열효모의 세포성장 조절인자인 Psp1과 리포터유전자의 프로모터에 결합되는 진핵전사인자인 GAL4의 DNA 결합부위 도메인(DNA-binding domain; DNA-BD)이 융합된 이중혼성 벡터 pGBT9-psp1으로 형질전환시킨 대장균 형질전환체

17 17

유비퀴틴 진행인자 Spufd2와 리포터유전자의 프로모터에 결합되는 진핵전사인자인 GAL4의 전사활성부위(transcription activation domain; GAL4-AD)가 융합된 이중혼성벡터 pGAD424-Spufd2로 형질전환시킨 대장균 형질전환체(수탁번호 KCTC 8978P)

18 18

이중혼성 벡터 pGBT9-psp1과 pGAD424-Spufd2로 동시에 형질전환 시킨 효모 형질전환체(수탁번호; KCTC 1038BP)

19 19

제 18항의 효모 형질전환체를 대량으로 준비하고 서로 다른 약물을 동시에 처리하여 대량으로 세포성장 조절 약물을 스크리닝하는 방법

지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.