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서열번호 1로 기재되는 폴리뉴클레오티드 서열을 가지는 인간 퍼옥시레독신 (peroxiredoxin , hPrx)를 발현하는 항산화제 또는 노화 억제제 스크리닝용 형질전환 초파리
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제 1항에 있어서, 상기 형질전환 초파리는 몸 전체에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ를 발현하는 것을 특징으로 하는 형질전환 초파리(Actin5C-hPrxⅡ)
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제 1항에 있어서, 상기 형질전환 초파리는 신경세포에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ 단백질을 발현하는 것을 특징으로 하는 형질전환 초파리(elav-hPrxⅡ)
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제 1항에 있어서, 상기 형질전환 초파리는 콜린성 신경세포에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ 단백질을 발현하는 것을 특징으로 하는 형질전환 초파리(Cha-hPrxⅡ)
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제 1항에 있어서, 상기 형질전환 초파리는 운동 신경세포에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ 단백질을 발현하는 것을 특징으로 하는 형질전환 초파리(D42-hPrxⅡ)
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삭제
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1) 제 1항의 형질전환 초파리에 산화 스트레스를 유발시키는 단계;2) 상기 단계 1)의 산화 스트레스가 유발된 초파리에 피검화합물을 처리하는 단계;3) 처리한 초파리에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ mRNA 또는 단백질의 발현량을 측정하는 단계;4) 처리하지 않은 대조군과 비교하여 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ의 mRNA 또는 단백질 발현량을 증가시키는 피검화합물을 선별하는 단계;5) 상기에서 선별된 피검화합물이 초파리의 산화 스트레스를 억제시켰는지 여부를 측정하는 단계; 및,6) 처리하지 않은 대조군과 비교하여 산화 스트레스를 억제시킨 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 항산화제 효능의 스크리닝 방법
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제 7항에 있어서, 상기 단계 5)의 산화 스트레스의 억제 여부는 대조군과 비교하여ⅰ) 초파리 신경세포에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ의 mRNA 또는 단백질의 발현이 증가되었는지 여부;ⅱ) 초파리 신경세포에서 ROS 생성을 감소시켰는지 여부;ⅲ) 초파리 신경세포에서 ATP 생성이 증가되었는지 여부;ⅳ) 초파리 신경세포에서 미토콘드리아 DNA 카피수가 증가하였는지 여부; 및,ⅴ) 산화 스트레스에 의한 초파리의 치사율이 감소하였는지 여부로 구성되는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 지표를 측정함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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1) 제 1항의 형질전환 초파리에 산화 스트레스를 유발시키는 단계;2) 상기 단계 1)의 산화 스트레스가 유발된 초파리에 피검화합물을 처리하는 단계;3) 처리한 초파리에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ mRNA 또는 단백질의 발현량을 측정하는 단계;4) 처리하지 않은 대조군과 비교하여 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ의 mRNA 또는 단백질 발현량을 증가시키는 피검화합물을 선별하는 단계;5) 상기에서 선별된 피검화합물이 초파리의 수명을 증가시켰는지 여부를 측정하는 단계; 및,6) 처리하지 않은 대조군과 비교하여 초파리의 수명을 증가시킨 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 노화 억제제의 스크리닝 방법
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제 7항 또는 제 9항에 있어서, 상기 단계 1)에서 산화 스트레스는 초파리를 파라쿼트(paraquat)[메틸 바이올로겐(methyl viologen)]에 노출시키는 방법으로 유발시키는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7항 또는 제 9항에 있어서, 상기 단계 2)에서 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 및 박테리아 또는 진균의 대사산물로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7항 또는 제 9항에 있어서, 상기 단계 3)의 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ mRNA 발현양의 측정은 RT-PCR, 정량적 또는 반정량적 RT-PCR(Quentitative or semi-Quentitative RT-PCR), 정량적 또는 반정량적 리얼 타임PCR(Quentitative or semi-Quentitative real-time PCR), 노던 블롯(northern blot) 및 DNA 또는 RNA 칩(chip)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7항 또는 제 9항에 있어서, 상기 단계 3)의 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ 단백질 발현양의 측정은 웨스턴 블롯, 조직면역염색법, 조직형광염색법으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 7항 또는 제 9항에 있어서, 상기 단계 4)의 대조군은 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ를 발현하지 않는 초파리 또는 신경세포를 제외한 곳에서 인간 퍼옥시레독신 Ⅱ를 발현하는 초파리인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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제 9항에 있어서, 상기 단계 5)에서 초파리의 수명이 증가되었는지 여부는 대조군과 비교하여ⅰ) 산화 스트레스에 의한 초파리의 치사율이 감소하였는지 여부; 및,ⅱ) 카스파아제-3 단백질의 활성이 감소되었는지 여부를 측정함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
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