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SOCS2 유전자의 발현을 조절하여 자연 살해 세포를 활성화시키는 방법

  • 기술번호 : KST2015171444
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 자연 살해 세포(natural killer cell; NK cell)를 활성화시키는 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 자연 살해 세포에서 세포 신호전달과정에 관여하는 단백질인 SOCS2(suppressor of cytokine signaling 2)의 과발현을 유도하여 자연 살해 세포의 세포살상능을 증진시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명에서는 자연 살해 세포 분화에 관련된 사이토카인인 IL-15(Interleukin 15)를 자연 살해 세포에 처리했을 경우 SOCS2의 발현이 증가되고, 발현이 증가된 SOCS2에 의해 Pyk2(proline-rich tyrosine kinase 2) 발현이 억제되는 것을 관찰하였다. 또한, Pyk2를 과발현 시켰을 경우 자연 살해 세포의 IFN-γ(Interferon γ) 생성 및 암세포 살상 능력이 감소되었으므로 SOCS2를 자연 살해 세포를 활성화시키는 데에 유용하게 사용할 수 있으며, 상기 방법으로 활성화된 자연 살해 세포는 암의 예방 또는 치료에 유용하게 사용할 수 있다. SOCS2(suppressor of cytokine signaling 2), Pyk2(proline-rich tyrosine kinase 2), IL-15(Interleukin 15), 자연 살해 세포, NK cell(natural killer cell), 암, 감염성 질환, 세포 치료, 세포 치료법, IFN-γ(Interferon γ)
Int. CL A61K 38/17 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020090101784 (2009.10.26)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1124622-0000 (2012.02.29)
공개번호/일자 10-2011-0045283 (2011.05.04) 문서열기
공고번호/일자 (20120319) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.10.26)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 최인표 대한민국 대전광역시 유성구
2 이석형 대한민국 대전광역시 유성구
3 윤석란 대한민국 대전광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.10.26 수리 (Accepted) 1-1-2009-0654392-02
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2011.03.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.04.15 수리 (Accepted) 9-1-2011-0033695-99
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2011.06.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0361165-55
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2011.08.29 수리 (Accepted) 1-1-2011-0669809-48
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2011.08.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0669811-30
7 등록결정서
Decision to grant
2012.02.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0120729-00
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열번호 1로 기재되는 socs2(suppressor of cytokine signaling 2) 유전자가 작동가능하게 연결된 발현 벡터, 또는 상기 socs2 유전자에 의해 암호화되는 SOCS2 단백질을 유효성분으로 함유하는 자연 살해 세포 활성화에 의한 면역 증강용 약학적 조성물
2 2
제 1항에 있어서, 상기 SOCS2 단백질이 Pyk2(proline-rich tyrosine kinase 2) 단백질의 분해를 매개하여 작용을 억제함으로써 자연 살해 세포를 활성화시키는 것을 특징으로 하는 면역 증강용 약학적 조성물
3 3
서열번호 21로 기재되는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산 분자에 의해 암호화되는 SH2(Src homology 2) 도메인을 포함하는 SOCS2 단백질을 시험관 내 조건에서 자연 살해 세포에 처리하는 단계를 포함하는 상기 자연 살해 세포를 활성화시키는 방법
4 4
제 3항에 있어서, 상기 SH2 도메인을 포함하는 SOCS2 단백질은 서열번호 1로 기재되는 폴리뉴클레오티드 서열에 의해 암호화되는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 4항에 있어서, 상기 SH2 도메인을 포함하는 SOCS2 단백질은 서열번호 25로 기재되는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제 3항에 있어서, 하기 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법:ⅰ) Pyk2 단백질의 발현이 감소되었는지 여부를 확인함으로써;ⅱ) 세포에 NCR(natural cytotoxicity receptor) 자극을 주었을 때, 대조군과 비교하여 실험군의 IFN-γ 생성이 증가되었는지 확인함으로써; 또는,ⅲ) 대조군과 비교하여 실험군의 표적세포 살상능이 증가되었는지 확인함으로써 상기 자연 살해 세포가 활성화되었는지 여부를 결정하는 단계
7 7
삭제
8 8
1) 서열번호 1로 기재되는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 socs2 유전자가 작동 가능하게 연결된 발현벡터를 제조하는 단계; 및,2) 시험관 내 조건에서 상기 단계 1)에서 제조한 발현벡터를 자연 살해 세포에 형질도입하는 단계를 포함하는 자연 살해 세포의 활성화 방법
9 9
1) 서열번호 18로 기재되는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 Pyk2 유전자가 작동 가능하게 연결된 제 1 발현벡터를 제조하는 단계;2) SOCS2 내에서 서열번호 21로 기재되는 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 SH2 도메인은 보존되고, 상기 SOCS2 내의 상기 SH2 도메인을 제외한 서열에서 돌연변이가 발생한 돌연변이 SOCS2를 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 작동가능하게 연결된 제 2 발현 벡터를 제조하는 단계;3) 상기 단계 1)의 제 1 발현벡터 및 상기 단계 2)의 각각의 제 2 발현 벡터를 함께 또는 차례로 자연 살해 세포에 형질도입하는 단계;4) 상기 단계 3)의 형질도입된 세포(실험군)에서 Pyk2 단백질의 발현량을 측정하는 단계; 및, 5) 대조군과 비교하여 Pyk2 단백질의 발현량이 감소한 돌연변이 SOCS2를 선별하는 단계를 포함하는 자연 살해 세포 활성화 효과가 증가된 돌연변이 SOCS2의 스크리닝 방법
10 10
제 9항에 있어서, 상기 Pyk2 단백질 발현량은 웨스턴 블롯, 면역염색법, 형광염색법 및 리포터 분석(reporter assay)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법을 수행하여 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
11 11
1) 서열번호 18로 기재되는 Pyk2 유전자를 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 작동 가능하게 연결된 제 1 발현벡터를 제조하는 단계;2) 서열번호 21로 기재되는 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 SH2 도메인은 보존되면서 SOCS2 내의 SH2 도메인을 제외한 서열에서 돌연변이가 발생한 돌연변이 SOCS2를 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 작동가능하게 연결된 제 2 발현 벡터를 제조하는 단계;3) 상기 단계 1)의 제 1 발현벡터 및 상기 단계 2)의 각각의 제 2 발현 벡터를 함께 또는 차례로 자연 살해 세포에 형질도입하는 단계;4) 대조군과 비교하여 상기 단계 3)의 형질도입된 자연 살해 세포의 활성이 증가되었는지 여부를 ⅰ) Pyk2 단백질의 발현이 감소되었는지 여부를 확인함으로써;ⅱ) 세포에 NCR(natural cytotoxicity receptor) 자극을 주었을 때, 대조군과 비교하여 실험군의 IFN-γ 생성이 증가되었는지 확인함으로써; 또는,ⅲ) 대조군과 비교하여 실험군의 표적세포 살상능이 증가되었는지 확인함으로써 결정하는 단계를 포함하는 자연 살해 세포 활성화 효과가 증가된 SOCS2의 스크리닝 방법
12 12
제 9항 또는 제 11항에 있어서, 상기 단계 2)의 SOCS2는 서열번호 1로 기재되는 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제 9항 또는 제 11항에 있어서, 상기 단계 2)의 돌연변이 발생은 하나 이상의 아미노산이 치환, 부가 또는 결실되어 발생하는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제 9항 또는 제 11항에 있어서, 상기 단계 2)의 돌연변이 SOCS2는 서열번호 25으로 기재되는 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
삭제
16 16
제 3항 또는 제 8항의 방법으로 활성화된 자연 살해 세포
17 17
제 16항의 자연 살해 세포를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
18 18
제 17항에 있어서, 상기 암은 폐암, 간암, 위암, 대장암, 방광암, 전립선암, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 갑상선암, 흑색종 및 혈액암으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 암인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물
19 19
제 18항에 있어서, 상기 암은 폐암, 유방암 및 혈액암으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 암인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물
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1 US20120282646 US 미국 FAMILY
2 WO2011052883 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
3 WO2011052883 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
4 WO2011052883 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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2 WO2011052883 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
3 WO2011052883 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
4 WO2011052883 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 한국연구재단, 한국연구재단 교육과학기술부, 교육과학기술부 미래기반기술, 국제공동연구사업 신약타겟으로서 VDUP1의 기능 규명, 항암 면역치료 원천기술 개발