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티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법 및 이에 의해스크리닝된 변이체

  • 기술번호 : KST2015171457
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법 및 이에 의해 스크리닝된 변이체에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 티로신을 미세 결정의 형태를 갖도록 제조하고 이를 미생물 배지에 첨가하여 불투명 평판 배지를 만든 후, 미생물 생장에 따라서 콜로니 주변에 형성되는 투명환의 크기를 관찰함으로써 티로신 페놀리아제 효소 활성을 가지는 미생물을 선발하는 방법 및 상기 방법에 의해 선발된 티로신 페놀리아제의 돌연변이체에 대한 것이다. 본 발명의 티로신 페놀리아제의 고속 스크리닝 방법을 이용하게 되면, 대량 라이브러리로부터 효소 활성을 고속으로 탐색할 수 있게 되어, 티로신 페놀리아제를 합성하는 미생물을 스크리닝할 수 있으며, 또한, 티로신 페놀리아제의 효소 변이체 라이브러리에서 활성이 개선된 변이 효소를 분리하는데 유용하게 이용될 수 있어, 티로신 페놀리아제의 방향성 분자진화(directed molecular evolution) 연구 및 효소 개량에 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 티로신 페놀리아제 돌연변이체는 기존의 티로신 페놀리아제에 비해 활성이 월등히 뛰어나므로, 산업적으로 유용하다. 티로신 페놀리아제, 방향성 분자진화, 고속탐색, 미세결정, 티로신
Int. CL C12Q 1/34 (2006.01) C12N 9/14 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01)
CPC C12Q 1/527(2013.01) C12Q 1/527(2013.01)
출원번호/일자 1020050022892 (2005.03.18)
출원인 주식회사 바이오리더스, 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-0656546-0000 (2006.12.05)
공개번호/일자 10-2006-0101051 (2006.09.22) 문서열기
공고번호/일자 (20061211) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2005.03.18)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 주식회사 바이오리더스 대한민국 경기도 용인시 수지구
2 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이승구 대한민국 대전 유성구
2 송재준 대한민국 대전 서구
3 나유진 대한민국 대전 유성구 추목동 해군
4 최수림 대한민국 대전 유성구
5 홍승표 대한민국 대전광역시 유성구
6 최윤호 대한민국 대전 유성구
7 성문희 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 주식회사 바이오리더스 대한민국 대전광역시 유성구
2 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2005.03.18 수리 (Accepted) 1-1-2005-0144644-91
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2005.05.09 수리 (Accepted) 4-1-2005-0016474-59
3 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2006.04.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0224111-14
4 의견서
Written Opinion
2006.06.20 수리 (Accepted) 1-1-2006-0432315-42
5 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2006.06.20 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2006-0432290-99
6 등록결정서
Decision to grant
2006.09.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0532523-02
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2008.04.10 수리 (Accepted) 4-1-2008-5054980-73
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.04.07 수리 (Accepted) 4-1-2014-0054661-82
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.06.14 수리 (Accepted) 4-1-2018-5109988-51
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.07.06 수리 (Accepted) 4-1-2018-5129802-47
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
하기 단계를 포함하는 티로신 페놀리아제(TPL)의 고속 스크리닝 방법:(a) 티로신을 DMSO(dimethylsulfoxide) 및 산 함유 용액에 녹여 티로신 시약을 제조하는 단계; (b) 상기 티로신 시약을 미생물 배양 배지에 첨가하고 급속하게 냉각시켜서 미세 결정의 티로신 침전을 함유하는 불투명 평판 배지를 제조하는 단계; 및(c) 상기 평판 배지에 미생물 샘플을 도말한 다음, 미생물의 생장에 따라서 콜로니 주변에 형성되는 투명환의 크기를 관찰함으로써 TPL 활성을 가지는 미생물을 선발하는 단계
2 2
제1항에 있어서, (c) 단계의 미생물 샘플은 정상 TPL을 주형으로한, 변이 유발 PCR(error-prone PCR)법을 이용해 얻어진 효소 변이체 라이브러리로 형질전환된 대장균인 것을 특징으로 하는 티로신 페놀리아제(TPL)의 고속 스크리닝 방법
3 3
서열번호 3의 티로신 페놀리아제를 코딩하는 유전자에서 6번째 염기가 T(티민)에서 A(아데닌)으로 치환된 것을 특징으로 하는 TPL 변이체를 코딩하는 유전자
4 4
제3항의 TPL 변이체 유전자에 의해 코딩되는 폴리펩티드
5 5
서열번호 3의 티로신 페놀리아제를 코딩하는 유전자에서 277번째 염기와 983번째 염기가 A(아데닌)에서 G(구아닌)으로 치환된 것을 특징으로 하는 TPL 변이체를 코딩하는 유전자
6 6
제5항의 TPL 변이체 유전자에 의해 코딩되는 폴리펩티드
7 7
제3항 또는 제5항의 유전자를 함유하는 재조합 벡터
8 8
제7항의 재조합 벡터를 박테리아, 효모 및 곰팡이로 구성된 군에서 선택된 어느 하나의 숙주세포에 도입하여 수득되는 형질전환된 미생물
9 9
제8항에 있어서, 상기 숙주세포는 대장균인 것을 특징으로 하는 형질전환된 미생물
10 10
제9항의 미생물을 배양하는 것을 특징으로 하는 TPL의 제조방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.