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인테그린알파５를 이용한 항암제 또는 ＳＩＰ１／ＺＥＢ２ 저해제의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2015171559
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인테그린알파5(human integrin alpha5)의 프로모터와 SIP1/ZEB2(Smad-interacting protein-1/Zinc finger E-box binding homeobox 2) 사이의 상호 결합 저해제의 스크리닝 방법에 관한 것으로, 구체적으로, 암세포의 침윤과 관련된 것으로 각각 알려진 SIP1/ZEB2과 인테그린알파5 프로모터 사이의 직접적인 상호결합의 저해제를 항암제로 스크리닝하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 암세포에서 과발현되는 인테그린알파5(human integrin alpha5)의 발현을 감소시키는 항암제 또는 인테그린알파5의 프로모터에 결합하여 발현을 조절하는 SIP1/ZEB2(Smad-interacting protein-1/Zinc finger E-box binding homeobox 2) 저해제의 스크리닝 방법에 관한 것으로, 인테그린알파5의 발현을 측정함으로써 간편하게 항암제를 스크리닝할 수 있는 바, 의약분야에 유용하게 응용될 수 있다. SIP1/ZEB2, 인테그린알파5, 항암제, SIP1/ZEB2 저해제
Int. CL G01N 33/15 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01)
CPC C12N 15/113(2013.01) C12N 15/113(2013.01) C12N 15/113(2013.01) C12N 15/113(2013.01) C12N 15/113(2013.01) C12N 15/113(2013.01) C12N 15/113(2013.01)
출원번호/일자 1020090057666 (2009.06.26)
출원인 한국생명공학연구원
등록번호/일자 10-1099650-0000 (2011.12.21)
공개번호/일자 10-2010-0061296 (2010.06.07) 문서열기
공고번호/일자 (20111229) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020080119773   |   2008.11.28
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.06.26)
심사청구항수 20

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김세미 대한민국 대전광역시 유성구
2 강희영 대한민국 대전광역시 유성구
3 남은희 대한민국 강원도 홍천군
4 최명숙 대한민국 대전광역시 유성구
5 유진산 대한민국 대전광역시 유성구
6 박영규 대한민국 광주광역시 북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국생명공학연구원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2009.06.26 수리 (Accepted) 1-1-2009-0390067-53
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2011.04.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0215109-73
3 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2011.05.30 수리 (Accepted) 1-1-2011-0405147-18
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2011.05.30 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0405148-53
5 등록결정서
Decision to grant		 2011.12.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0751629-20
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.02.05 수리 (Accepted) 4-1-2015-0007152-08
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번호 청구항
1 1
1) SIP1/ZEB2(Smad-interacting protein-1/Zinc finger E-box binding homeobox 2)를 발현하는 세포주를 배양하면서 SIP1/ZEB2의 발현을 유도하는 단계; 2) 상기 배양된 세포주에 피검화합물을 처리하는 단계; 3) 상기 피검화합물이 처리된 세포주(실험군) 내의 인테그린알파5(human integrin alpha5)의 발현량을 측정하는 단계; 및, 4) 대조군(미처리군)에 비하여 상기 실험군에서 발현량을 감소시킨 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 항암제의 스크리닝 방법
2 2
1) SIP1/ZEB2를 발현하는 세포주를 배양하면서 SIP1/ZEB2의 발현을 유도하는 단계; 2) 상기 배양된 세포주에 피검화합물을 처리하는 단계; 3) 상기 피검화합물이 처리된 세포주(실험군) 내의 인테그린알파5의 발현량을 측정하는 단계; 및, 4) 상기 실험군에서 대조군(미처리군)에 비하여 발현량을 감소시킨 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 SIP1/ZEB2 저해제의 스크리닝 방법
3 3
제 1항 또는 2항에 있어서, 상기 세포주는 동물 세포인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
4 4
제 3항에 있어서, 상기 동물 세포는 SW480인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
5 5
제 1항 또는 2항에 있어서, 상기 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사산물 및 생활성 분자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
6 6
제 1항 또는 2항에 있어서, 상기 단계 3)의 발현량 측정은 전사체의 양을 측정하는 방법 또는 단백질의 양을 측정하는 방법으로 수행하는 것을 특징으로 하는 항암제의 스크리닝 방법
7 7
1) SIP1/ZEB2가 발현되는 세포주에 인테그린알파5 유전자의 프로모터 및 이에 작동가능하도록 연결된 리포터 유전자(reporter gene)를 포함하는 발현벡터를 형질감염하는 단계; 2) 단계 1)의 형질전환된 세포주에 피검화합물을 처리하는 단계; 및 3) 상기 세포주 내의 리포터 유전자의 발현량이 대조군에 비하여 감소한 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 항암제의 스크리닝 방법
8 8
제 7항에 있어서, 상기 인테그린알파5 유전자의 프로모터는 서열번호 29로 기재되는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
9 9
제 7항에 있어서, 상기 리포터 유전자는 클로람페니콜아세틸트랜스퍼라제(CAT) 유전자, 베타-글루쿠로니다제(GUS) 유전자, 루시퍼라제(luciferase) 유전자, 베타-갈락토시다제 유전자 및 형광 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
10 10
제 9항에 있어서, 상기 형광 단백질은 그린 형광 단백질(green fluorescent protein; GFP), 레드 형광 단백질(red fluorescent protein; RFP), 블루 형광 단백질(blue fluorescent protein; BFP), 옐로우 형광 단백질(yellow fluorescent protein; YFP), 시안 형광 단백질(CFP; cyan fluorescent protein) 및 강화된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein; EGFP)로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
11 11
제 7항에 있어서, 상기 리포터 유전자가 형광 단백질일 경우, 리포터 유전자의 발현량은 형광 현미경을 이용하여 측정하는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
12 12
제 7항에 있어서, 상기 단계 2)의 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사산물 및 생활성 분자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
13 13
제 7항에 있어서, 상기 세포주는 동물 세포인 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제 13항에 있어서, 상기 동물 세포는 SW480인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
15 15
1) SIP1/ZEB2 단백질 및 인테그린알파5 프로모터 DNA를 제작하는 단계; 2) 반응용기에서 상기 단계 1)에서 제작한 SIP1/ZEB2 단백질 및 인테그린알파5 프로모터 DNA를 결합시키는 단계; 3) 상기 결합체에 피검화합물을 처리하는 단계; 4) 상기 결합 여부를 측정하는 단계; 및, 5) 대조군(미처리군)과 비교하여 상기 결합을 억제한 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 항암제의 스크리닝 방법
16 16
제 15항에 있어서, 상기 인테그린알파5 유전자의 프로모터는 서열번호 29로 기재되는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
17 17
제 15항에 있어서, 상기 단계 3)의 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사산물 및 생활성 분자로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
18 18
제 15항에 있어서, SIP1/ZEB2 단백질과 인테그린알파5 프로모터 DNA와의 결합량은 칩 분석[Chromosomal Immunoprecipitation(CHIP) assay]; EMSA(Electrophoric Mobility Shift Assay); 겔 쉬프트 분석(Gel Shift assay); DNA 풋 프린팅(DNA foot-printing); DNA-풀다운 분석(DNA-full down assay); SPR(Surface Plasmon Resonance); 및, DNA 칩 또는 단백질 칩을 이용하여 방사선 동위원소 또는 형광물질로 확인하는 방법으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 스크리닝 방법
19 19
인테그린알파5에 특이적인 항체 또는 RGD(arginine-glycine-aspartate) 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 대장암 예방 또는 치료용 조성물
20 20
SIP1/ZEB2 특이적 siRNA(small interfering RNA)를 유효성분으로 함유하는 대장암 예방 또는 치료용 조성물
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1 US09562227 US 미국 FAMILY
2 US20120201838 US 미국 FAMILY
3 WO2010061997 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 US2012201838 US 미국 DOCDBFAMILY
2 US9562227 US 미국 DOCDBFAMILY
3 WO2010061997 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 보건복지가족부, 교육과학기술부, 교육과학기술부 한국생명공학연구원 보건의료기술진흥사업, 특정기초연구지원사업, 바이오융합연구개발사업 암전이 유전자 TMPRSS4의 신규결합표적 발굴 및 대장암치료에의 응용, 신규세린프로테아제 TMPRSS4에 의한 상피세포의 중간엽세포로의 이행유도 및 암 전이와 진행 조절연구, 간암치료용 인간항체 개발(세부과제)