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다음 단계를 포함하는 동물의 체세포로의 목적 유전자 도입용 재조합 배큘로바이러스 벡터의 제작방법:(a) 배큘로바이러스 벡터를 제한효소로 처리한 다음, 겔 정제키트로 정제하여 다각체 프로모터(polyhedrin promoter)가 제거된 배큘로바이러스 벡터를 수득하는 단계;(b) 목적 유전자를 진핵세포에 도입·발현시킬 수 있는 발현벡터로부터 진핵세포 발현 프로모터 및 유전자 발현 조절부위를 수득하는 단계;(c) 상기 (a)단계에서 수득된 다각체 프로모터가 제거된 배큘로바이러스 벡터에 (b)단계에서 수득된 진핵세포 발현 프로모터 및 유전자 발현 조절부위를 라이게이션하여 벡터를 제조하는 단계; 및(d) 상기 (c)단계에서 수득된 벡터에 목적 유전자를 도입하는 단계
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제1항에 있어서, 상기 배큘로바이러스 벡터는 pFastBac1인 것을 특징으로 하는 방법
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제2항에 있어서, 상기 배큘로바이러스 벡터를 제한효소 SnaBI 및 HpaI으로 처리하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 진핵생물 발현벡터는 pCDNA3인 것을 특징으로 하는 방법
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제4항에 있어서, 상기 진핵세포 발현벡터를 제한효소 NruI 및 Bst1107I으로 처리하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 (a)단계에서 다각체 프로모터가 제거된 배큘로바이러스 벡터는 Tn7 전위인자부위를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항의 방법에 의해 제작되고, 다각체 프로모터가 제거된 배큘로바이러스 벡터의 전위인자부위, 진핵세포 발현벡터의 진핵세포 발현 프로모터, 진핵세포의 유전자 발현 조절부위 및 목적 유전자를 함유하는 재조합 배큘로바이러스 벡터
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제7항의 재조합 배큘로바이러스 벡터로 형질전환된 미생물
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제8항에 있어서, 상기 미생물은 박테리아인 것을 특징으로 하는 미생물
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제9항에 있어서, 상기 박테리아는 E
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다음 단계를 포함하는 동물의 체세포에 목적 유전자를 도입하기 위한 재조합 배큘로바이러스 제조방법: (a) 제8항의 형질전환된 미생물로부터 Bacmid DNA를 작출하는 단계; (b) 상기 Bacmid DNA로 숙주세포를 형질감염시키는 단계; (c) 상기 형질감염된 숙주세포를 배양한 다음, 상기 배양물로부터 재조합 바이러스가 함유된 상층액을 분리하는 단계; (d) 상기 재조합 바이러스가 함유된 상층액으로 숙주세포를 다시 형질감염시키는 단계; (e) 상기 형질감염된 숙주세포를 배양한 다음, 상기 배양물로부터 재조합 바이러스가 함유된 상층액을 분리하는 단계; (f) 상기 (d)~(e)단계를 반복하는 단계; 및 (g) 상기 (f)단계에서 수득된 숙주세포를 파쇄한 다음, 재조합 바이러스를 분리·정제하는 단계
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제11항에 있어서, 상기 숙주세포는 곤충세포인 것을 특징으로 하는 방법
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제11항의 방법에 의해 제조된 재조합 배큘로바이러스
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다음 단계를 포함하는 동물의 체세포에 목적 유전자를 도입하는 방법: (a) 인간을 제외한 대상동물을 마취시켜 복강의 내피와 외피를 절개하여 정소를 외부로 노출시키는 단계; 및 (b) 상기 정소의 초막으로 제13항의 재조합 배큘로바이러스를 주입하는 단계
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다음 단계를 포함하는 동물의 체세포에 목적 유전자를 도입하는 방법: (a) 인간을 제외한 대상동물을 마취시켜 복강의 내피와 외피를 절개하여 정소를 외부로 노출시키는 단계; 및 (b) 상기 정소의 초막으로 제13항의 재조합 배큘로바이러스를 주입하는 단계
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