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(1) 세포; 및 단백질 성분을 함유하는 가수분해물을 함유한 배지로 구성된 보존액을 용기에 넣는 단계; 및 (2) 상기 용기를 저온에서, 회전 또는 반전하는 단계를 포함하는, 세포의 보존 방법
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제 1항에 있어서,
상기 세포는 동물 세포인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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제 1항에 있어서,
상기 세포는 동물의 장기나 조직에서 유래하는 1차 배양 세포 또는 확립된 세포주인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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제 1항에 있어서,
상기 가수분해물은 미생물, 동물 또는 식물 유래의 단백질 성분을 함유하는 가수분해물인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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5
제 1항에 있어서,
상기 가수분해물은 효모, 젤라틴, 카제인, 알부민, 락트알부민, 콜라겐, 목화, 완두콩, 벼, 대두, 밀 및 옥수수의 가수분해물 중에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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6
제 1항에 있어서,
상기 가수분해물의 농도는 0
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제 1항에 있어서,
상기 배지는 둘베코 변형 이글 배지 (Dulbecco's modified eagle medium, DMEM), 최소 필수 배지 (minimal essential medium, MEM), 알파-최소 필수 배지 (α-MEM), 맥코이스 (McCoys) 5A 배지, 이글스 기본 배지 (eagle's basal medium), CMRL (Connaught Medical Research Laboratory) 배지, 글래스고우 (Glasgow) 최소 필수 배지, 햄스 (Ham's) F-12 배지, IMDM (Iscove's modified Dulbecco's medium), 리보비츠 (Liebovitz') L-15 배지, RPMI (Roswell Park Memorial Institute) 1640 배지 및 이들의 혼합 배지로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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제 1항 또는 제 7항에 있어서,
상기 배지는 DMEM(Dulbecco modified Eagle medium)과 F-12(nutrient mixture)를 1:1(v/v)로 혼합한 배지인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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9 |
9
제 1항에 있어서,
상기 보존액은 항산화제, 삼투 조절제 및 에너지 공급원 중에서 선택된 하나 이상의 첨가물을 첨가한 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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10
제 9항에 있어서,
상기 항산화제는 알파 토코페롤(비타민 E), 알파 토코페롤 아세테이트, 아스코르브산, 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화 하이드록시아니돌, 부틸화 하이드록시퀴논, 부틸화 하이드록시톨루엔, 하이드록시시쿠마린, 에틸 갈레이트, 프로필 갈레이트, 옥틸 갈레이트, 라우릴 갈레이트, 프로필 하이드록시벤조에이트, 트리하이드록시부틸로페논, 디메틸페놀, 레시틴, 조효소 Q10, 에탄올아민 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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제 9항 또는 제 10항에 있어서,
상기 항산화제의 농도는 1 내지 1000 uM 인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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12
제 9항에 있어서,
상기 삼투 조절제는 덱스트란, 염화 나트륨, 포도당, 소르비톨, 자일리톨, 만니톨, 덱스트로스, 중탄산나트륨, 염화칼슘, 염화칼륨, 락트산나트륨 및 글라이세롤로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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13
제 9항 또는 제 12항에 있어서,
상기 삼투 조절제의 농도는 1 내지 500 mg/ml 인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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14
제 9항에 있어서,
상기 에너지 공급원은 아데노신-5-트리포스페이트(ATP), 글루코스, 말토스, 만노스, 갈락토스 및 프럭토스로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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15
제 9항 또는 제 14항에 있어서,
상기 에너지 공급원의 농도는 1 내지 100 mM 인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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16
제 1항에 있어서,
상기 보존액은, 0
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17
제 1항에 있어서,
상기 저온은 0 내지 25℃ 인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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18
제 1항에 있어서,
상기 회전 또는 반전은 1 내지 30 rpm 의 속도인 것을 특징으로 하는 세포의 보존 방법
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미생물, 동물 또는 식물 유래의 단백질 성분을 함유하는 가수분해물을 함유한 배지에 항산화제, 삼투 조절제 및 에너지 공급원 중에서 선택된 하나 이상의 첨가물을 첨가한 세포 보존 조성물
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20
제 19항에 있어서,
상기 가수분해물은 효모, 젤라틴, 카제인, 알부민, 락트알부민, 콜라겐, 목화, 완두콩, 벼, 대두, 밀 및 옥수수의 가수분해물 중 하나 이상인 것을 특징으로 하는 세포 보존 조성물
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제 19항에 있어서,
상기 배지는 둘베코 변형 이글 배지 (Dulbecco's modified eagle medium, DMEM), 최소 필수 배지 (minimal essential medium, MEM), 알파-최소 필수 배지 (α-MEM), 맥코이스 (McCoys) 5A 배지, 이글스 기본 배지 (eagle's basal medium), CMRL (Connaught Medical Research Laboratory) 배지, 글래스고우 (Glasgow) 최소 필수 배지, 햄스 (Ham's) F-12 배지, IMDM (Iscove's modified Dulbecco's medium), 리보비츠 (Liebovitz') L-15 배지, RPMI (Roswell Park Memorial Institute) 1640 배지 및 이들의 혼합 배지로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포 보존 조성물
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22
제 19항에 있어서,
상기 항산화제는 알파 토코페롤(비타민 E), 알파 토코페롤 아세테이트, 아스코르브산, 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화 하이드록시아니돌, 부틸화 하이드록시퀴논, 부틸화 하이드록시톨루엔, 하이드록시시쿠마린, 에틸 갈레이트, 프로필 갈레이트, 옥틸 갈레이트, 라우릴 갈레이트, 프로필 하이드록시벤조에이트, 트리하이드록시부틸로페논, 디메틸페놀, 레시틴, 조효소 Q10, 에탄올아민 및 이들의 배합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포 보존 조성물
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제 19항에 있어서,
상기 삼투 조절제는 덱스트란, 염화 나트륨, 포도당, 소르비톨, 자일리톨, 만니톨, 덱스트로스, 중탄산나트륨, 염화칼슘, 염화칼륨, 락트산나트륨 및 글라이세롤로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포 보존 조성물
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제 19항에 있어서,
상기 에너지원은 아데노신-5-트리포스페이트(ATP), 글루코스, 말토스, 만노스, 갈락토스 및 프럭토스로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포 보존 조성물
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제 19항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포 보존 조성물은, 0
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