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(1) 돼지의 정소를 수득하는 단계;(2) 상기 수득된 정소 조직에 콜라게나제, DNAse, 콩 트립신 억제제 및 히알루로니다제를 첨가하여 1차 처리한 후, 콜라게나제, DNAse 및 콩 트립신 억제제를 첨가하여 2차 처리하여 정소세포를 분리하는 단계;(3) 상기 분리된 정소세포를 상피세포증식인자(EGF, epidermal growth factor)가 함유된 Stempro 34 배지를 이용하여 젤라틴이 코팅된 배양접시에서 배양하되, 31℃ 및 5% CO2 조건에서 진행하는 것을 특징으로 하는 단계; 및(4) 상기 배양된 정소세포로부터 돼지 정원줄기세포를 확인 및 동정하는 단계;를 포함하는 상피세포증식인자(EGF, epidermal growth factor)가 함유된 배양액을 이용하여 돼지 정원줄기세포를 체외 배양하는 방법
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제 4항에 있어서,상기 (1)단계에서 돼지의 정소는 5일령 돼지로부터 수득된 정소인 것을 특징으로 하는 돼지 정원줄기세포를 체외 배양하는 방법
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제 4항에 있어서,상기 (2)단계에서 1차 처리 및 2차 처리는 각각 37 ℃에서 5 내지 10분간 진행하는 것을 특징으로 하는 돼지 정원줄기세포를 체외 배양하는 방법
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제 4항에 있어서,상기 (3)단계에서 배양액 조성은 상피세포증식인자와 함께 인슐린-트랜스페린-셀레늄 혼합물, 글루코즈, L-글루타민, NEAA(비필수 아미노산) 용액, 비타민 용액, 페니실린-스트렙토마이신 혼합물, 소디움 피루베이트, 비타민 C, 락틱 애씨드, 에스트라디올, 프로게스테론, 소 혈청 알부민, 녹아웃 혈청 대체물(knockout serum replacement), FGF(fibroblast growth factor), GDNF(glial cell line-derived neurotrophic factor) 및 LIF(leukemia inhibitory factor)를 포함하는 것을 특징으로 하는 돼지 정원줄기세포를 체외 배양하는 방법
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제 8항에 있어서,상기 배양액 조성은 25 μg/ml 인슐린-100 μg/ml 트랜스페린-30 nM 셀레늄 혼합물, 6 mg/ml 글루코즈, 2 mM L-글루타민, 1 % NEAA(비필수 아미노산) 용액, 1 % 비타민 용액, 100 U/ml 페니실린-스트렙토마이신 혼합물, 1 mM 소디움 피루베이트, 0
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제 4항에 있어서,상기 (4)단계에서 정원줄기세포 마커인 PGP9
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