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다음 단계를 포함하는 항암제의 제브라피시-기반된 스크리닝 방법: (a) 인간 암세포를 제브라피시(Danio rerio)의 난황낭에 주입하여 이식하는 단계; (b) 시험물질의 라이브러리(library)를 준비(preparing)하는 단계; (c) 상기 단계 (a)의 결과물과 상기 시험물질의 라이브러리를 접촉시키는 단계; (d) 상기 단계 (c)의 결과물을 30-33℃에서 배양하는 단계; 및 (e) 3-9 dpi (days per injection)에, 상기 인간 암세포가 파종(dissemination)된 제브라피시를 계수하는 단계; 상기 인간 암세포가 파종된 제브라피시의 수가 대조군을 기준으로 10% 이상 감소되면, 상기의 시험물질은 항암제로 판단된다
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)의 제브라피시는 1-3 dpf(day post fertilization) 제브라피시 배아인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 단계 (a)의 인간 암세포는 25-300개인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 암은 구강암 또는 결장암인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 시험물질은 투여량 의존적으로 상기 인간 암세포가 파종된 제브라피시의 수를 감소시키는 것을 특징으로 하는 방법
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제 1 항에 있어서, 상기 시험물질의 라이브러리는 다음 화학식 Ⅰ로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 방법:화학식 I 상기 화학식에서, R1은 H 또는 C1-C5 직쇄 또는 가지쇄의 알킬이고; R2는 -[(CH2)m-O]n-(CH2)p-NHCOPh(상기 m, n 및 p는 각각 1-5의 정수이다)이며; R3, R4, R5 및 R6는 각각 독립적으로, H, C1-C10 직쇄 또는 가지쇄의 알킬, C3-C15 사이클로알킬, C4-C20 사이클로알킬알킬, C7-C16 아랄킬(aralkyl), C7-C16 알카릴(alkaryl), -PhCONH-(CH2)q-[(CH2)r-O]s-N3(상기 q, r 및 s는 각각 1-5의 정수이다)이고; 상기 사이클로알킬 및 사이클로알킬알킬의 고리 탄소는 C1-C5 직쇄 또는 가지쇄의 알킬에 의해 치환될 수 있고; 상기 아랄킬의 아릴기는 C1-C5 알킬, C1-C5 알콕시, C1-C5 알킬렌디옥시 또는 할로겐으로 치환될 수 있다
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제 1 항에 있어서, 상기 (a) 내지 (e) 단계의 스크리닝 방법을 제1차 스크리닝 방법으로 수행하여 상기 시험물질의 라이브러리에서 제1차 항암제 후보군을 선별한 후, 상기 선별된 제1차 항암제 후보군을 시험물질의 라이브러리로 이용하여 상기 (a) 내지 (e) 단계의 스크리닝 방법을 제2차 스크리닝 방법으로 수행하여 최종적으로 항암제를 결정하는 방법
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제 7 항에 있어서, 상기 제1차 스크리닝 방법에서 이용되는 시험물질의 라이브러리의 시험물질은 제2차 스크리닝 방법에서 이용되는 시험물질의 라이브러리의 시험물질보다 상대적으로 높은 농도를 갖는 것을 특징으로 하는 방법
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제 8 항에 있어서, 상기 제1차 스크리닝 방법에서 이용되는 시험물질의 라이브러리의 시험물질의 농도는 10 μM 초과 내지 50 μM 이하이고, 제2차 스크리닝 방법에서 이용되는 시험물질의 라이브러리의 시험물질의 농도는 0 μM 초과 내지 10 μM 이하인 것을 특징으로 하는 방법
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