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백혈병 줄기세포의 분리 및 배양 방법

  • 기술번호 : KST2015177037
  • 담당센터 : 광주기술혁신센터
  • 전화번호 : 062-360-4654
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 단일세포 수준으로의 백혈병 줄기세포의 분리 방법 및 상기 분리된 단일세포 수준의 백혈병 줄기세포의 배양 방법에 관한 것이다. 본 발명은 면역세포 표지자 소견을 바탕으로 단일 백혈병 줄기세포를 분리하고, 상기 단일 백혈병 줄기세포를 특정 배지에 배양하여 단일 백혈병 줄기세포 클론을 확보하였다. 또한, 단일 세포 수준으로 분리된 백혈병 줄기세포 및 배양된 백혈병 줄기세포를 이용하여 백혈병 줄기세포를 타깃으로 하는 신약 개발 및 면역 분자적 표지자 개발에 이용할 수 있다.
Int. CL C12N 5/095 (2010.01) C12N 5/02 (2006.01)
CPC C12N 5/0645(2013.01) C12N 5/0645(2013.01) C12N 5/0645(2013.01) C12N 5/0645(2013.01)
출원번호/일자 1020120119507 (2012.10.26)
출원인 전남대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2014-0056474 (2014.05.12) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.10.26)
심사청구항수 5

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 전남대학교산학협력단 대한민국 광주광역시 북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 신명근 대한민국 전라남도 화순군
2 김혜란 대한민국 전라남도 화순근 화순읍 일심리 **

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 남충우 대한민국 서울 강남구 언주로 ***, *층(역삼동, 광진빌딩)(알렉스국제특허법률사무소)
2 노철호 대한민국 경기도 성남시 분당구 판교역로 ***, 에스동 ***호(삼평동,에이치스퀘어)(특허법인도담)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.10.26 수리 (Accepted) 1-1-2012-0874863-92
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2013.08.14 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2013.10.10 수리 (Accepted) 9-1-2013-0086099-97
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.01.02 수리 (Accepted) 4-1-2014-0000058-61
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2014.05.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0368392-24
6 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2014.08.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0551475-64
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.06.08 수리 (Accepted) 4-1-2015-5076218-57
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2016.07.07 수리 (Accepted) 4-1-2016-5093177-51
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2018.03.30 수리 (Accepted) 4-1-2018-5056463-72
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 백혈병 줄기세포의 분리 방법:(a) 백혈병 환자로부터 말초 혈액 및 골수 검체를 수집하는 단계;(b) 상기 단계 (a)의 검체를 밀도구배 원심분리하여 단핵세포(mononuclear cell)를 분리하고 세척하여 단핵세포를 수득하는 단계;(c) 상기 단계 (b)의 단핵세포에 CD34 및 CD38을 표지하며, 이소타입 대조군(isotype control)으로 Ig(immuno globulin)G1-PE(phycoerythrin) 및 IgG1-FITC(fluorescein isothiocyanate)를 준비하는 단계;(d) 상기 단계 (c)의 결과물을 상온 암소에서 10-30분 동안 반응시킨 다음 세포 용해 버퍼(cell lysis buffer)를 1-3 ml 첨가하고 암소에서 5-25분 동안 반응시키며, 상층액을 제거한 다음 세포 부유액을 준비하는 단계; 및(e) 상기 단계 (d)의 세포 부유액을 유세포 분석기가 부착된 단일 세포 분리기(single cell sorter)를 이용하여 96웰 플레이트의 각 웰에 한 개씩의 CD34+/CD38- 세포(백혈병 줄기세포)와 CD34+/CD38+ 세포(백혈병 세포)를 안치시키는 단계
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (b)의 단핵세포는 세포수가 3x106/ml-7x106/ml인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
다음의 단계를 포함하는 백혈병 줄기세포의 배양 방법:(ⅰ) 상기 제 1 항 또는 제 2 항의 방법에 의해 96웰 플레이트의 각 웰에 한 개씩 안치시킨 CD34+/CD38- 세포(백혈병 줄기세포)와 CD34+/CD38+ 세포(백혈병 세포)를 준비하는 단계; 및 (ⅱ) 상기 단계 (a)의 결과물인 CD34+/CD38- 세포 및 CD34+/CD38+ 세포를 혈청-함유 배지, SCF(stem cell factor), Flt-1, 트롬보포이에틴(thrombopoietin) 및 G-CSF를 포함하는 액체 배지를 이용하여 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 4-6일 동안 배양하는 단계
4 4
제 3 항에 있어서, 상기 단계 (ⅱ)의 혈청-함유 배지는 상기 액체 배지의 총 중량에 대하여 5-15% 포함되는 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 3 항에 있어서, 상기 단계 (ⅱ)의 액체 배지는 전체 액체 배지에서 SCF(stem cell factor)가 10-200 ng/ml, Flt-1이 10-200 ng/ml, 트롬보포이에틴(thrombopoietin)이 10-200 ng/ml 및 G-CSF가 10-100 ng/ml의 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 화순전남대학교병원 해외우수연구기관 유치사업 화순전남대학교병원-프라운호퍼 공동연구소