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양파의 임성회복 관련 분자 마커 및 웅성-가임 또는 웅성-불임의 선별방법

  • 기술번호 : KST2015177075
  • 담당센터 : 광주기술혁신센터
  • 전화번호 : 062-360-4654
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 양파의 임성회복 관련 분자 마커 및 웅성-가임 또는 웅성-불임의 선별방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 서열목록 제1서열 내지 제5서열의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 웅성-가임(Male-fertility) 선별용 핵산분자, 및 (a) 양파의 gDNA(genomic DNA)을 수득하는 단계; 및 (b) 상기 gDNA 중 서열목록 제1서열 내지 서역목록 제5서열 중 어느 하나의 뉴클레오타이드 서열을 분석하는 단계를 포함하는 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임 판별방법을 제공한다. 본 발명은 양파의 웅성-가임 또는 웅성-불임과 관련된 다형성(polymorphism)을 짧은 시간에 판별할 수 있어 양파의 F1 잡종품종개발을 위한 웅성-불임 양파의 대량생산이 가능하며, 양파의 웅성-가임 또는 웅성-불임에 특이적인 분자 표지를 통하여 정확한 유전형질 분석이 가능하다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01) C12N 15/11(2013.01)
출원번호/일자 1020120138123 (2012.11.30)
출원인 전남대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1471029-0000 (2014.12.03)
공개번호/일자 10-2014-0070073 (2014.06.10) 문서열기
공고번호/일자 (20141209) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.11.30)
심사청구항수 18

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 전남대학교산학협력단 대한민국 광주광역시 북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김성길 대한민국 광주 북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 양부현 대한민국 서울특별시 송파구 오금로 **, 태원빌딩 **층, 특허팀(주식회사씨젠)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 전남대학교산학협력단 광주광역시 북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.11.30 수리 (Accepted) 1-1-2012-0996209-80
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2013.10.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2013.11.12 수리 (Accepted) 9-1-2013-0091808-80
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.01.02 수리 (Accepted) 4-1-2014-0000058-61
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2014.04.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0248867-28
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2014.06.09 수리 (Accepted) 1-1-2014-0536968-17
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2014.07.09 수리 (Accepted) 1-1-2014-0645051-00
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2014.07.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2014-0645052-45
9 등록결정서
Decision to grant		 2014.11.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0816799-34
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.06.08 수리 (Accepted) 4-1-2015-5076218-57
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2016.07.07 수리 (Accepted) 4-1-2016-5093177-51
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2018.03.30 수리 (Accepted) 4-1-2018-5056463-72
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열목록 제1서열의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 양파 웅성-가임(Male-fertility) 선별용 핵산분자
2 2
서열목록 제2서열의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 양파 웅성-가임(Male-fertility) 선별용 핵산분자
3 3
서열목록 제3서열의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 양파 웅성-가임(Male-fertility) 선별용 핵산분자
4 4
서열목록 제4서열의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 양파 웅성-가임(Male-fertility) 선별용 핵산분자
5 5
서열목록 제5서열의 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 양파 웅성-가임(Male-fertility) 선별용 핵산분자
6 6
다음의 단계를 포함하는 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임 판별방법:(a) 양파의 gDNA(genomic DNA)을 수득하는 단계; 및(b) 상기 gDNA 중 서열목록 제1서열 내지 서역목록 제5서열 중 어느 하나의 뉴클레오타이드 서열을 분석하는 단계;상기 서열목록 제1서열의 뉴클레오타이드 서열을 분석하는 경우, 서열목록 제6서열 및 제7서열의 프라이머 세트를 이용하여 PCR을 실시하고, PCR 산물에 DraⅠ을 처리하여 분해된 패턴을 분석하여 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임을 판별한다, (1-ⅰ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 888 bp(base pair)인 제1분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단하고, (1-ⅱ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 519 bp인 제2분해물 및 크기가 378 bp인 제3분해물이 존재하는 경우에는 웅성-불임으로 판단하며, (1-ⅲ) 상기 PCR 산물의 절단 후 상기 제1분해물, 상기 제2분해물 및 상기 제3분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단한다;상기 서열목록 제2서열의 뉴클레오타이드 서열을 분석하는 경우, 서열목록 제8서열 및 서열목록 제9서열의 프라이머 세트를 이용하여 PCR을 실시하고, PCR 산물에 TaqⅠ을 처리하여 분해된 패턴을 분석하여 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임을 판별한다, (2-ⅰ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 425 bp인 제4분해물 및 크기가 150 bp인 제5분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단하고, (2-ⅱ) 상기 PCR 산물의 절단 후 상기 제4분해물 및 크기가 341 bp인 제6분해물이 존재하는 경우에는 웅성-불임으로 판단하며, (2-ⅲ) 상기 PCR 산물의 절단 후 상기 제4분해물, 상기 제5분해물 및 상기 제6분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단한다;상기 서열목록 제3서열의 뉴클레오타이드 서열을 분석하는 경우, 서열목록 제10서열 및 서열목록 제11서열의 프라이머 세트를 이용하여 PCR을 실시하고, PCR 산물에 PvuⅡ을 처리하여 분해된 패턴을 분석하여 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임을 판별한다: (3-ⅰ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 251 bp인 제7분해물 및 크기가 117 bp인 제8분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단하고, (3-ⅱ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 368 bp인 제9분해물이 존재하는 경우에는 웅성-불임으로 판단하며, (3-ⅲ) 상기 PCR 산물의 절단 후 상기 제7분해물, 상기 제8분해물 및 상기 제9분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단한다;상기 서열목록 제4서열의 뉴클레오타이드 서열을 분석하는 경우, 서열목록 제12서열 및 서열목록 제13서열의 프라이머 세트를 이용하여 PCR을 실시하고, PCR 산물에 XhoⅠ을 처리하여 분해된 패턴을 분석하여 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임을 판별한다, (4-ⅰ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 575 bp인 제10분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단하고, (4-ⅱ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 427 bp인 제11분해물 및 크기가 148 bp인 제12분해물이 존재하는 경우에는 웅성-불임으로 판단하며, (4-ⅲ) 상기 PCR 산물의 절단 후 상기 제10분해물, 상기 제11분해물 및 상기 제12분해물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단한다;상기 서열목록 제5서열의 뉴클레오타이드 서열을 분석하는 경우, 서열목록 제14서열 및 서열목록 제15서열의 프라이머 세트를 이용하여 PCR을 실시하고, PCR 산물을 전기영동을 통해 밴드 패턴을 분석하여 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임을 판별한다, (5-ⅰ) 상기 PCR 산물의 절단 후 크기가 915 bp인 제13산물이 존재하는 경우에는 웅성-가임으로 판단하고, (5-ⅱ) 상기 제13산물이 존재하지 않는 경우에는 웅성-불임으로 판단한다
7 7
제 6 항에 있어서, 상기 단계 (b)의 분석은 CAPS(Cleaved Amplified Polymorphic Sequence), PCR(Polymerase Chain Reaction), RAPD(Randomly Amplified Polymorphic DNA), AFLP(Amplified fragment length polymorphism), RFLP(Restriction Fragment Lennth Polymorphism), DAF(DNA Amplification Fingerprinting), AP-PCR(Arbitrarily primed PCR), PCR-SSCP(Single-strand Conformation Polymorphism), RT-PCR(Reverse transcriptase PCR), ISSR(Inter-simple Sequence Repeat Amplication), STS(Sequence Tagged Site), EST(Expressed sequence tag), SCAR(Sequence Characterized Amplified Regions), DNA 시퀀싱, 마이크로어레이(Microarray)에 의한 혼성화, 노던 블럿(Northern Blot) 또는 서던 블럿(Southern blot)인 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제 7 항에 있어서, 상기 단계 (b)의 분석은 CAPS 또는 PCR인 것을 특징으로 하는 방법
9 9
삭제
10 10
삭제
11 11
(a) 서열목록 제1서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제1서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 정방향 프라이머; (b) 서열목록 제1서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제1서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 역방향 프라이머; 및 (c) 제한효소 DraⅠ을 포함하는 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임 판별용 키트
12 12
제 11 항에 있어서, 상기 정？？향 프라이머는 서열목록 제6서열이고, 상기 역방향 프라이머는 서열목록 제7서열인 것을 특징으로 하는 키트
13 13
(a) 서열목록 제2서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제2서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 정방향 프라이머; (b) 서열목록 제2서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제2서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 역방향 프라이머; 및 (c) 제한효소 TaqⅠ을 포함하는 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임 판별용 키트
14 14
제 13 항에 있어서, 상기 정？？향 프라이머는 서열목록 제8서열이고, 상기 역방향 프라이머는 서열목록 제9서열인 것을 특징으로 하는 키트
15 15
(a) 서열목록 제3서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제3서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 정방향 프라이머; (b) 서열목록 제3서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제3서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 역방향 프라이머; 및 (c) 제한효소 PvuⅡ을 포함하는 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임 판별용 키트
16 16
제 15 항에 있어서, 상기 정？？향 프라이머는 서열목록 제10서열이고, 상기 역방향 프라이머는 서열목록 제11서열인 것을 특징으로 하는 키트
17 17
(a) 서열목록 제4서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제4서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 정방향 프라이머; (b) 서열목록 제4서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제4서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 역방향 프라이머; 및 (c) 제한효소 XhoⅠ을 포함하는 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임 판별용 키트
18 18
제 17 항에 있어서, 상기 정？？향 프라이머는 서열목록 제12서열이고, 상기 역방향 프라이머는 서열목록 제13서열인 것을 특징으로 하는 키트
19 19
(a) 서열목록 제5서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제5서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 정방향 프라이머; 및 (b) 서열목록 제5서열의 뉴클레오타이드 서열 또는 서열목록 제5서열의 상보적인 서열에 혼성화되는 역방향 프라이머를 포함하는 양파의 웅성-불임 또는 웅성-가임 판별용 키트
20 20
제 19 항에 있어서, 상기 정？？향 프라이머는 서열목록 제14서열이고, 상기 역방향 프라이머는 서열목록 제15서열인 것을 특징으로 하는 키트
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