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ⅰ) 소 베타-카제인 게놈 DNA의 프로모터, 엑손 1, 2 및 3 일부를 포함하는, 서열번호 3으로 기재되는 핵산서열로 구성되는 5' 아암(arm); ⅱ) 서열번호 7로 기재되는 핵산서열로 구성되는 F2A 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오티드, 외래 단백질을 암호화하는 유전자, 및 항생제 내성 유전자를 순차적으로 포함하는 컨스트럭트; 및 ⅲ) 소 베타-카제인 게놈 DNA의 엑손 4, 5 및 6을 포함하는, 서열번호 5로 기재되는 핵산서열로 구성되는 3' 아암으로 순차적으로 구성된 유전자 컨스트럭트를 포함하는, 외래 단백질 생산용 넉-인(knock in) 벡터
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제1항에 있어서,상기 외래 단백질은 치료용 단백질인, 외래 단백질 생산용 넉-인 벡터
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제4항에 있어서,상기 치료용 단백질은 인간 섬유아세포 성장인자인, 외래 단백질 생산용 넉-인 벡터
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제1항에 있어서,상기 외래 단백질을 암호화하는 유전자의 3' 말단에 BGH(bovine growth hormone) polyA 신호가 추가로 연결된, 외래 단백질 생산용 넉-인 벡터
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제6항에 있어서,상기 BGH polyA 신호는 서열번호 6으로 기재되는 핵산서열로 구성되는 폴리뉴클레오티드인, 외래 단백질 생산용 넉-인 벡터
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제1항에 있어서,상기 항생제 내성 유전자는 neo 유전자, puromycin 저항성 유전자 또는 Zeocin 저항성 유전자인, 외래 단백질 생산용 넉-인 벡터
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제1항의 넉-인 벡터로 형질전환시킨 세포 중 상기 벡터에 포함된 항생제 내성 유전자에 의해 합성되는 항생제 내성 단백질에 의해 상기 항생제에 의해 내성을 갖는 클론들을 선별하여 상기 클론들로부터 게놈 DNA를 추출하는 단계;상기 게놈 DNA를 항생제 내성 유전자에 특이적으로 결합하는 포워드 프라이머 및 3' 아암의 3' 방향 하류의 소 게놈 DNA에 특이적으로 결합하는 리버스 프라이머로 PCR에 의해 증폭하는 단계; 및상기 증폭된 PCR 산물의 유무 및 크기를 판별하여, 상기 벡터가 소 베타-카제인 게놈 DNA에 제위치로 삽입됨으로써 소 베타-카제인 발현이 넉아웃되고, 외래 단백질이 발현되는 소 베타-카제인 게놈으로의 외래 단백질 유전자가 넉-인된 형질전환체를 선별하기 위한 넉-인 형질전환체 선별 방법
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서열번호 1로 기재되는 핵산서열로 구성되는 포워드 프라이머 및 서열번호 2로 기재되는 핵산서열로 구성되는 리버스 프라이머를 포함하는 제1항의 외래 단백질 생산용 넉-인(knock in) 벡터로 형질전환되고 상기 소 베타-카제인의 엑손 3에 상기 넉-인 벡터가 정확하게 넉-인되어 상기 소 베타-카제인의 발현이 넉아웃되고, 외래 단백질이 발현되는 소 베타-카제인 게놈으로의 상기 외래 단백질을 암호호하는 유전자가 넉-인된 형질전환체 선별용 키트
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제11항의 선별 방법에 의해 선별된 소 베타-카제인 게놈으로의 외래 단백질을 암호화하는 유전자가 넉-인된 형질전환 소 세포주
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소의 난자의 핵을 제13항의 형질전환 소 세포주의 핵으로 치환시켜 제조된 핵치환 난세포를 발생시켜 태어난 외래 단백질을 우유로 분비하는 형질전환 복제소
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