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비-형광성 형광 단백질을 이용한 유전독성 분석방법

  • 기술번호 : KST2015177610
  • 담당센터 : 광주기술혁신센터
  • 전화번호 : 062-360-4654
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 (a) 변이(mutation)가 있는 비-형광성 형광 단백질을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열로 어류를 형질전환 시키는 단계; (b) 상기 형질전환된 어류에 시험물질을 처리하는 단계; 및 (c) 상기 시험물질이 처리된 어류 내 상기 도입된 뉴클레오타이드 서열에서 복귀변이(back mutation)가 발생되어 상기 비-형광성 형광 단백질이 형광성 단백질로 변이되어 발생되는 형광을 측정하는 단계를 포함하는 시험물질의 유전독성 분석방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 본 발명의 형광 단백질 변이체, 바람직하게는 야생형 EGFP 변이체가 형질전환된 제브라피쉬(Brachydanio rerio) 라인인 MutaFish 시스템은 시험물질 처리에 의해 형광 단백질 변이체의 복귀(reversion)가 유발된 형광 치어를 생산하여 시험물질의 유전독성을 측정할 수 있는 매우 우수한 동물 시스템을 제공한다. 따라서, 본 발명의 MutaFish 시스템은 종래기술(예컨대, 에임스 테스트)의 한계점이었던 진핵생물에서 시험물질의 유전독성을 매우 간단하고 신속하게 분석할 수 있다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01)
CPC G01N 33/5014(2013.01)G01N 33/5014(2013.01)G01N 33/5014(2013.01)G01N 33/5014(2013.01)G01N 33/5014(2013.01)G01N 33/5014(2013.01)G01N 33/5014(2013.01)
출원번호/일자 1020100029482 (2010.03.31)
출원인 전남대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2011-0109666 (2011.10.06) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호 1020170123772;
심사청구여부/일자 Y (2015.03.12)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 전남대학교산학협력단 대한민국 광주광역시 북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 최현일 대한민국 서울특별시 강남구
2 최석용 대한민국 광주광역시 서구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 윤대웅 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****(봉천동), ***호(제니스특허법률사무소)
2 공병욱 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****(봉천동), ***호(제니스특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 전남대학교 산학협력단 광주광역시 북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2010.03.31 수리 (Accepted) 1-1-2010-0206742-62
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2012.07.23 수리 (Accepted) 4-1-2012-5157698-67
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.01.02 수리 (Accepted) 4-1-2014-0000058-61
4 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)		 2015.03.12 수리 (Accepted) 1-1-2015-0241436-44
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.06.08 수리 (Accepted) 4-1-2015-5076218-57
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2016.07.07 수리 (Accepted) 4-1-2016-5093177-51
7 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2016.09.05 수리 (Accepted) 1-1-2016-0865986-36
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2016.09.13 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0659726-08
9 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2016.11.14 수리 (Accepted) 1-1-2016-1109648-11
10 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2016.12.13 수리 (Accepted) 1-1-2016-1221899-69
11 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2017.01.13 수리 (Accepted) 1-1-2017-0045042-96
12 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2017.02.13 수리 (Accepted) 1-1-2017-0147839-26
13 지정기간연장 관련 안내서
Notification for Extension of Designated Period		 2017.02.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2017-0022167-04
14 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2017.03.13 수리 (Accepted) 1-1-2017-0249326-86
15 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2017.03.13 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0249327-21
16 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2017.07.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0519405-42
17 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2017.09.25 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-0936211-60
18 [분할출원]특허출원서
[Divisional Application] Patent Application		 2017.09.25 수리 (Accepted) 1-1-2017-0936159-83
19 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2017.09.25 수리 (Accepted) 1-1-2017-0936210-14
20 등록결정서
Decision to grant		 2017.10.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0712831-17
21 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2018.03.30 수리 (Accepted) 4-1-2018-5056463-72
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 시험물질의 유전독성 분석방법:(a) 변이(mutation)가 있는 비-형광성 형광 단백질을 코딩하는 뉴클레오타이드 서열로 어류를 형질전환 시키는 단계;(b) 상기 형질전환된 어류에 시험물질을 처리하는 단계; 및 (c) 상기 시험물질이 처리된 어류 내 상기 도입된 뉴클레오타이드 서열에서 복귀변이(back mutation)가 발생되어 상기 비-형광성 형광 단백질이 형광성 단백질로 변이되어 발생되는 형광을 측정하는 단계
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 형광성 단백질은 GFP(green fluorescent protein), RFP(red fluorescent protein), CFP(cyan fluorescent protein), YFP(yellow fluorescent protein), BFP(blue fluorescent protein), EGFP(enhanced green fluorescent protein), ECFP(enhanced cyan fluorescent protein), EYFP(enhanced yellow fluorescent protein), ERFP(enhanced red fluorescent protein), mCherry, mTomato 또는 EBFP(enhanced blue fluorescent protein)인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제 2 항에 있어서, 상기 형광성 단백질은 EGFP인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 변이가 있는 비-형광성 형광 단백질은 야생형(wild type) 형광 단백질의 뉴클레오타이드 서열 수준에서 (i) 프레임 시프트 변이 또는 (ii) 미스센스 변이(missense mutation)를 유발하는 치환 변이(substitution mutation)에 의해 변이된 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 4 항에 있어서, 상기 복귀변이는 프레임 시프트 변이가 있는 비-형광성 형광 단백질을 형광성 단백질로 변이시키는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제 4 항에 있어서, 상기 복귀변이는 치환 변이가 있는 비-형광성 형광 단백질을 형광성 단백질로 변이시키는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제 1 항에 있어서, 상기 어류는 제브라피쉬(zebrafish)인 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제 1 항에 있어서, 상기 시험물질이 처리되는 형질전환된 어류는 배아(embryo)인 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제 8 항에 있어서, 상기 방법은 단계 (b) 이후 시험물질이 처리된 형질전환 어류의 배아를 배양하여 부화시켜 치어 라바(fry larvae)를 얻는 단계를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제 1 항에 있어서, 상기 단계 (c)는 시험물질이 처리된 어류에 대하여 유세포분석(flow cytometry)으로 실시하는 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제 9 항에 있어서, 상기 단계 (c)는 시험물질이 처리된 배아를 배양하여 부화하여 얻은 치어 라바(fry larvae)에 대하여 유세포분석(flow cytometry)으로 실시하는 것을 특징으로 하는 방법
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP02574925 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
2 EP02574925 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 JP05634531 JP 일본 FAMILY
4 JP25521491 JP 일본 FAMILY
5 KR101893702 KR 대한민국 FAMILY
6 US08729334 US 미국 FAMILY
7 US20130024955 US 미국 FAMILY
8 WO2011122864 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
9 WO2011122864 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP2574925 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
2 EP2574925 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
3 EP2574925 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
4 JP2013521491 JP 일본 DOCDBFAMILY
5 JP5634531 JP 일본 DOCDBFAMILY
6 US2013024955 US 미국 DOCDBFAMILY
7 US8729334 US 미국 DOCDBFAMILY
8 WO2011122864 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
9 WO2011122864 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 전남대학교 기초연구사업-개인연구지원사업-신진연구 Zebrafish를 이용한 종양유발 물질 검출 방법