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SETDB1 HMTase 발현 저해방법

  • 기술번호 : KST2015178108
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 TALEN은 특정 유전자를 표적하여 녹아웃시킬 수 있는 새로운 개념의 유전자 클로닝이다. TALEN 플라스미드에는 DNA 결합 도메인과 Fok1 절단효소 기능이 융합되어 있기 때문에, 게놈 DNA의 어느 부위라도 결합할 수 있고, 표적 염기서열을 절단하여 유전자 돌연변이를 유도할 수 있다. 본 발명자들은 SETDB1 HMTase 유전자의 단백질 개시코돈과 프로모터 -25 상류 부위를 표적하는 2종의 TALEN 구조물을 제작하였다. 이를 위하여 두 단계의 클로닝을 진행하였다. 첫 번째는 모듈벡터에서 pFUS 배열 벡터로 표적서열을 옮기고, 콜로니 PCR을 통해 얼룩진 밴드와 Esp1 제한 효소를 이용하여 약 1kb의 삽입물이 들어 있음을 확인하였다. 두 번째는 배열 벡터로부터 TALEN 발현벡터로 옮기는 과정을 진행하였으며, 염기서열분석을 통해 확인하였다. 그 결과, 최초의 고안된 모듈벡터 서열들이 약 100 bp 간격으로 배열되어 있음을 확인하였다. 제작된 TALEN-DBEX2 구조물은 트랜스펙션을 통해 SETDB1의 발현이 사라지는 것을 확인하였고, T7E1 분석을 통하여 표적부위에서 돌연변이가 발생하였음을 확인하였다. 한편, TALEN-DBPR25 트랜스펙션을 통해서도 SETDB1 발현이 감소하는 현상을 확인할 수 있었다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01)
CPC C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01) C12N 15/63(2013.01)
출원번호/일자 1020140124197 (2014.09.18)
출원인 강원대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1528812-0000 (2015.06.09)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20150615) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.09.18)
심사청구항수 1

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 강원대학교산학협력단 대한민국 강원도 춘천시

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 노희정 대한민국 경기도 남양주시 별내*로 **,
2 강윤성 대한민국 충청북도 청주시 흥덕구
3 김인수 대한민국 서울특별시 용산구
4 김근철 대한민국 강원도 춘천시 춘천순환로

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 강성혜 대한민국 대전 유성구 지족로***번길 **, ***-*호 (지족동, 성훈프라자)(아이앤아이특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 강원대학교산학협력단 대한민국 강원도 춘천시
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2014.09.18 수리 (Accepted) 1-1-2014-0884908-17
2 [우선심사신청]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Preferential Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)		 2014.10.23 수리 (Accepted) 1-1-2014-1013474-21
3 [우선심사신청]선행기술조사의뢰서
[Request for Preferential Examination] Request for Prior Art Search		 2014.10.25 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 [우선심사신청]선행기술조사보고서
[Request for Preferential Examination] Report of Prior Art Search		 2014.11.03 수리 (Accepted) 9-1-2014-0085542-89
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2015.02.03 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0081943-18
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2015.04.03 수리 (Accepted) 1-1-2015-0328896-95
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2015.04.03 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-0328875-36
8 등록결정서
Decision to grant		 2015.05.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0350838-65
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.11.05 수리 (Accepted) 4-1-2019-5230938-29
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번호 청구항
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TALEN(Transcription Activator-Like Effector Nucleases) 녹아웃으로 HMTase(Histone-lysine N-methyltransferase)를 코딩하는 인간 SETDB1(SET domain, bifurcated 1) 발현을 저해하는 방법에 있어서,a) SETDB1 유전자 중 발현 저해 표적으로서 SETDB1의 엑손 2 내에 존재하는 단백질 개시코돈 및 SETDB1 mRNA 합성을 위한 전사 개시부위의 -25 상류 부위 중 한 부위를 선택하는 단계;b) SETDB1 유전자의 엑손 2 내의 단백질 개시코돈을 표적하는 표적서열로서 서열번호 1 및 서열번호 2 또는 SETDB1 mRNA 합성을 위한 전사 개시부위의 -25 상류 부위를 표적하는 표적서열로서 서열번호 3 및 서열번호 4를 모듈벡터에서 pFUS 배열 벡터로 옮기는 단계;c) 상기 b) 단계를 거친 배열 벡터로부터 TALEN 발현벡터로 상기 표적서열을 옮겨 TALEN-DBEX2 구조물 및 TALEN-DBPR25 구조물을 각각 제조하는 단계; 및d) 상기 c) 단계를 거쳐 제작된 TALEN-DBEX2 구조물 및 TALEN-DBPR25 구조물 중 선택된 하나의 구조물로 세포를 트랜스펙션시키는 단계;를 포함하는 TALEN 녹아웃으로 SETDB1 발현을 저해하는 방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육부 강원대학교 산학협력단 강원대학교 Linc 육성사업 산학공동기술개발 TALEN과 Microarray를 이용한 후성유전학적 조절 transcriptomes 네트워크 완성