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5'에서 3' 방향으로
(a) 식물체의 구성적 프로모터;
(b) 시스테인 프로테이나아제 유전자의 센스 서열;
(c) 알파-아밀라아제 유전자의 첫 번째 인트론;
(d) 시스테인 프로테이나아제 유전자의 안티 센스 서열; 및
(e) 3' UTR
을 포함하는 식물세포 발현용 벡터
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2
제1항에 있어서, 상기 프로모터는 CaMV 35S 프로모터인 것을 특징으로 하는 벡터
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3
제2항에 있어서, 상기 CaMV 35S 프로모터는 중복된 CaMV 35S 프로모터 (du 35S-p)인 것을 특징으로 하는 벡터
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4
제1항에 있어서, 상기 3' UTR은 시스테인 프로테이나아제 유전자의 3' UTR인 것을 특징으로 하는 벡터
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제1항에 있어서, 상기 알파-아밀라아제는 벼의 알파-아밀라아제 3D, 벼의 알파-아밀라아제 3E 및 벼의 알파-아밀라아제 1A로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것인 벡터
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6
제1항에 있어서, 상기 벡터는 도 2에 기재된 pMYP108 또는 pMYP109인 벡터
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7
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 재조합 벡터로 형질전환된 숙주세포
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8
제7항에 있어서, 대장균인 것을 특징으로 하는 숙주세포
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9
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 재조합 벡터로 형질전환된 식물세포
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10
제9항에 있어서, 상기 형질전환된 식물은 담배, 벼, 감자, 토마토, 상추 및 고구마로 이루어진 군으로부터 선택된 식물세포
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11
식물세포 배양배지에서 당을 결핍시킨 배지 상에서, 제9항에 따른 형질전환된 식물세포를 현탁배양하는 것을 포함하는, 배양배지에 시스테인 프로테이나아제의 분비를 억제시키는 방법
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12
제11항에 있어서, 상기 식물세포 배양배지는 N6 배지, SH 배지, MS 배지, AA 배지 및 LS 배지로 이루어진 군으로부터 선택된 방법
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13
(a) 제9항 또는 10항에 따른 형질전환된 식물세포 및 재조합 목적 단백질의 형질전환체를 당 결핍 배지에서 공동 현탁배양하여, 시스테인 프로테이나아제의 분비가 억제된 상태로 재조합 목적 단백질을 공동발현하는 단계; 및
(b) 공동 현탁배양한 배양물로부터 재조합 목적 단백질을 분리하는 단계;
를 포함하는 식물세포를 이용한 재조합 목적 단백질의 생산을 증가시키는 방법
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제13항에 있어서, 상기 식물세포 배양배지는 N6 배지, SH 배지, MS 배지, AA 배지 및 LS 배지로 이루어진 군으로부터 선택된 목적 단백질의 생산을 증가시키는 방법
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15
제13항에 있어서, 상기 재조합 목적 단백질은 GM-CSF(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor), hIL-12(human interleukin-12), hIL-18( human interleukin-18), G-CSF(granulocyte colony-stimulating factor), t-PA(tissue-Plasminogen Activator), EGF(EGF(Epidermal Growth Factor), GH(Growth Hormone), BMP-2(Bone Morphogenetic Protein-2), BMP-7(Bone Morphogenetic Protein-7), OPG(Osteoproteoerin) 또는 항체인 것을 특징으로 하는 재조합 목적 단백질의 생산을 증가시키는 방법
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제15항에 있어서, 상기 재조합 목적 단백질은 인체 과립구 대식세포 콜로니 자극인자(human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, hGM-CSF)인 것을 특징으로 하는 재조합 목적 단백질의 생산을 증가시키는 방법
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