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(1) 목적 단백질을 암호화하는 발현 벡터로 대장균을 형질전환하는 단계;(2) 상기 형질전환된 대장균을 배양 배지에서 배양하는 단계;(3) 상기 배양된 대장균을 포도당 최소 배지에 접종하는 단계;(4) 상기 최소 배지에 접종한 대장균을 배양하는 단계;(5) 상기 배양된 대장균에 안정동위원소로 표지된 아미노산 용액을 투입하고, 동위원소표지 단백질의 발현을 유도하는 단계;(6) 상기 아미노산 용액이 투입된 대장균 배양액을 15 내지 25 ℃의 온도에서 8 내지 18 시간 동안 배양하는 단계;를 포함하는 안정동위원소 표지 단백질의 생산 방법
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제 1항에 있어서,상기 단계 (1)의 목적 단백질은 인간성장호르몬인 안정동위원소 표지 단백질의 생산 방법
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제 1항에 있어서,상기 단계 (5)의 안정동위원소는 13C15N-아르기닌인 안정 동위원소 표지 단백질의 생산 방법
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(1) 목적 단백질을 암호화하는 발현 벡터로 대장균을 형질전환하는 단계;(2) 상기 형질전환된 대장균을 배양 배지에서 배양하는 단계;(3) 상기 배양된 대장균을 포도당 최소 배지에 접종하는 단계;(4) 상기 최소 배지에 접종한 대장균을 배양하는 단계;(5) 상기 배양된 대장균에 안정동위원소로 표지된 아미노산 용액을 투입하고, 동위원소표지 단백질의 발현을 유도하는 단계;(6) 상기 아미노산 용액이 투입된 대장균 배양액을 15 내지 25 ℃의 온도에서 8 내지 18 시간 동안 배양하는 단계;(7) 상기 단계 (6)의 대장균을 완충용해용액으로 용해하는 단계;(8) 상기 대장균을 초음파 처리하고, 원심분리하여 동위원소표지 단백질을 회수하는 단계; 및(9) 상기 안정동위원소 표지 단백질을 정제하는 단계;를 포함하는 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 4항에 있어서,상기 단계 (1)의 목적 단백질은 인간성장호르몬인 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 5항에 있어서,상기 목적 단백질은 히스티딘 표지된 인간성장호르몬인 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 4항에 있어서,상기 안정동위원소 표지된 아미노산은 13C15N-아르기닌인 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 4항에 있어서,상기 안정동위원소 표지 단백질의 정제는 친화성 크로마토그래피 및 음이온-교환 크로마토그래피 중 하나 이상을 이용하는 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 8항에 있어서,상기 친화성 크로마토그래피의 컬럼은 Ni-NTA 컬럼인 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 8항에 있어서,상기 음이온-교환 크로마토그래피의 컬럼은 모노 큐 컬럼인 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 4항에 있어서,상기 단계 (9)의 안정동위원소 표지 단백질은 생물학적 활성이 저해되지 않는 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 4항에 있어서,상기 단계 (7)의 용해완충용액은 비이온성 변성제를 포함하는 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 12항에 있어서,상기 비이온성 변성제는 0
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제 4항에 있어서,상기 단계 (7)의 용해완충용액은 염이 포함되지 않는 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 14항에 있어서,상기 염은 염화나트륨 또는 염화칼륨인 안정동위원소 표지 단백질의 정제 방법
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제 4항에 있어서,상기 용해완충용액의 사용량은 대장균세포(펠렛) 30 mg에 대하여 0
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(1) 목적 단백질을 암호화하는 발현 벡터로 대장균을 형질전환하는 단계;(2) 상기 형질전환된 대장균을 배양 배지에서 배양하는 단계;(3) 상기 배양된 대장균을 포도당 최소 배지에 접종하는 단계;(4) 상기 최소 배지에 접종한 대장균을 배양하는 단계;(5) 상기 배양된 대장균에 안정동위원소로 표지된 아미노산 용액을 투입하고, 동위원소표지 단백질의 발현을 유도하는 단계;(6) 상기 아미노산 용액이 투입된 대장균 배양액을 15 내지 25 ℃의 온도에서 8 내지 18 시간 동안 배양하는 단계;(7) 상기 단계 (6)의 대장균을 완충용해용액으로 용해하는 단계;(8) 상기 대장균을 초음파 처리하고, 원심분리하여 동위원소표지 단백질을 회수하는 단계;(9) 상기 안정동위원소 표지 단백질을 정제하는 단계; 및(10) 정제한 안정동위원소 표지 단백질을 MALDI-TOF MS 또는 HPLC로 분석하는 단계;를 포함하는 안정동위원소 표지 단백질의 분석 방법
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제 17항에 있어서,상기 MALDI-TOF MS는 m/z 600 내지 3,500의 범위에서 질량 스펙트럼을 확인하는 안정동위원소 표지 단백질의 분석 방법
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제 17항에 있어서,상기 HPLC의 컬럼의 온도는 20 내지 50 ℃, 유속은 0
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