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1) 당질코르티코이드에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자 컨스트럭트 및 이를 포함하는 형질전환 세포주를 제조하는 단계; 2) 상기 형질전환 세포주에 당질코르티코이드와 검색 대상 화합물을 처리하여 배양하는 단계; 3) 상기 배양액으로부터 단백질을 분리하는 단계; 4) 분리된 단백질에 리포터 유전자의 기질을 첨가하여 효소-기질 반응을 유도하는 단계; 및 6) 상기 효소-기질 반응에 의해 생성된 발광정도를 측정하는 단계를 포함하는, 당질코르티코이드 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법
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제 1항에 있어서, 단계 1)의 유전자 컨스트럭트가 당질코르티코이드 반응성 서열 (glucocorticoid response element, GRE)과 리포터 유전자가 융합되어 당질코르티코이드에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자 컨스트럭트인 것을 특징으로 하는 검색방법
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제 2항에 있어서, GRE가 서열번호 1로 기재되는 염기서열을 갖는 것을 특징으로 하는 검색방법
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제 2항에 있어서, 리포터 유전자가 루시퍼라제 (luciferase), 알칼라인 포스파타제 (alkalin phosphatase), CAT (Chloramphenicol acetyl transferase) 및 갈락토시다아제 (galactosidase)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 검색방법
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제 2항에 있어서, 유전자 컨스트럭트가 도 2a에 기재되는 유전자 지도를 갖는 GRE-루시퍼라제인 것을 특징으로 하는 검색방법
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제 1항에 있어서, 단계 1)의 세포주는 GRE-루시퍼라제가 형질전환된 마우스 신경교종 세포주인 것을 특징으로 하는 검색방법
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제 1항에 있어서, 단계 4)의 기질이 루시퍼라제에 대한 루시페린인 것을 특징으로 하는 검색방법
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제 1항에 있어서, 단계 5)는 당질코르티코이드 유사물질 또는 저해물질에 의해 증가 또는 감소되는 루시퍼라제의 효소활성을 측정하는 것을 특징으로 하는 검색방법
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GRE-루시퍼라제 재조합 리포터 유전자를 포함하고 도 2a의 유전자 지도를 갖는 재조합 플라스미드 pGRE-Luc
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GRE-루시퍼라제 재조합 리포터 유전자를 포함하는 플라스미드 pGRE-Luc
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