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당질코르티코이드에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터유전자를 가지는 형질전환 세포주 및 이를 이용한당질코르티코이드 유사물질 및 저해물질의 생물학적검색방법

  • 기술번호 : KST2015187112
  • 담당센터 : 대구기술혁신센터
  • 전화번호 : 053-550-1450
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 당질코르티코이드 (glucocorticoid)에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자를 가지는 형질전환 세포주 및 이를 이용한 당질코르티코이드 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법에 관한 것으로, 구체적으로 당질코르티코이드에 의해 발현이 조절되는 제조합 리포터 유전자 컨스트럭트, 그의 형질전환 세포주 및 이를 이용하여 당질코르티코이드에 대한 유사물질 및 저해물질을 선별하는 생물학적 검색방법에 관한 것이다. 본 발명의 검색방법은 당질코르티코이드에 민감하게 반응하는 형질전환 세포주를 이용하므로 당질코르티코이드 유사물질에 의한 리포터 유전자 발현량의 증가와 저해물질에 의한 리포터 유전자 발현량의 감소를 통해 당질코르티코이드 유사물질 및 저해물질을 적은 비용으로 신속하고 간단하게 검색하는데 유용하게 이용될 수 있다.
Int. CL C12N 15/00 (2006.01)
CPC C12Q 1/66(2013.01)C12Q 1/66(2013.01)C12Q 1/66(2013.01)C12Q 1/66(2013.01)
출원번호/일자 1020010077211 (2001.12.07)
출원인 학교법인 포항공과대학교
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2003-0046896 (2003.06.18) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2001.12.07)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 학교법인 포항공과대학교 대한민국 경상북도 포항시 남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 서판길 대한민국 경상북도포항시남구
2 류성호 대한민국 경상북도포항시남구
3 신금주 대한민국 인천광역시서구
4 황유아 대한민국 경기도성남시분당구
5 김도한 대한민국 경상북도경산시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 오규환 대한민국 서울특별시 강남구 강남대로 ***, ****호 (역삼동, 유니온센터)(리제특허법률사무소)
2 장성구 대한민국 서울특별시 서초구 마방로 ** (양재동, 동원F&B빌딩)(제일특허법인(유))

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2001.12.07 수리 (Accepted) 1-1-2001-0323040-85
2 서지사항보정서
Amendment to Bibliographic items
2001.12.18 수리 (Accepted) 1-1-2001-5344429-17
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2003.11.27 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2003.12.18 수리 (Accepted) 9-1-2003-0061997-07
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2004.03.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2004-0091884-11
6 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2004.05.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2004-0194921-51
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.07.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5149263-30
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번호 청구항
1 1

1) 당질코르티코이드에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자 컨스트럭트 및 이를 포함하는 형질전환 세포주를 제조하는 단계;

2) 상기 형질전환 세포주에 당질코르티코이드와 검색 대상 화합물을 처리하여 배양하는 단계;

3) 상기 배양액으로부터 단백질을 분리하는 단계;

4) 분리된 단백질에 리포터 유전자의 기질을 첨가하여 효소-기질 반응을 유도하는 단계; 및

6) 상기 효소-기질 반응에 의해 생성된 발광정도를 측정하는 단계를 포함하는, 당질코르티코이드 유사물질 및 저해물질의 생물학적 검색방법

2 2

제 1항에 있어서,

단계 1)의 유전자 컨스트럭트가 당질코르티코이드 반응성 서열 (glucocorticoid response element, GRE)과 리포터 유전자가 융합되어 당질코르티코이드에 의해 발현이 조절되는 재조합 리포터 유전자 컨스트럭트인 것을 특징으로 하는 검색방법

3 3

제 2항에 있어서,

GRE가 서열번호 1로 기재되는 염기서열을 갖는 것을 특징으로 하는 검색방법

4 4

제 2항에 있어서,

리포터 유전자가 루시퍼라제 (luciferase), 알칼라인 포스파타제 (alkalin phosphatase), CAT (Chloramphenicol acetyl transferase) 및 갈락토시다아제 (galactosidase)로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 검색방법

5 5

제 2항에 있어서,

유전자 컨스트럭트가 도 2a에 기재되는 유전자 지도를 갖는 GRE-루시퍼라제인 것을 특징으로 하는 검색방법

6 6

제 1항에 있어서,

단계 1)의 세포주는 GRE-루시퍼라제가 형질전환된 마우스 신경교종 세포주인 것을 특징으로 하는 검색방법

7 7

제 1항에 있어서,

단계 4)의 기질이 루시퍼라제에 대한 루시페린인 것을 특징으로 하는 검색방법

8 8

제 1항에 있어서,

단계 5)는 당질코르티코이드 유사물질 또는 저해물질에 의해 증가 또는 감소되는 루시퍼라제의 효소활성을 측정하는 것을 특징으로 하는 검색방법

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GRE-루시퍼라제 재조합 리포터 유전자를 포함하고 도 2a의 유전자 지도를 갖는 재조합 플라스미드 pGRE-Luc

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GRE-루시퍼라제 재조합 리포터 유전자를 포함하는 플라스미드 pGRE-Luc

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