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2,3-부탄다이올 생산을 위한 크렙시엘라 뉴모니아 균주 및 제조방법

  • 기술번호 : KST2015187856
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 다음의 뉴클레오티드 서열로 구성된 군으로부터 선택되는 최소 1종의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 발현벡터로 형질전환 또는 공동 형질전환된(cotransformed) 2,3-부탄다이올 과발현용 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae) 균주를 제공한다: (a) 아세토락테이트 디카복실실레이즈(acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열; (b) 아세토락테이트 신타제(acetolactate synthase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열; 및 (c) 아세토인 리덕타제(acetoin reductase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열. 본 발명의 크렙시엘라 뉴모니아 균주는 야생종 크렙시엘라 뉴모니아 2와 비교하였을 때, 2,3-부탄다이올 대사경로에 필수적인 일부 유전자를 과발현 시키는 과정을 통해 포도당의 소모량에 따른 2,3-부탄다이올의 생산량이 20% 증가하였다.
Int. CL C12N 1/21 (2006.01) C12N 15/74 (2006.01) C12P 7/18 (2006.01)
CPC C12N 15/74(2013.01) C12N 15/74(2013.01)
출원번호/일자 1020110046626 (2011.05.18)
출원인 서강대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1298988-0000 (2013.08.16)
공개번호/일자 10-2012-0128776 (2012.11.28) 문서열기
공고번호/일자 (20130826) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2011.05.18)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서강대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 마포구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이진원 대한민국 서울특별시 송파구
2 엄영순 대한민국 서울특별시 성북구
3 이수진 대한민국 서울특별시 마포구
4 김보림 대한민국 서울특별시 금천구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 양부현 대한민국 서울특별시 송파구 오금로 **, 태원빌딩 **층, 특허팀(주식회사씨젠)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 서강대학교산학협력단 서울특별시 마포구
2 한국과학기술연구원 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2011.05.18 수리 (Accepted) 1-1-2011-0368266-29
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2012.05.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2012.06.25 수리 (Accepted) 9-1-2012-0052126-67
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2012.11.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0677887-13
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.01.09 수리 (Accepted) 1-1-2013-0023983-70
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2013.02.12 수리 (Accepted) 1-1-2013-0124426-52
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2013.03.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0208366-58
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2013.03.11 수리 (Accepted) 1-1-2013-0208368-49
9 등록결정서
Decision to grant		 2013.07.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0520102-00
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2017.01.11 수리 (Accepted) 4-1-2017-5005781-67
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.01.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5014626-89
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 발현벡터로 공동 형질전환된(cotransformed) 2,3-부탄다이올 과발현용 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae) 균주:(a) 프로모터 뉴클레오티드 서열; (b) 상기 프로모터 뉴클레오티드 서열에 작동적으로 결합되어 있고 서열목록 제 1 서열의 아미노산 서열을 포함하는 아세토락테이트 디카복실레이즈(acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열;(c) 상기 (b)의 뉴클레오티드 서열의 다운스트림에 연결되어 있고 서열목록 제 3 서열의 아미노산 서열을 포함하는 아세토인 리덕타제(acetoin reductase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열; 및(d) 상기 (c)의 뉴클레오티드 서열의 다운스트림에 연결되어 있고 서열목록 제 2 서열의 아미노산 서열을 포함하는 아세토락테이트 신타제(acetolactate synthase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열
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삭제
3 3
제 1 항에 있어서, 상기 아세토락테이트 디카복실실레이즈를 코딩하는 뉴클레오티드 서열, 아세토락테이트 신타제를 코딩하는 뉴클레오티드 서열 및 아세토인 리덕타제를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae)로부터 유래한 것을 특징으로 하는 2,3-부탄다이올 과발현용 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae) 균주
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삭제
5 5
제 1 항에 있어서, 상기 아세토락테이트 디카복실실레이즈를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열목록 제 4 서열의 뉴클레오티드 서열을 포함하고, 상기 아세토락테이트 신타제를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열목록 제 5 서열의 뉴클레오티드 서열을 포함하며, 상기 아세토인 리덕타제를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열목록 제 6 서열의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 2,3-부탄다이올 과발현용 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae) 균주
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제 1 항에 있어서, 상기 발현벡터는 도 2의 유전자 지도를 갖는 대장균-크렙시엘라 셔틀벡터 pUC18K이고, 상기 뉴클레오티드 서열은 pUC18K의 MCS(multiple cloning site)에 삽입되는 것을 특징으로 하는 2,3-부탄다이올 과발현용 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae) 균주
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다음 단계를 포함하는 2,3-부탄다이올 과발현용 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae) 균주의 제조방법:(a) (ⅰ) 프로모터 뉴클레오티드 서열; (ⅱ) 상기 프로모터 뉴클레오티드 서열에 작동적으로 결합되어 있고 서열목록 제 1 서열의 아미노산 서열을 포함하는 아세토락테이트 디카복실레이즈(acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열; (ⅲ) 상기 (ⅱ)의 뉴클레오티드 서열의 다운스트림에 연결되어 있고 서열목록 제 3 서열의 아미노산 서열을 포함하는 아세토인 리덕타제(acetoin reductase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열; 및 (ⅳ) 상기 (ⅲ)의 뉴클레오티드 서열의 다운스트림에 연결되어 있고 서열목록 제 2 서열의 아미노산 서열을 포함하는 아세토락테이트 신타제(acetolactate synthase)를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 발현벡터에 삽입시키는 단계;(b) 상기 뉴클레오티드 서열이 삽입된 발현벡터로 크렙시엘라 뉴모니아 균주를 형질전환시키는 단계
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제 7 항에 있어서, 상기 크렙시엘라 뉴모니아 균주를 발현시키는 단계 (b)는 전기충격 방법으로 수행되는 것을 특징으로 하는 2,3-부탄다이올 과발현용 크렙시엘라 뉴모니아(Klebsiella pneumoniae) 균주의 제조방법
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다음 단계를 포함하는 2,3-부탄다이올 생합성 방법:(a) 제 1 항, 제 3 항, 제 5 항 및 제 6 항 중 어느 한 항의 크렙시엘라 뉴모니아 균주를 배양하여 2,3-부탄다이올을 생합성하는 단계; 및(b) 상기 단계 (a)의 생합성된 2,3-부탄다이올을 수득하는 단계
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 지식경제부 서강대학교 산학협력단 산업원천기술개발사업 2,3-부탄다이올 생산용 균주 발굴 및 대사회로 최적화 기술 개발