| 1 |
1
1) 반하 9～17 중량%, 백출 12～22 중량%, 천마 6～12 중량%, 진피 6～12 중량%, 복령 9～17 중량%, 산사 9～17 중량%, 희렴 9～17 중량% 및 황련 9～17 중량%으로이루어진 혼합물에 혼합전 각각의 생약의 총 중량 대비 혹은 혼합이후에 혼합물의 총 중량 대비 1 ∼ 20배의 증류수, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜 또는 이들의 혼합 용매로 20 ∼ 100 ℃ 로 1 내지 6시간동안 추출하고 여과하는 단계;
2) 상기에서 얻어진 여액을 알콜 수용액으로 층분리한 후 감압 농축하는 단계;
3) 상기에서 얻어진 농축물에, 알콜을 가한 후 500 ∼ 1,000 rpm으로 원심진공 건조시키는 단계; 및
4) 상기에서 얻어진 건조 분말에 크로마토그래픽 지문법(chromatographic fingerprint) 을 수행하여 헤스페르딘(Hesperidine), 코프티신(Coptisine), 팔마틴(Palmatine) 및 베르베린(Berberine)의 지표성분을 파악하여 규격화 및 표준화하는 단계; 를 포함하는 것을 특징으로 하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 생약추출물의 제조방법
|
| 2 |
2
제1항에 있어서, 상기 1) 단계에서 추출은 70-100% 에탄올을 이용하여 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 3 |
3
제1항에 있어서, 상기 1) 단계에서 추출 용매는 3 내지 10배의 함량으로 사용하는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 4 |
4
제1항에 있어서, 상기 1) 단계에서 추출 온도는 50 ∼ 70 ℃ 범위내인 것을 특징으로 하는 방법
|
| 5 |
5
제1항에 있어서, 상기 1) 단계에서 추출 시간은 2 내지 5시간 범위내인 것을 특징으로 하는 방법
|
| 6 |
6
제1항에 있어서, 상기 4) 단계에서 크로마토그래픽 지문법은 HLPC 분석조건을 이용하여 a) 직선성(Linearity), b) 검출한계(LOD) 및 정량한계(LOQ), c) 정밀성(Inter-day, intra-day precision), 및 d) HMC05의 함량평가를 순차적으로 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 7 |
7
제6항에 있어서, 상기 HPLC 분석조건은 System으로서 Dionex ChromelonTM Chromatograpy Data System with P680 pump and UVD 340U detector을, Column으로서 Gemini C18, 5μm (4
|
| 8 |
8
제6항에 있어서, 상기 a) 직선성은 제7항의 HPLC 분석 조건을 이용하여 지표성분 으로서 헤스페르딘(Hesperidine), 코프티신(Coptisine), 팔마틴(Palmatine) 및 베르베린(Berberine) 각각에 대한 검량선을 작성하고 상관계수(R2)를 통하여 판단하는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 9 |
9
제8항에 있어서, 상기 지표성분 헤스페르딘(Hesperidine)에 대한 검량선은 y=25
|
| 10 |
10
제8항에 있어서, 상기 지표성분 코프티신(Coptisine)에 대한 검량선은 y=41
|
| 11 |
11
제8항에 있어서, 상기 지표성분 팔마틴(Palmatine)에 대한 검량선은 y=53
|
| 12 |
12
제6항에 있어서, 상기 b) 검출한계 (LOD) 및 정량한계 (LOQ)는 ICH Q2B guideline에 따라 다음 수학식 1 및 2에 기초하여 각각 계산하는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 13 |
13
제12항에 있어서, 상기 b) 검출한계 (LOD)와 정량한계 (LOQ)는 각각 헤스페르딘 (Hesperidin) 14μg 및 42 μg, 코프티신 (Coptisine) 15μg 및 45μg, 팔마틴 (Palmatine) 16μg 및 48μg, 베르베르딘 (Berberine) 13μg 및 38μg로 설정하는 것을 특징으로 하는 방법
|
| 14 |
14
제12항에 있어서, 상기 정밀성 (Inter-day, intra-day precision)은 직선성의 확인된 농도구간 중 3가지 농도를 선택하여 각각 3회 이상씩 측정하여 intra-day precision을 측정하고, 선택한 3가지 농도에 대하여 실험날짜를 달리하여 (연속된 1, 3, 5일) inter-day precision을 측정하고, 5% 이하의 상대표준편차 (R
|
| 15 |
15
제12항에 있어서, 상기 HMC05의 함량을 제7항의 HPLC 분석 조건으로 측정하고, 5% 이하의 상대표준편차 (R
|
| 16 |
16
제1항 내지 제15항중 어느 한항의 방법에 의해 제조된 반하, 백출, 천마, 진피, 복령, 산사, 희렴 및 황련을 혼합하여 일정 함량의 헤스페르딘, 코프티신, 팔마틴 및 베르베린을 지표성분으로 갖는 것을 특징으로 하는 생약추출물
|
| 17 |
17
제16항의 생약추출물을 유효성분으로 조성물의 총 중량 대비 0
|
| 18 |
18
제17항에 있어서, 상기 심혈관계 질환은 울혈성 심부전, 관상동맥 질환, 심근 경색, 고혈압, 동맥경화, 심장병, 심근경색, 고지혈증, 협심증, 뇌연화증, 뇌일혈, 뇌졸중, 뇌경색, 뇌출혈, 혈관 재협착 및 폐색, 잠재성 대사질환으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물
|
| 19 |
19
제17항에 있어서, 상기 조성물은 성인의 체중 기준으로 10 내지 2000mg/kg 범위내로 투여되는 것을 특징으로 하는 조성물
|
