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인간 Lad 유전자 프로모터에 의해 발현이 조절되는재조합 리포터 유전자를 포함하는 형질전환 세포주 및이를 이용하여 면역조절제 화합물을 검색하는 방법

  • 기술번호 : KST2015189504
  • 담당센터 : 인천기술혁신센터
  • 전화번호 : 032-420-3580
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 T 세포 수용체 (T cell receptor, TCR) 자극에 의해 활성이 조절되는 인간 Lad (Lck-associated adapter protein) 유전자의 프로모터에 리포터 유전자가 융합된 재조합 유전자 컨스트럭트, 이의 형질전환 세포주 및 이를 이용하여 LAD 단백질의 면역조절제 (immuno modulating agent)를 검색하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 세포주 및 검색방법은 TCR 자극에 의한 인간 Lad 프로모터의 활성 변화를 리포터 유전자의 발현 정도로 용이하게 확인할 수 있으므로 인간 Lad 프로모터 활성 조절을 통하여 LAD 단백질의 발현을 조절할 수 있는 면역조절제를 검색하는데 유용하게 사용될 수 있다.
Int. CL G01N 33/50 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)
CPC C12N 15/85(2013.01) C12N 15/85(2013.01) C12N 15/85(2013.01) C12N 15/85(2013.01) C12N 15/85(2013.01) C12N 15/85(2013.01)
출원번호/일자 1020040068620 (2004.08.30)
출원인 이화여자대학교 산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2006-0019917 (2006.03.06) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2004.08.30)
심사청구항수 11

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 윤영대 대한민국 서울 서대문구
2 이인무 대한민국 서울 서대문구
3 박인영 대한민국 서울 서대문구
4 조정우 대한민국 대전 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2004.08.30 수리 (Accepted) 1-1-2004-0391269-64
2 전자문서첨부서류제출서
Submission of Attachment to Electronic Document
2004.08.31 수리 (Accepted) 1-1-2004-5142269-29
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2005.11.09 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2005.12.15 수리 (Accepted) 9-1-2005-0082904-88
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2006.05.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0320384-80
6 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2006.08.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0463496-59
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번호 청구항
1 1
1) 인간 Lad 프로모터에 의해 리포터 유전자의 발현이 조절되는 재조합 유전자 컨스트럭트 및 이를 포함하는 형질전환 세포주를 제조하는 단계; 2) 상기 형질전환 세포주에 검색 대상 화합물을 처리하여 배양하는 단계; 3) 상기 배양액으로부터 단백질을 분리하는 단계; 및 4) 분리된 단백질의 발광정도를 측정하는 단계를 포함하는, 인간 Lad 프로모터의 활성을 조절할 수 있는 면역조절제의 선별방법
2 2
제 1항에 있어서, 단계 1)의 유전자 컨스트럭트가 인간 Lad 프로모터에 리포터 유전자가 융합된 것임을 특징으로 하는 선별방법
3 3
제 2항에 있어서, 리포터 유전자가 형광 단백질(fluoresence protein), 루시퍼라제 (luciferase), 알칼라인 포스파타아제 (alkaline phosphatase), CAT (chloramphenicol acetyl transferase) 및 갈락토시다아제 (galactosidase) 유전자로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 선별방법
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제 2항에 있어서, 유전자 컨스트럭트가 인간 Lad 프로모터에 녹색 형광 단백질(GFP) 유전자가 융합된 것임을 특징으로 하는 선별방법
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제 4항에 있어서, 유전자 컨스트럭트가 서열번호: 5로 기재되는 염기서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 선별방법
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제 1항에 있어서, 단계 1)의 세포주가 인간 Lad 프로모터에 녹색 형광 단백질 유전자가 융합된 재조합 유전자 컨스트럭트가 형질전환된 T 세포주인 것을 특징으로 하는 선별방법
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제 6항에 있어서, 형질전환된 T 세포주가 저켓 T 세포주 (pLad-IRES-EGFP Jurkat Cell, 기탁번호: KCLRF-BP-00101)인 것을 특징으로 하는 선별방법
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제 1항에 있어서, 단계 4)에서 리포터 유전자의 발현 정도에 따라 증가 또는 감소되는 형광도를 측정하여 검색 대상 화합물을 활성화제 또는 억제제로 판정하는 것을 특징으로 하는 선별방법
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서열번호: 5로 기재되는 염기서열을 가지는 pLad-IRES-EGFP 재조합 유전자 컨스트럭트
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제 9항의 재조합 유전자 컨스트럭트를 포함하는 플라스미드 pLad/IRES/EGFP
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제 10 항의 재조합 플라스미드 pLad/IRES/EGFP로 형질전환된 저켓 T 세포주 (pLad-IRES-EGFP Jurkat Cell, 기탁번호: KCLRF-BP-00101)
12 11
제 10 항의 재조합 플라스미드 pLad/IRES/EGFP로 형질전환된 저켓 T 세포주 (pLad-IRES-EGFP Jurkat Cell, 기탁번호: KCLRF-BP-00101)
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