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골격근절편을 하이드로젤 내에 함입시켜 배양하는 단계; 및 하이드로젤만을 분해하여 골격근절편으로부터 하이드로젤 내로 이동, 성장한 골격근줄기세포를 회수하는 단계;를 포함하는 골격근줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 골격근줄기세포는 (i)CD29, CD44, CD73, CD90 및 CD105로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 중간엽줄기세포 표지자 군에 양성인 면역학적 특성; (ii)CD140b, CD146, 및 SMA로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 혈관주위세포 표지자 군에 양성인 면역학적 특성; (iii) MyoD1 및 Pax7으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 위성세포 표지자 군에 음성인 면역학적 특성; (vi)Lin, CD3, CD14, CD19, CD34, 및 CD45로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 림프계세포 또는 조혈계세포 표지자 군에 음성인 면역학적 특성; 및 (vi)CD31 및 CD34으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 혈관내피세포 표지자 군에 음성인 면역학적 특성;으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 면역학적 특성을 가지는, 골격근줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 하이드로젤은 천연고분자로 이루어진, 골격근줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 하이드로젤은 피브린 하이드로젤이며, 상기 피브린 하이드로젤 1ml에 대하여 0
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제1항에 있어서, 상기 하이드로젤은 항섬유소용해제가 포함된, 골격근줄기세포의 배양방법
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제5항에 있어서, 상기 항섬유소용해제는 아미노카프로이드산(aminocaproid acid), 트란이그제믹산(tranexamic acid), 아프로티닌(aprotinin) 및 아미노메틸벤조익산(aminomethylbenzoic acid)로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인, 골격근줄기세포의 배양방법
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제5항에 있어서, 상기 하이드로젤은 1 ml에 대하여, 항섬유소용해제를 10 내지 1000 ㎍ 중량부를 포함하는, 골격근줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서, 상기 하이드로젤의 분해는 콜라지나아제, 젤라티나아제, 유로키나아제, 스트렙토키나아제, TPA(tissue plasminogen activator), 플라즈민(plasmin) 및 히알루로니다아제로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 효소를 통하여 분해되는, 골격근줄기세포의 배양방법
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제1항에 있어서, 1) 아미노카프로이드산(aminocaproid acid) 및 트란이그제믹산(tranexamic acid)으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 항섬유소용해제가 포함된 피브린 하이드로젤 내에 골격근절편을 함입시키는 제 1단계; 2) 성장배양액을 첨가하여 5 내지 30rpm 속도의 셰이커에서 3차원 장기배양(organ culture) 하는 제 2단계; 3) 유로키나아제, 스트렙토키나아제 및 플라즈민으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 분해효소를 처리하여 피브린 하이드로젤을 분해함으로, 골격근절편으로부터 하이드로젤 내로 이동, 성장한 골격근줄기세포 및 골격근절편을 회수하는 제 3단계; 및4) 상기 하이드로젤로부터 회수한 골격근줄기세포를 단층배양법으로 증폭시키는 제 4단계;를 포함하는 골격근줄기세포의 배양방법
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제9항에 있어서, 상기 제 3단계에서 회수된 골격근절편을 다시 제 1단계의 하이드로젤 내에 함입시켜 배양하는, 골격근줄기세포의 배양방법
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