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염색체 통합용 효모 발현 벡터 및 이의 용도

  • 기술번호 : KST2015189945
  • 담당센터 : 인천기술혁신센터
  • 전화번호 : 032-420-3580
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 (a) 목적 유전자 단편의 플랭킹 서열(flanking sequence)과 상동적인 서열; (b) (ⅰ) 멀티 클로닝 위치(multiple cloning site, MCS), (ⅱ) ScTDH3(Saccharomyces cerevisiae glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 3)의 프로모터 및 (ⅲ) ScADH1(alcohol dehydrogenase 1)의 터미네이터(terminator)를 포함하는 발현 모듈(expression module); 및 (c) (ⅰ) ScURA3의 프로모터, (ⅱ) 상기 프로모터에 작동적으로 연결된(operably linked) ScURA3의 ORF(open reading frame) 및 (ⅲ) 상기 프로모터 및 ORF 양쪽 말단에 결합된 ScURA3의 터미네이터(terminator)를 포함하는 절단 모듈(URA3 excision module)을 포함하는 효모 발현벡터(yeast expression vector) 및 이를 이용한 형질전환 방법에 관한 것이다. 본 발명의 벡터를 이용한 형질전환 방법은 안정적으로 목적 유전자를 안정적으로 염색체로 통합시킨 형질전환 효모 스트레인을 제작한 후 상기 효모 스트레인에 또 다른 목적 유전자의 변형을 유발시키는 연속적인 형질전환이 가능함에 따라, 소망하는 산물들(바이오매스)의 산업적 생산에 매우 유용하게 적용될 수 있다.
Int. CL C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/68 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12R 1/85 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020100104139 (2010.10.25)
출원인 이화여자대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1213179-0000 (2012.12.11)
공개번호/일자 10-2012-0042444 (2012.05.03) 문서열기
공고번호/일자 (20121218) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.10.25)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 서대문구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 최원자 대한민국 서울특별시 서대문구
2 김완기 대한민국 경기도 수원시 영통구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 양부현 대한민국 서울특별시 송파구 오금로 **, 태원빌딩 **층, 특허팀(주식회사씨젠)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 이화여자대학교 산학협력단 서울특별시 서대문구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2010.10.25 수리 (Accepted) 1-1-2010-0689559-52
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2011.05.18 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.06.17 수리 (Accepted) 9-1-2011-0053702-90
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2012.08.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0497978-92
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2012.08.29 수리 (Accepted) 1-1-2012-0697899-72
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2012.08.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2012-0697898-26
7 등록결정서
Decision to grant
2012.12.05 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0743130-52
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번호 청구항
1 1
(a) 목적 유전자의 플랭킹 서열(flanking sequence)과 상동적인 서열; (b) (ⅰ) 멀티 클로닝 위치(multiple cloning site, MCS), (ⅱ) ScTDH3(Saccharomyces cerevisiae glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 3)의 프로모터 및 (ⅲ) ScADH1(alcohol dehydrogenase 1)의 터미네이터(terminator)를 포함하는 발현 모듈(expression module); 및 (c) (ⅰ) ScURA3의 프로모터, (ⅱ) 상기 ScURA3의 프로모터에 작동적으로 연결된(operably linked) ScURA3의 ORF(open reading frame) 및 (ⅲ) 상기 ScURA3의 프로모터 및 ORF 양쪽 말단에 결합된 ScURA3의 터미네이터(terminator)를 포함하는 절단 모듈(URA3 excision module)을 포함하는 효모 발현벡터(yeast expression vector)
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 벡터는 Ura- 효모 스트레인에 적용되는 것을 특징으로 하는 효모 발현벡터
3 3
제 1 항에 있어서, 상기 벡터는 목적 유전자 단편의 플랭킹 서열(flanking sequence)과 상동적인 서열과 염색체 상의 목적 유전자 단편 간의 상동재조합(homologous recombination)을 통해 염색체 상으로 통합되는 것을 특징으로 하는 효모 발현벡터
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 벡터는 상동 재조합 후 URA3 절단을 통해 Ura- 효모 스트레인으로 전환시킨 후 신규 목적 유전자 단편을 연속적으로 염색체로 도입할 수 있는 것을 특징으로 하는 효모 발현벡터
5 5
제 4 항에 있어서, 상기 URA3 절단은 5-FOA(5-fluoroorotic acid) 처리에 의해 유도되는 것을 특징으로 하는 효모 발현벡터
6 6
제 1 항에 있어서, 상기 효모는 사카로마이세스 종(Saccharomyces spp
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제 6 항에 있어서, 상기 효모는 사카로마이세스 종인 것을 특징으로 하는 효모 발현벡터
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다음의 단계를 포함하는 효모에서 하나 이상의 목적 뉴클레오타이드 서열들의 연속적 형질전환 방법:(a) 제 1 항의 벡터의 MCS(multiple cloning site)에 목적 뉴클레오타이드 서열을 클로닝하는 단계;(b) 상기 벡터를 효모에 형질전환시키는 단계;(c) 상기 형질전환된 효모에서 URA3 절단을 유도하는 단계; 및(d) 상기 단계 (a) 및 (b)를 다른 목적 뉴클레오타이드 서열로 실시하는 단계
9 9
제 8 항에 있어서, 상기 형질전환은 사카로마이세스 종(Saccharomyces spp
10 10
제 9 항에 있어서, 상기 형질전환은 사카로마이세스 종에서 실시하는 것을 특징으로 하는 방법
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1 교육과학기술부 이화여자대학교 미래유망파이오니아사업 미생물 오닉스 융합기반 바이오에너지 생산 및 온실가스 저감 기술 개발 연구