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L-3,4-디하이드록시페닐알라닌(3,4-dihydroxyphenylalanine; L-DOPA)가 도입된 형광단백질을 포함하는 중금속 이온 검출용 바이오센서
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제 1항에 있어서, L-DOPA가 도입된 형광단백질은1) 아미노산 서열에서 타이로신(tyrosine)을 하나 이상 포함하는 단백질을 발현하는 타이로신 영양요구주(auxotroph)를 준비하는 단계; 2) 상기 타이로신 영양요구주를 타이로신이 결핍된 배지에 배양하는 단계; 3) 상기 배지에 L-DOPA를 첨가한 후 배양하는 단계; 및4) 배양된 영양요구주로부터 아미노산 서열에서 타이로신 대신에 L-DOPA가 포함되어 있는 형광단백질을 선별하는 단계를 포함하는 방법으로 제조되는 것을 특징으로 하는 바이오센서
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제 2항에 있어서, 상기 단계 1)의 형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein; GFP)인 것을 특징으로 하는 바이오센서
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제 2항에 있어서, 단계 2)의 타이로신 영양요구주는 대장균(E
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제 1항에 있어서, 중금속 이온은 구리 이온인 것을 특징으로 하는, 바이오센서
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제 1항에 있어서, 유리 기판; 상기 기판상에 적층된 실리콘 기판; 및 상기 실리콘 기판에 고정화된 L-DOPA가 포함된 형광단백질을 포함하는 것을 특징으로 하는, 바이오 센서
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1) L-DOPA가 포함된 형광단백질을 과요오드산염(NaIO4)으로 전처리하는 단계; 및2) 전처리된 L-DOPA가 도입된 형광단백질을 기판에 고정시키는 단계를 포함하는, L-DOPA가 도입된 형광단백질을 포함하는, 중금속 이온 검출용 바이오센서의 제조방법
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제 7항에 있어서, 1) 기판에 고분자층을 적층한 후, 패터닝하는 단계;2) 상기 패터닝된 고분자층에 마이크로 유체 채널을 형성하는 단계; 및3) 상기 마이크로 유체 채널에 과요오드산염(NaIO4)으로 전처리된 L-DOPA가 도입된 형광단백질을 적재함으로써 상기 채널에 L-DOPA가 도입된 형광단백질을 고정시키는 단계를 포함하는, 바이오센서의 제조방법
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1) 제 1항의 바이오센서에 피검시료를 처리하는 단계; 및2) 상기 바이오센서의 L-DOPA가 도입된 형광단백질에 결합된 중금속 이온을 확인하는 단계를 포함하는, 피검시료 내 중금속 이온의 검출 방법
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제 9항에 있어서, 중금속 이온의 결합 확인은 가시적(visually), 광학적(optical) 또는 전기화학적(electrochemically) 방법을 통해 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
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